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转基因猪表达人血清白蛋白的研究

文献类型: 获奖成果

作者:

获奖名称: 科技进步奖

获奖等级: 三等奖

关键词: 人血清;蛋;血清白蛋白;转基因;蛋白;白蛋白;转基因猪;人血清白蛋白;表;表达;猪;研究;基因;血清

第一完成单位: 湖北省农业科学院

获奖时间: 2003

摘要:   本项目以分子生物学、转基因动物、动物繁殖和生物化学的理论为原理,首先构建适宜于猪肝细胞表达的人血清白蛋白基因,然后采用原核注射和胚胎移植技术,得到整合并表达人血清白蛋白的转基因猪,进一步的研究将是解决人猪血中分离纯化人血清白蛋白的技术,最终得到纯化的人血清白蛋白,将主要应用于医疗卫生领域。其产品将与人源血清白蛋白一样,应用于治疗因失血、创伤、癌症等引起的低蛋白血症。   本项目转基因的效率达到1.04%以上,得到的4头转HSA基因猪,有3头表达了HSA,其表达量分别为20.3g/l,3.5g/l,0.7g/l。其最高表达量(20.3g/l)占血清白蛋白的总量的50%左右(47.2~59.7%)。同国内外同类技术的比较:国内目前尚无转基因血液表达外源基因的报道;国外Swanson等人1992年得到的转基因猪表达人血红蛋白占猪血红蛋白总量的9%;john S logan等人所得到的转基因猪表达人血红蛋白,其最高表达水平占血红蛋白总量的24%。可见,本项目的表达水平高于国外已有报道的水平。   本项目的创造性体现在,首次将HSA cDNA 与HSA、SSA的侧翼调控序列相连接,构建成pSHSA重组基因。其结果,大大提高了转基因动物HSA的表达水平,达到国内外已有报道的最高水平。   本项目进一步研究,将从转基因猪的血液中提取市场上紧缺的人血清白蛋白,应用于人的医疗保健事业中。按目前的表达量和HSA的市场价格,一头猪的年产值将达到1.7万元,纯利不少于1万元。办一个万头的转基因猪场,年纯利不低于1亿元人民币,可见其直接经济效益之巨大。同时不仅可以解决目前生产HSA人血资源严重不足的问题,还可以解决人血液制品各种病毒(乙肝、艾滋病等)的传播。其社会意义也是巨大的。   本项目的推广应用,尚需解决从猪血液中提纯HSA的技术。存在问题:需进一步提高表达量,最好是用HSA全部替代SSA,以便于建立分离纯化技术。改进意见:拟采取“基因完全置换”的技术,用HSA基因替换猪基因组中的SSA基因,达到所得到的转基因猪血清白蛋白全部为人血蛋白的目的。

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