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一种PEG介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体遗传转化的方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 河南省农业科学院

发明人： 苗红梅;段迎辉;常淑娴;张海洋

专利号： CN201210538745.4

摘要： 本发明公开了一种PEG介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体遗传转化的方法，属于生物技术领域。本发明利用PEG介导的原生质体转化方法，通过尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体的制备和转化以及转化子的筛选，将含有筛选标记的外源DNA片段转化入尖孢镰刀菌芝麻专化型基因组中。本发明实现了PEG介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体转化，建立了一套完整的遗传转化、筛选方法，获得大量高强度表达潮霉素抗性蛋白和绿色荧光蛋白且稳定遗传的转化菌株，转化效率可达7667个转化子/mg DNA。另外，本发明转化时所用载体具有增强型绿色荧光蛋白基因以及真菌中的强启动子gpd，有效提高了转化菌体所发出的荧光强度。

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