酶解法提取罗非鱼血液中血红素的工艺条件优化

岑剑伟; 李来好; 杨贤庆; 刘在军; 郝淑贤; 周婉君; 魏涯; 《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为更加科学有效地利用丰富的罗非鱼血液资源,研究酶解法提取罗非鱼血液中血红素的工艺条件,通过单因素试验和正交试验确定了复合酶提取血红素的最佳酶解条件为:温度40℃、pH 8.0、底物质量浓度6 g/100 mL、酶添加量8000 U/g、酶解时间2 h。再经过热处理、酸沉淀和真空冷冻干燥等纯化工艺后得血红素终产品。在此条件下,血红素提取率达到80.9%,产品纯度为28.2%。该工艺简单可行,生产成本低,适合工业化生产,不仅能有效地减少环境污染,还能显著地增加企业产品的附加值。

关键词： 罗非鱼血 血红素 酶解 提取

 全文链接 请求原文

黄芪多糖对鲤化学性肝细胞损伤的抑制作用

贾睿; 杜金梁; 曹丽萍; 徐跑; 殷国俊; 柏爱旭; 《华中农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为探讨黄芪多糖对鲤肝细胞的保护作用,利用8 mmol/L的四氯化碳(CCl4)作用肝细胞4 h来构建鲤肝细胞体外损伤模型,用不同质量浓度(0.2、0.4和0.8 mg/mL)的黄芪多糖分别前处理、后处理和前后处理肝细胞,然后观察肝细胞形态,检测肝细胞活力,细胞上清中谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以及肝细胞中细胞色素P450酶1A和3A(CYP1A和CYP3A)mRNA的相对表达量。结果显示:黄芪多糖显著地抑制由CCl4损伤引起的肝细胞培养上清中GPT、GOT、LDH活性和MDA含量的升高,提高SOD活性及肝细胞的活力(P<0.05或P<0.01);同时,0.4和0.8 mg/mL黄芪多糖显著提高CYP1A mRNA的相对表达量(P<0.05),0.4 mg/mL黄芪多糖显著提高CYP3A mRNA的相对表达量(P<0.05),形态学观察结果也显示黄芪多糖有效地抑制鲤肝细胞死亡。以上结果表明,黄芪多糖可有效保护鲤化学性肝细胞损伤,并对CYP1A和CYP3A的表达有积极作用。

关键词： 鲤 肝细胞 黄芪多糖 细胞色素P450 四氯化碳

 全文链接 请求原文

罗非鱼围栏越冬技术要点及其在生产中的应用

祝璟琳; 杨弘; 杨军; 罗永巨; 韩珏; 《科学养鱼 》 2014 北大核心

摘要：罗非鱼的生存水温在12℃以上,除海南省外,我国其他地区养殖罗非鱼冬季需采取保温措施才能越冬。目前罗非鱼保温越冬方法有人工加温和温(热)水保温两种。人工加温需要用锅炉或电加热设备,设施配套复杂,成本较高,浪费能源,不便普及推广应

 全文链接 请求原文

锦鲤疱疹病毒GZ1301株的分离与鉴定

李莹莹; 王庆; 曾伟伟; 潘厚军; 王英英; 刘春; 梁红茹; 石存斌; 吴淑勤; 《水产学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：2013年4月,广东省一锦鲤养殖场暴发不明病因疾病,濒死锦鲤在塘边游动缓慢直至死亡,死亡率高达100%。现场采样发现,发病锦鲤体长25 cm,眼球凹陷,胸鳍及腹鳍出现出血斑点,解剖发现内脏器官包括肝、脾、肾肿大。细菌分离结果显示,内脏器官肝脏和肾脏中未分离到细菌。提取自然发病鱼的肝、脾、肾、鳃组织DNA作为模板,采用世界动物卫生组织(OIE)推荐的锦鲤疱疹病毒(KHV)检测引物进行PCR扩增,均能扩增出预期大小的特异性产物。NCBI的Blast搜索结果显示,扩增序列与KHV胸苷激酶(thymidine kinase,TK)基因核苷酸序列同源性为99%。病鱼内脏组织研磨过滤除菌后,腹腔注射20尾锦鲤,可复制出与自然发病相似的症状,并于7 d内全部死亡。取病鱼的鳃和肾脏研磨过滤除菌后进行细胞感染实验,结果显示,组织滤液感染CCB细胞后,盲传5代可以观察到典型的细胞病变效应(CPE)。将出现典型CPE的CCB细胞进行超薄切片制备和电镜观察,电镜下病毒呈对称20面体,直径约100 nm。将出现典型CPE的细胞进行间接免疫荧光实验,可以观察到特异性荧光。根据TK基因全长序列建立系统进化树,证实该毒株为KHV亚洲型毒株,暂命名为KHV-GZ1301株。研究结果可为KHV起源进化、分类以及疾病防控提供重要材料。

