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标志基因法检测稗草对二氯喹啉酸抗药性

文献类型: 会议论文

第一作者: Li Gang

作者: Li Gang 1 ;

作者机构: 1.State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Institute of Quality Standards for Agricultural Products,the Institute of plant protection and microorganism, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310

关键词: 稗草;二氯喹啉酸;抗药性;基因表达;标志基因法

会议名称: 第十届全国杂草科学大会

主办单位: 中国植物保护学会

页码: 00000149-00000154

摘要: 以稗草EC-GH31基因(已克隆,待另文发表)作为标志基因,用Real-time PCR方法检测其在不同抗药性稗草植株的特征性表达量,提出稗草对二氯喹啉酸抗药性的检测方法, (1)以稗草EC-actin(C,)为内参,稗草EC-GH31基因在转录水平的相对表达量大于100为抗性型,相对表达量小于50为敏感型,相对表达量介于50~100为中间型; (2)使用常规用量的二氯喹啉酸在用药窗口期处理稗草后,在1h内其体内EC-GH31的表达量升高幅度小于1.5倍为抗性型,表达量升高幅度大于4.5倍为敏感型,表达量升高幅度介于1.5~4.5倍为中间型. 标志基因法检测杂草抗药性优势明显,首先它可实现大规模、高能通量的样品量检测,因而可迅速掌握大面积农田的杂草抗药性水平和范围;其次对当季稻田发生的杂草实现实时检测,掌握其抗药性水平;第三是检测周期短、出结果快,只需要几天便可得结果。其缺点是对仪器要求较高,荧光定量PCR仪是较贵。 一个标志基因只能检测一种或一类农药的杂草抗药性。所以挖掘农药的标志基因是发展和完善标志基因法的必由之路。农药的标志基因应该具备:在不同抗药性水平的杂草植株中,标志基因在转录水平的表达量存在差异,这种差异是区分杂草抗药性的定量指标,而且其表达量和抗药性水平存在较好的线性关系。为了进一步验证结果的准确性。标志基因还应该有其他的特征,比如在对应农药处理杂草后,在不同抗药性水平的杂草植株中,标志基因有不同的表达特征。植物GH3蛋白具有IAA等植物生长素氨基酸化合成酶和腺昔化合成酶活性。GH3基因在植物体内是组成性地低水平(low constitutive level)地表达,2,4-D和麦草畏等植物生长素类除草剂能够特异性地诱导植物GH3基因的高表达,因此可以通过测定植物中GH3基因的表达量,来衡量杂草对生长素类除草剂的抗感水平。

分类号: S451.2

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