文献类型: 会议论文
第一作者: 刘华洁
作者: 刘华洁 1 ; 王永山 2 ; 杜希宁 1 ; 梅永杰 1 ; 王晓丽 3 ; 欧阳伟 4 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014
2.南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095
3.南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046
4.江苏省农业科学院兽医研究所,农
关键词: 传染性法氏囊病病毒;VP3基因;细胞表达;酶联免疫吸附测定;抗原反应性
会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会
主办单位: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会
页码: 174-180
摘要: 本文为分析传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组VP3蛋白的ELISA抗原反应性,将IBDV vp3基因插入杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHTA中,构建重组供体质粒pFastBacHTA-vp3并转化E.coli DH10Bac感受态细菌,经抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac-vp3.用pBac-vp3转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒vBac-vp3.对重组杆状病毒感染的Sf9细胞,用Weatern blot检测,在33ku处存在一条特异的蛋白条带;用间接免疫荧光(IFA)检测可见特异性荧光.以纯化的重组VP3蛋白为包被抗原建立IBDV抗体间接ELISA检测方法(VP3-ELISA),并与重组VP2蛋白包被抗原建立的VP2-ELISA和全病毒抗原ELISA (IDEXX-ELISA)比较,对42份不同鸡血清中的IBDV抗体进行检测,VP3-ELISA对阴阳性血清的区分度低于VP2-ELISA和IDEXX-ELISA;VP3-ELISA阳性检出率低于VP2-ELISA和IDEXX-ELISA;VP3-ELISA与IDEXX-ELISA的相关系数低于VP2-ELISA与IDEXX-ELISA的相关系数.本研究结果表明,在昆虫细胞中表达的重组VP3蛋白具有良好的特异性和抗原反应性,其ELISA抗原反应性弱于重组VP2蛋白和IBDV全病毒抗原.
分类号: S852.659.4
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