关键词： 锦鲤 锦鲤疱疹病毒 TK基因 病毒鉴定

 全文链接 请求原文

微颗粒饲料中添加精胺对半滑舌鳎稚鱼生长和肠道发育的影响

于朝磊; 常青; 秦帮勇; 王新星; 《水生生物学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为获知微颗粒饲料中添加精胺对半滑舌鳎仔稚鱼肠道发育的影响,试验以添加0,0.10%,0.33%精胺的微颗粒饲料(F1、F2、F3)和活饵料卤虫(F4)饲喂初始体长为2 cm左右的半滑舌鳎稚鱼。养殖28d后结果表明,卤虫组(F4)的特定生长率最高,饲料组中F2组特定生长率要显著高于F1和F3组(P<0.05)。F3组的存活率仅为60.27%,显著低于其他各组(P<0.05)。消化酶活力测定结果中,F2组在14d和28d时都含有较高的碱性磷酸酶比活力和亮氨酸氨基肽酶比活力,较低的亮氨酸-丙氨酸肽酶比活力。卤虫组的肠道发育情况最好,微绒毛长度显著大于其他各组(P<0.05);黏膜厚度略小于F2组,但是没有显著性差异(P>0.05);饲料组中F2组微绒毛长度和黏膜厚度都显著大于F1和F3组(P<0.05)。研究表明,在微颗粒饲料中添加0.10%的精胺(F2组)对半滑舌鳎稚鱼肠道发育有促进作用。

关键词： 微颗粒饲料 精胺 半滑舌鳎 稚鱼 肠道发育

 全文链接 请求原文

刀额新对虾原代淋巴细胞培养及其感染白斑综合征病毒(WSSV)的病理特征

国子娟; 王印庚; 荣小军; 廖梅杰; 郭华荣; 韩倩; 《水产学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为深入了解对虾白斑综合征病毒(WSSV)的致病机理和体外培养的对虾细胞对WSSV的敏感性,实验以1.5×L-15培养基培养刀额新对虾原代淋巴细胞,待细胞形成单层后接种WSSV,通过倒置显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜观察接种病毒后细胞的病理变化。结果显示,使用1.5×L-15培养基培养对虾淋巴组织,3 h后可观察到有细胞迁出,并能迅速形成单层,36 h后细胞的迁出汇合率可达80%,且能存活20 d以上。接种WSSV 24 h后,出现病变的细胞变圆、漂浮,细胞之间的网状结构消失,最后细胞破碎、溶解;接种WSSV 48 h后Hoechst 33342染色结果显示,感染的细胞核深染,且变形、膨大;电镜下,细胞核内含大量成簇分布的杆状病毒,细胞器被挤向细胞边缘,细胞膜轮廓模糊。研究表明,纯化的病毒粒子接种体外培养的淋巴细胞,能够使其产生明显病理变化,证明了WSSV对体外培养的淋巴细胞具有感染力,并且可在淋巴细胞中增殖。

关键词： 刀额新对虾 白斑综合征病毒(WSSV) 淋巴组织 原代细胞培养 感染 病理

 全文链接 请求原文

鲤疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型研究进展

罗丹; 梁利国; 谢骏; 吴旭东; 《水生态学杂志 》 2014 北大核心

摘要：近年来,鲤疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型(Cyprinid herpesvirusⅠ、Ⅱ、Ⅲ)病毒给我国鲤科鱼的养殖造成了严重的经济损失。CyHV-Ⅰ主要危害1龄以上的鲤,对鲫、圆腹雅罗鱼、鲤与金鱼杂交种等也有危害。CyHV-Ⅱ仅感染金鱼、鲫及其普通变种如异育银鲫、金鱼和鲤的杂交体,对鱼卵、鱼苗、鱼种、亲鱼等各个时期均有危害,而幼鱼较成鱼易受到感染。鲤除了幼鱼不易受CyHV-Ⅲ影响,其他所有龄期均对其敏感。CyHV-Ⅲ不仅鲤能感染,其他鲤科鱼、锦鲤和鲫的杂交后代、锦鲤和金鱼的杂交后代均对其易感,金鱼、鲟均可作为CyHV-Ⅲ潜在的携带载体。就3种病毒的流行现状,临床症状,引发疾病的病理特征,检测方法等取得的研究进展进行综述。

