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牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法建立及验证

文献类型: 会议论文

第一作者: 林梅

作者: 林梅 1 ; 缪德年 2 ; 黄克和 1 ; 张克春 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学动物医学院,南京 210095

2.上海市农业科学院,上海 201106

关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒;鉴别诊断;聚合酶链式反应;疫情监测

会议名称: 第五届中国奶业大会

主办单位: 中国奶业协会

页码: 406-409

摘要: 牛传染性鼻气管炎是由牛疱疹病毒1型引起的一种传染性牛病.本文根据IBRV的TK基因序列,设计合成PCR的引物(P1/P2),分别为5'-TGGTACGGACGCCTTAAGTGG-3'和5'-GTTGATCTCGCGGAGGCA GTA-3,,以IBRV标准AV20毒株为对象,经引物浓度、退火温度、循环数的条件的优化,确定PCR最终反应体系为25ul,优化PCR反应体系.结果对IBR标准毒株DNA可以扩增出301bp的特异性片段,与牧场中常见的牛病毒性腹泻进行PCR特异性检测,10倍稀释法验证PCR优化反应后的灵敏性为可检测出0.002TCID50的病毒量.该篇PCR检测方法的建立可以为牧场进行IBR疫情监测提供技术手段.

分类号: S858.23:S855.3`S854.44

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