文献类型： 会议论文
第一作者： 廖申权
作者： 廖申权 1 ; 孙铭飞 1 ; 戚南山 1 ; 吴彩艳 1 ; 吕敏娜 1 ; 李娟 1 ; 温列娜 2 ;
作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省兽医公共卫生公共实验室,广州510640
2.广东省农业科学院动物
关键词： 兽医学;鸡柔嫩艾美耳球虫;甘油醛-3-磷酸脱氢酶;生化特性
会议名称： 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 238-238
摘要： 本研究基于鸡球虫基因组信息,利用生物信息学注释、拼接E.tenella GAPD-H的基因序列；以E.Tenella第二代裂殖子总RNA为模板,运用RT-PCR技术扩增EtGAPDH基因序列,并进行体外重组表达；以响应曲面法分析温度及pH值对重组蛋白酶活性的影响,进行动力学分析.本研究成功克隆了EtGAPDH基因,并构建了重组表达质粒pET43 a-EtGA-PDH,Western blot分析表明已获得纯化的目的蛋白；经RSM分析rEtGAPDH的最适反应条件为34.6℃,pH7.1;对重组蛋白进行动力学分析结果显示,rEtGAPDH对glyceraledhydE-3-phosphate的Km=0.9619±0.1817 mM,Vmax=3.6162±0.3978 mmol/mg protein/min,对NAD+的Km=0.1164±0.0141 mM,Vmax=-4.3±0.2010 mmol/mg protein/min.本研究结果将为阐明EtGAPDH的功能,以及利用该靶标筛选新型抗球虫先导化合物奠定了基础.
分类号： S852.723
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