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猪流感病毒一步法荧光定量RT-PCR诊断方法的建立

文献类型： 会议论文

第一作者： 徐敏

作者： 徐敏 1 ; 李志强 2 ; 黄元 1 ; 陈晶 1 ; 陈少勤 1 ; 张健騑 1 ; 赵亚华 3 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室，广东 广州，510640

2.华南农业大学 生命科学学院，广东 广州 510642

3.华南农业大学 生命科学学院

关键词： 猪流感病毒;诊断方法;一步法荧光定量RT-PCR法;效果评价

会议名称： 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次全国会员代表大会暨第三次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 313-318

摘要： 目的：为了建立一种在猪流感流行病学调查和临床诊断中应用的快速高效的诊断方法。方法：根据猪流感病毒(Swine Influenza virus，SIV)M基因的保守序列，设计并合成一对特异性引物和一条特异性TaqMan探针，建立了以RNA为反应模板的一步法荧光定量RT-PCR诊断方法。使用含有M基因的重组质粒作为标准品绘制标准曲线，该曲线效率值为2.014,误差值为0.005。结果：实验结果表明，该方法灵敏度极高，最低可检测到10个拷贝的核酸，临床样品检测结果也显示其灵敏度高于普通PCR和病毒分离法；特异性强，对猪群常见的其他6种病毒检测结果均为阴性。结论：临床样品检测显示该方法操作简单，可以用RNA作为模板直接检测，节省时间，而且特异性好灵敏度高，是可以应用于猪流感流行病学调查的一种可靠的诊断方法。

分类号： S858.28:S852.65

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