文献类型： 会议论文
第一作者： 郭英鹏
作者： 郭英鹏 1 ; 李伟 2 ; 孙海燕 1 ; 于汉寿 1 ; 陈怀谷 2 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院植物保护研究所,南京210014
2.南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点实验室,南京210095
关键词： 小麦纹枯病;禾谷丝核菌;聚合酶链式反应;鉴定指标;定量检测
会议名称： 中国植物病理学会2011年学术年会
主办单位： 中国植物病理学会
页码： 169-169
摘要： 由禾谷丝核菌引起的小麦纹枯病是一种世界性小麦土传真菌病害，几乎遍布世界各温带小麦种植区。该病在我国小麦产区均有发生，为黄淮平原及长江流域麦区的主要病害之一。本研究根据禾谷丝核菌的β-微管蛋白基因(β-tublin)的DNA序列设计了一对禾谷丝核菌的特异性引物RtubF4和RtubR4，对该引物的特异性和灵敏性进行了测定，建立并优化了基于SYBR Green I荧光染料法的real-time PCR反应体系。结果表明:该对引物除对禾谷丝核菌能扩增出187bp大小的特异性条带外，对其他小麦茎基部病害病原菌均没有扩增产物，说明该引物具有较强的特异性，可以作为鉴定土壤中禾谷丝核菌的特异性引物。用该对引物对菌丝体DNA的10倍梯度稀释液进行Real-time PCR检测，可以检测到的DNA下限值为100fg。在此基础上制作了禾谷丝核菌基因组DNA的real-time PCR标准曲线:y=-3.395log(x)+21.53(R2=0.999),E=97%，其中Y表示Ct值，x表示DNA浓度，R2表示相关系数，E表示扩增效率。对人工接种的土壤中的禾谷丝核菌进行定量检测，可以检测到的下限值为10cfu或者4.36pg DNA。本研究建立的基于SYBR Green Ⅰ的real-time PCR检测体系可以准确地鉴定和定量检测土壤中禾谷丝核菌，这将有助于对田间病害的发生情况进行早期诊断和动态监测，为小麦纹枯病的防治提供理论依据。
分类号： S435.121.49
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