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一种野生稻茎尖的超低温保存及恢复培养方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 上海市农业生物基因中心

发明人: 林田;杨华;王飞;魏士伟;张前荣;王国军;石群芳;李天菲;龙萍;罗利军

专利号: CN201610131944.1

摘要: 一种野生稻茎尖的超低温保存及恢复培养方法,步骤有:取继代培养无菌组培苗,留基部放入不含激素MS培养基内培养,切离基部新萌植株,转入含0.3molL‑1蔗糖和脱落酸0.5‑5mgL‑1培养基上培养,再转入0.7molL‑1和含脱落酸0.5‑5mgL‑1培养基上预培养,剥取茎尖,在0.4 molL‑1蔗糖和甘油2moL‑1MS固体培养基预培养,在2‑4%的无钙离子海藻酸钠溶液中轻蘸,放在装载条上,再浸入含有0.1‑0.3%氯化钙、0.4 molL‑1蔗糖和2moL‑1甘油MS液体培养基中,经固定后,吸去多余液体,置于预处理溶液中处理,再转入玻璃化保护剂PVS2中进行冰浴处理,然后投入液氮中保存。其有益效果是,保存方法简便易行,稳定可靠,保存后野生稻恢复生长状况良好。

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