专利类型： 中国发明申请
专利权人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
发明人： 王娜;陈松林;沙珍霞;王贤丽
专利号： CN200910016926.9
摘要： 大菱鲆肾细胞系的构建方法，首先配制细胞培养液，以大菱鲆的肾脏组织为材料，漂洗剪碎后，用0.5％胰蛋白酶室温消化30分钟，采用200目尼龙纱网过滤收集细胞，将细胞以5-10×105个/瓶的量分装至25cm2培养瓶中，置于24℃培养。以后每隔4天半量更换细胞培养液，待原代细胞生长为单层时，用0.25％的胰蛋白酶消化细胞进行传代；8-10天传代1次，传至第8代时，细胞培养液中血清含量由20％减为10％，此时细胞系建立成功。利用这种方法获得的大菱鲆肾细胞系形态为成纤维样，可以连续传代40代以上，细胞系可以直接应用于病原特性研究、疫苗研制及功能基因研究；该构建方法适用于其他鱼类构建肾细胞系。
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