文献类型： 会议论文
第一作者： 孙铭飞
作者： 孙铭飞 1 ; 廖申权 1 ; 戚南山 1 ; 吴彩艳 1 ; 吕敏娜 1 ; 李娟 1 ; 温列娜 2 ;
作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省兽医公共卫生公共实验室,广州510640
2.广东省农业科学院动物
关键词： 兽医学;柔嫩艾美耳球虫;二氢乳清酸脱氢酶;基因克隆;原核表达;酶动力学
会议名称： 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 238-238
摘要： 本研究应用电子克隆技术成功注释获得了柔嫩艾美耳球虫二氢乳清酸脱氢酶的基因序列,以E.Tenella广东株第二代裂殖子总RNA为模板,再利用RT-PCR技术扩增得到EtDHODH全长ORF序列.构建重组表达载体pCold Ⅰ-EtDHODH,转化到大肠杆菌Rosseta,通过IPTG 16℃低温诱导表达得到pCold Ⅰ-EtDHODH重组表达蛋白.以pCold Ⅰ-EtDHODH表达的重组蛋白进行酶动力学以及抑制动力学分析.本研究首次克隆了EtDHODH的基因,并且分析了重组蛋白的体外活性和生化特征,建立一个以EtDHODH为靶标的抑制物筛选模型,Leflunomide能够抑制EtDHODH的酶活性,看可以作为研发抗球虫药物的先导化合物.为E.tenella DHODH作为新型抗球虫药物研制的潜在靶标提供了理论和实验基础提示.
分类号： S852.723
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