关键词： 鲤科疱疹病毒Ⅰ型 鲤科疱疹病毒Ⅱ型 鲤科疱疹病毒Ⅲ型 病理特征 临床症状 检测方法

 全文链接 请求原文

基于分期的实际种群分析法研究

陈作志; 袁蔚文; 张俊; 范江涛; 许友伟; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：实际种群分析法(virtual population analysis,VPA)是开展渔业资源评估最有效的技术之一,一般以世代为基础开展评估。基于实际渔业存在渔汛期、休渔期等特点,本研究运用分期评估的概念对传统实际种群分析进行了扩展,即分期种群分析法,并根据不同时期的捕捞死亡特征,评估与分析了4种不同分期情景对评估结果的影响。模拟研究表明,由于分期不当造成评估结果的误差为6%~33%。文中一并给出了开展分期实际种群分析法对资料收集和参数评估的要求。该方法克服了传统实际种群分析法中没有全面分期产生的误差,使其扩展至适合于评估全年捕捞死亡率不稳定或非连续性渔业种群,评估结果也更接近于评估种群的真实值。

关键词： 实际种群分析 扩展 渔期 渔业资源评估

 全文链接 请求原文

大鲵虹彩病毒流行株的分离及其主衣壳蛋白编码基因序列比较分析

徐进; 张辉; 肖汉兵; 曾令兵; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：大鲵虹彩病毒(giant salamander iridovirus,GSIV)是近年中国大陆新发现的引起人工养殖大鲵(Andrias davidianus)大规模死亡的病毒病原。为了揭示大鲵虹彩病毒流行株的基因型差异,本研究对2010–2012年采集自全国不同大鲵养殖区域的患虹彩病毒病的大鲵样本进行了分子检测、病毒分离培养以及病毒主衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因测序与比对分析。结果显示,采自陕西、湖北、湖南、浙江、江西、福建等省的10个样本检测为阳性,通过细胞培养获得10株病毒流行株。对该10株流行株MCP基因的测序与比对分析发现,核苷酸序列相似性达到99.7%~100%,其推测的氨基酸序列无明显差异,证实中国大鲵虹彩病毒流行株属同一基因型。系统进化树分析结果表明,所选大鲵虹彩病毒与蛙病毒分别聚为一枝,但其亲缘关系较近。本研究结果旨为大鲵虹彩病毒病的疫苗研制及其免疫防控技术研究奠定基础。

关键词： 大鲵虹彩病毒 流行株 主衣壳蛋白 基因序列 比对分析

 全文链接 请求原文

广东南澳海水养殖区沉积物中AVS和SEM

谷阳光; 杨宇峰; 林钦; 《深圳大学学报(理工版) 》 2014 EI 北大核心

摘要：采集广东省南澳岛白沙湾海水养殖区不同养殖类型的表层和柱状沉积物,分析了沉积物中酸挥发性硫化物(acid volatile sulfides,AVS)和同步提取重金属(simultaneously extracted metals,SEM)Cd、Pb、Cr、Ni、Cu以及Zn的含量.结果发现,白沙湾表层沉积物(干质量)中AVS和∑SEM质量摩尔浓度分别介于0.04~37.62和1.54~3.82μmol/g,平均值分别为6.36和2.45μmol/g.鱼类养殖区表层沉积物中AVS、∑SEM以及AVS与∑SEM比值均最高.柱状沉积物(干质量)中AVS和∑SEM干质量摩尔浓度范围为0.04~16.27和1.72~21.14μmol/g,平均值分别为2.26和4.71μmol/g.鱼类养殖区的AVS质量摩尔浓度及贝类养殖区的∑SEM从底层到表层均迅速增加.鱼类养殖区、贝类养殖区和龙须菜栽培区AVS与∑SEM比值均大于1,表明该养殖海域因重金属与硫化物结合导致水生生物受重金属危害较轻.

关键词： 海洋地球化学 酸挥发性硫化物 同步提取重金属 沉积物 水产养殖 深度分布 生物有效性 广东南澳岛

 全文链接 请求原文