专利类型： 中国发明申请

专利权人： 中国水产科学研究院长江水产研究所

发明人： 冷小茜;危起伟;李创举;杜浩;叶欢

专利号： CN201610932965.3

摘要： 本发明公开了一种中华鲟VTG蛋白抗原及抗体及制备方法和应用，步骤是：1.重组中华鲟VTG蛋白抗原制备：1）设计上游引物，下游引物，扩增结构域截短序列；2）将pMD‑18T‑VTG质粒及Pet32a(+)空载体分别采用EcoRI和XhoI进行酶切后纯化目的片段，将二者连接为Pet32a(+)‑VTG转化DH5a，涂于含有氨苄青霉素的LB培养基上培养；3）将Pet32a(+)‑VTG质粒转化BL21(DE3)感受态细胞，涂于含有氨苄青霉素的LB固体培养基上培养；4）将收集的菌体沉淀，用含8M尿素的蛋白缓冲液重悬沉淀，过滤收集上清得到重组蛋白。2.重组中华鲟VTG蛋白抗原免疫日本大耳兔获得中华鲟VTG蛋白抗体。3.中华鲟VTG蛋白抗原及抗体的用途。中华鲟VTG蛋白抗体与VTG蛋白抗原免疫性好，效价能达到1：1000，检测结果阳性率高，具有良好的临床适用性。