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草莓镶脉病毒SVBV的RT-PCR检测

文献类型： 会议论文

第一作者： MIAO Li-xiang

作者： MIAO Li-xiang 1 ; 苗立祥 1 ; RONG Ning-ning 2 ; 荣宁宁 1 ; ZHANG Yu-chao 1 ; 张豫超 3 ; YANG Xiao-fang 1 ; 杨肖芳; ZHANG Qin; 张琴; JIANG Gui-hua; 蒋桂华;

作者机构： 1.浙江省农业科学院园艺研究所,杭州310021

2.浙江师范大学化学与生命科学学院,金华321004

3.舟山市定海区农业技术推广中心站,舟山316000

关键词： 草莓镶脉病毒;重组质粒;浓度检测;逆转录聚合酶链式反应

会议名称： 第十届中国（大连·金州）草莓文化旅游节会议

主办单位： 中国园艺学会

页码： 00000088-00000095

摘要： 本研究根据草莓镶脉病毒基因组序列设计PCR引物,用于筛选不同草莓样品,通过优化RT-PCR反应体系,建立了能稳定灵敏的检测草莓镶脉病毒技术体系.应用检测体系,成功对SVBV病毒侵染的草莓叶片材料进行了RT-PCR扩增,得到了期望大小的条带278bp特异带.测序后经blast序列比对,结果表明该特异带为草莓镶脉病毒序列.以此片段利用pEASY-T5Zero克隆载体构建重组质粒作为标准品,将标准重组质粒用NanoDrop2000进行浓度检测,按10倍梯度稀释成108～101拷贝/μl,建立了检测SVBV的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR方法.结果表明,此方法标准曲线的相关系数大于0.99,敏感性可达到101拷贝/μl,约为普通PCR的1000倍;用该方法检测了部分草莓品种的DNA样品.该方法具有很高的敏感性和稳定性,可用来快速检测草莓植株是否感染SVBV.

分类号： S436.68

  • 相关文献

[1]实时荧光定量PCR法检测草莓镶脉病毒. 苗立祥,荣宁宁,张豫超,杨肖芳,张琴,张慧琴,蒋桂华. 2016

[2]浙江省‘红颜’草莓镶脉病毒(SVBV)调查及其茎尖脱毒技术研究. YANG Xiao-fang,杨肖芳,MIAO Li-xiang,苗立祥,ZHANG Yu-chao,张豫超,JIANG Gui-hua,蒋桂华,HU Mei-hua. 2015

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