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一种适于二维电泳的猪肺炎支原体外膜蛋白的提取方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 河南省农业科学院畜牧兽医研究所

发明人： 李海利;王克领;郎利敏;徐引弟;朱文豪;施巧婷;游一;张清娴;张立宪;郑万录;许峰

专利号： CN201410492912.5

摘要： 本发明涉及一种适于二维电泳的猪肺炎支原体外膜蛋白提取方法，包括菌体培养与收集、液氮研磨、蛋白提取裂解、融冻、超声震荡和醋酸铵乙醇溶液处理等步骤，然后收集蛋白质沉淀并用丙酮漂洗，真空冷冻处理；再经样品裂解，最后离心处理后得到上清液。该发明能大大提高蛋白提取的效率和纯净度，具有操作简便、省工省时、提取效率高、干扰物少等特点，比较适合于蛋白提取困难、提取收率低、干扰杂质多的材料；同时所得蛋白易于二次溶解、杂质和干扰物少，完全满足双向电泳第一向和第二向的要求，可获得分辨率高、重复性好、蛋白点分布均匀、蛋白点清晰的图谱，对猪肺炎支原体组学研究及免疫蛋白的筛选和疫苗候选蛋白筛选的研究具有重要意义。

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