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核桃EST-SSR反应体系的优化

文献类型： 会议论文

第一作者： Qi Jianxun

作者： Qi Jianxun 1 ; 齐建勋 2 ; Zhu Yan 1 ; 朱艳 3 ;

作者机构： 1.Institute of Forestry and Pomology,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100093,China

2.北京市农林科学院林业果树研究所,北京100093

3.北京市农林科学

关键词： 核桃;遗传育种;遗传多样性;分子标记;种质鉴定

会议名称： 第七届全国干果生产与科研进展学术研讨会

主办单位： 中国园艺学会

页码： 120-125

摘要： 由于SSR-PCR反应易受Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物的浓度等因素影响，为此采用正交设计方法，筛选出最适宜的反应体系及扩增程序，为EST-SSR标记更好地应用于核桃遗传多样性分析、种质鉴定及分子标记辅助育种奠定良好的基础。本研究通过5因素(Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物)4水平正交实验,建立了核桃EST-SSR扩增最佳反应体系(201):0.75U Taq酶、2.5mmol/L Mg2+、0.4mol/L Primer、0.3mmol/L dNTPs、20ng模板DNA、双蒸水补足201.确定了PCR适宜的退火温度为55℃,最佳循环次数为30次。

分类号： S664.1:S603

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