专利类型： 中国发明申请

专利权人： 江苏省农业科学院

发明人： 孙利厂;王冉;张莉莉;庞茂达;何涛

专利号： CN201611123536.8

摘要： 本发明提供了一种CRISPR‑Cas9体外敲除耐药基因mcr‑1的方法及其专用细胞穿透肽，即首先依据mcr‑1耐药基因sgRNA识别区的靶点序列构建CRISPR‑Cas9系统，靶点序列的碱基序列如SEQ NO.1所示，所构建CRISPR‑Cas9系统中，是将T7启动子插入sgRNA转录起始位点前，构建Cas9蛋白的原核表达载体，以T7启动子进行调控，接着利用专用细胞穿透肽CPP5a将mcr‑1耐药基因敲除载体pCas9‑mcr带入微生物细胞内，所述微生物种类可以为革兰氏阴性细菌，以实现在体外敲除微生物mcr‑1耐药基因。