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靶向VP1和VP2双拷贝shRNA重组表达质粒抑制传染性法氏囊病病毒复制的研究

文献类型： 会议论文

第一作者： 欧阳伟

作者： 欧阳伟 1 ; 王永山 1 ; 马金荣 1 ; 张海彬 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京,210014

2.南京农业大学动物医学院,南京,210095

关键词： 鸡;传染性法氏囊病病毒;基因重组;免疫抑制

会议名称： 中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 842-847

摘要： 为抑制传染性法氏囊病病毒(IBDV)的复制,构建靶向IBDV VP1和VP2基因的鸡双向U6启动子(chU6)双拷贝shRNA重组表达质粒pchU6-shRNA12,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),接种IBDV,72h后,未出现细胞病变效应(CPE),病毒滴度小于101TCID50/0.1mL;而两个对照组均出现明显的CPE,病毒滴度均达到108.75TCID50/0.1mL.将pchU6-shRNA12与IBDV混合,接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔,96h后,鸡胚发育良好,病毒滴度小于101ELD50/0.1mL,荧光定量RT-PCR检测VP1和VP2基因,比单纯接种IBDV组分别降低了92％和95％;而两个对照组鸡胚均死亡,病毒滴度均达到107.00ELD50/0.1mL.本研究结果表明,chU6启动子在双拷贝shRNA重组表达质粒pchU6-shRNA12中能高效驱动双拷贝shRNA的转录,生成的siRNA在CEF(in vitro)和鸡胚体内(in vivo)均能有效抑制IBDV的复制。

分类号： S858.31:S852.65

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