一种高效提取普通小球藻叶绿体DNA的新方法

许夏冰; 谭德冠; 孙雪飘; 弓淑芬; 张家明; 《植物生理学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：本文采用尿素-月桂酰肌氨酸钠(urea-sarkosyl)法,用于分离带有坚硬细胞壁小球藻的高纯度叶绿体DNA(cpDNA)。将对数生长期的小球藻收集后置于冰上研磨,percoll密度梯度离心收集叶绿体层,显微观察表明叶绿体经梯度离心后形态完整。采用尿素-月桂酰肌氨酸钠法、蛋白酶K消化及酚/氯仿/异戊醇抽提,获得了高纯度的cpDNA。检测结果显示,cpDNA分子长度为22 kb,A260:A280值为1.87±0.01,产率达(2.52±0.01)μg·g-1(DW);cpDNA编码的16S rDNA扩增呈阳性,而由细胞核编码的18S rDNA扩增呈阴性。表明cpDNA纯度高,没有受到核基因组DNA的污染,符合小球藻cpDNA高通量测序的要求。同时,该方法也适合提取具有相似细胞壁成分的其他微藻的基因组DNA和cpDNA。

关键词： 普通小球藻 叶绿体DNA 尿素 月桂酰肌氨酸钠 percoll分离液

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海南岛润方言黎族凉茶植物资源调查

丘柳明; 郑希龙; 王军; 梅文莉; 刘寿柏; 左文建; 戴好富; 《热带生物学报 》 2014

摘要：润方言是海南黎族传统文化中保存较好的支系。通过实地调查,采用关键人物访谈法,结合凭证标本的采集和鉴定,共收集了31种润方言黎族凉茶植物,并对这些植物的功效和价值进行了分析,阐述了凉茶植物的现状及前景,旨在为润方言黎族凉茶的开发利用提供参考。

关键词： 黎族 凉茶 植物资源 调查

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几种杀虫剂对豆大蓟马的毒力测定及复配增效作用

刘奎; 唐良德; 李鹏; 韩志伟; 邱海燕; 付步礼; 范咏梅; 《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：豆大蓟马是海南冬种豇豆的重要害虫,严重影响豇豆产品质量和商品价值。本文采用离心管药膜法,测定了毒死蜱、阿维菌素、高效氯氰菊酯、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、吡虫啉和啶虫脒等6种杀虫剂对豆大蓟马的毒力,并测定了甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与其它5种杀虫剂复配的增效作用及最佳配比。结果表明:供试药剂对豆大蓟马毒力(LC50)大小顺序为:甲维盐(0.000 5 g/L)>阿维菌素(0.056 1 g/L)>毒死蜱(0.125 3 g/L)>高效氯氰菊酯(0.165 4 g/L)>啶虫脒(0.228 3 g/L)>吡虫啉(19.803 5 g/L);以甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与毒死蜱复配的共毒系数为776;甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与毒死蜱配比为1∶9时的共毒系数为1 733。本研究为开发豆大蓟马防治药剂和田间化学防治提供了基本资料。

关键词： 杀虫剂 豆大蓟马 毒力测定 复配 增效

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香蕉胚性悬浮细胞遗传转化体系的优化

张俊芳; 黄俊生; 徐立; 李志英; 《分子植物育种 》 2014 CSCD

摘要：本研究在前人研究的基础上,以海南主栽品种‘巴西’香蕉胚性悬浮细胞为材料,对其遗传转化体系进行优化。结果表明:‘巴西’香蕉胚性悬浮细胞对卡那霉素有一定抗性,适合作为转化细胞筛选的抗生素及浓度为潮霉素10 mg/L、Basta 0.5 mg/L;悬浮细胞每2周继代1次,继代5~6 d后,侵染液农杆菌OD600为0.4,侵染6 h直接进行筛选,再生植株转化率较高,分子检测显示75%为阳性植株;将植物表达载体pCAMBIA3301转入香蕉,转化植株对除草剂的抗性明显提高。

关键词： 香蕉胚性悬浮细胞 遗传转化 体系优化

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利用SSR分子标记快速鉴别中粒种与小粒种咖啡

王晓阳; 董云萍; 黄丽芳; 闫林; 周华; 陈金焕; 孙燕; 林兴军; 《热带作物学报 》 2014 CSCD

摘要：为快速、准确地鉴别中粒种与小粒种咖啡,以不同种源的中粒种和小粒种咖啡为试验材料,对514对SSR引物进行中、小粒种咖啡种间特异性引物筛选,最终筛选到1对特异性引物,该引物在小粒种咖啡样本中扩增出90 bp和110 bp双带产物,而在中粒种咖啡样本中只扩增出90 bp或100 bp的单带产物,根据产物条带的数目即可对中粒种和小粒种咖啡进行鉴别。经随机抽取中、小粒种咖啡样本进行种类鉴别准确性验证,验证结果与实际结果一致。

