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鱼源链球菌脉冲场凝胶电泳快速分型方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

发明人: 杨弘;祝璟琳;邹芝英;单航宇;韩珏

专利号: CN201310103457.0

摘要: 本发明涉及一种鱼源链球菌脉冲场凝胶电泳快速分型方法,以经分离并培养得到的链球菌为分析样品,依次进行以下各步骤:胶块制备、细胞裂解、洗胶块、胶块内DNA的酶切、加样、电泳、图像获取;所述的胶块制备、细胞裂解、洗胶块、加样和图像获取步骤都按照常规脉冲场凝胶电泳方法进行,并对各参数进行优化;所述的洗胶块的水浴温度为50℃;所述的胶块内DNA的酶切酶为SmaI酶;所述的电泳参数中,电压为6V/cm,对应的脉冲时间为10~45秒,电场夹角为120°,电泳温度为14℃,总电泳时间为22小时。本发明对鱼源链球菌区分能力更强,整个实验流程耗时缩短了3~4天,这对于鱼源链球菌病监测、传染源追踪、传播途径调查和识别等具有重要意义。

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