专利类型: 中国发明申请
专利权人: 广东省农业科学院作物研究所
发明人: 张二华;梁炫强;陈小平
专利号: CN200910193330.6
摘要: 本发明提供了一种蛋白质双向电泳方法。该方法首先用盐酸胍溶液溶解新鲜制备或冻存的蛋白干粉,再加入终浓度分别为2-5mM的三丁基膦和50-100mM的2-乙烯基吡啶以还原并烷基化蛋白;避光静置反应60-120分钟后加入5-10倍体积-20℃预冷的无水乙醇沉淀蛋白;再用乙醇洗除盐分,晾干或冻干后即得烷基化蛋白。烷基化蛋白用于双向电泳分析时,等电聚焦上样缓冲液中可不加还原剂,胶条的平衡也可简化为一步,同时平衡液中也无需再添加还原剂和/或烷基化试剂。本发明可提高蛋白质的溶解性,以及在电泳过程中的稳定性,简化双向电泳的操作步骤进而减少蛋白的损失。能广泛用于蛋白质组学领域。
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