关键词： 中粒种咖啡 小粒种咖啡 SSR 鉴别

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橡胶树AGPase一个大亚基cDNA全长克隆及表达分析

郑乾坤; 魏芳; 罗世巧; 吴明; 仇键; 杨文凤; 校现周; 《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)是淀粉合成起始的关键酶,利用保守序列设计简并引物,得到一条橡胶树AGPase大亚基的类似序列,再以木质部cDNA为模板通过RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术克隆得到AGPase基因的cDNA全长,命名为HbLSUI(GenBank NO:KJ020930)。生物信息学分析结果表明,AGPase基因所编码的蛋白具有AGPase大亚基保守结构域。RT-PCR表达分析结果表明,AGPase基因在木质部和树皮中的表达量较高。利用荧光定量PCR分析AGPase基因在不割胶、常规割胶和乙烯刺激割胶3种割胶强度下的表达情况,结果表明,割胶和刺激割胶可导致该基因的表达量降低。

关键词： 橡胶树 AGPase 淀粉 定量PCR

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橡胶灵芝化学成分研究

杨爽; 马青云; 黄圣卓; 戴好富; 郭志凯; 郁志芳; 赵友兴; 《中国中药杂志 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：利用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱技术对橡胶灵芝Ganoderma philippii进行化学成分研究,从中分离到16个化合物,通过波谱方法分别鉴定为2,5-二羟基苯乙酮(1),甲龙胆酸(2),(S)-苹果酸二甲酯(3),muurola-4,10(14)-dien-11β-ol(4),dihydroepicubenol(5),5-羟甲基呋喃甲醛(6),麦角甾-7,22E-二烯-3β-醇(7),麦角甾-7,22E-二烯-3-酮(8),麦角甾-7,22E-二烯-2β,3α,9α-三醇(9),6β-甲氧基麦角甾-7,22E-二烯-3β,5α-二醇(10),麦角甾-4,6,8(14),22E-四烯-3-酮(11),麦角甾-4,6,8(14),22E-四烯-3β-醇(12),5α,8α-过氧桥麦角甾-6,22E-二烯-3β-醇(13),7α-甲氧基-5α,6α-epoxy麦角甾-8(14),22E-二烯-3β-醇(14),麦角甾-8,22E-二烯-3β,5α,6β,7α-四醇(15),麦角甾-5,23E-二烯-3β-醇,醋酸盐(16)。化合物1~16均首次从橡胶灵芝中分离得到,其中化合物4,5首次从灵芝属分离得到。

关键词： 橡胶灵芝 灵芝科 化学成分

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毛竹冬笋不同部位营养成分及活性成分分析

黄晓兵; 李积华; 张文华; 彭芍丹; 朱怡婷; 《食品科技 》 2014 北大核心

摘要：为了了解毛竹冬笋的营养价值,促进毛竹冬笋的开发利用,对毛竹冬笋笋头、笋肉和笋壳3个不同部位中蛋白质、总糖、矿物质元素、氨基酸组成以及活性物质多酚和黄酮含量进行了研究,并与其他品种竹笋肉进行比较。结果表明:毛竹冬笋肉中蛋白质、总糖及灰分含量高于笋头和笋壳,与其他品种竹笋相比,冬笋肉中营养成分含量上相对比较丰富,食用价值高;笋肉中Na、Mg、K、Ca、Cu、Zn元素含量均高于笋头和笋壳,笋头中微量元素Mn、Fe的含量较高,笋壳中矿质元素含量最低;氨基酸分析显示,笋壳中氨基酸总量、必需氨基酸和非必需氨基酸含量较高,笋头次之,笋肉最低;笋肉中多酚和黄酮含量分别为10.31、3.49 mg/g,显著高于笋头和笋壳中的含量。

关键词： 毛竹 冬笋 营养成分 氨基酸 活性成分

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全球有60多个国家生产天然橡胶

莫业勇; 《中国热带农业 》 2014

摘要：一、1980年前世界天然橡胶生产国概况1870年末,巴西三叶橡胶树(简称橡胶树)经英国引种到东南亚地区,并迅速发展。根据国际橡胶研究小组(IRSG:International Rubber Study Group)的历史统计数据,1900年,东南亚地区的天然橡胶产量占全球的1%,1910年达到11%,1921年超过90%。1941年,东南亚地区的天然橡胶产量占全球的97%。第二次世界大战

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响应面法优化绿色木霉H06产孢培养条件

梁昌聪; 刘磊; 张建华; 郭立佳; 杨腊英; 王国芬; 黄俊生; 《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：在单因素试验的基础上,采用响应面法(response surface methodology,RSM)对绿色木霉菌H06菌株产孢培养条件进行了优化。首先利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产孢的3个主要因素:装液量、接种量和培养温度。在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域,最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最佳条件。结果显示,绿色木霉H06菌株的最佳发酵条件为:转速200 r/min,装液量74.70 mL/250mL,接种量5.83%,pH 7.5,温度29.50℃,培养时间72 h,菌龄48 h。H06菌株最大理论孢子含量为7.64×109个/mL。经3次平行试验验证,实际平均孢子含量与预测孢子含量相近,比之前的孢子含量提高133%。

关键词： 响应面法 绿色木霉 产孢 最适培养条件

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