专利类型： 中国发明申请

专利权人： 山西省农业科学院高粱研究所

发明人： 郝艳芳;张微;刘勇;王良群;马涌;杨伟;白鸿雁;武擘;侯丽萍;张晓娟

专利号： CN201611204000.9

摘要： 本发明公开了一种高粱体细胞悬浮培养方法，具体包括以下步骤：高粱种子先用70％乙醇浸泡1‑3min，再用无菌水冲洗，然后用0.1g/100mL的HgCl2水溶液浸泡10‑20min，HgCl2水溶液浸泡过程中加入2滴吐温‑20，最后无菌水冲洗，得到无菌高粱种子；制备高粱愈伤组织；选取合适的愈伤组织接种于液体培养基中培养，每隔7天继代一次，每次继代时，将新、旧液体培养基以体积比为2：1的比例混合后作为继代培养的培养基，总共培养42‑45天后获得高粱体细胞悬浮系。本发明的细胞悬浮培养方法，愈伤诱导率高，建立的细胞悬浮系不褐化，容易观察，且悬浮细胞系细胞密度大，游离细胞体积小，细胞质浓厚，近圆形细胞比例达70％以上，活细胞率达60％以上，细胞分裂生长旺盛。