科研产出
枸杞苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与表达分析
《中国农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为研究枸杞苯丙氨酸解氨酶基因LcPAL在干旱和盐逆境中的作用,采用RT-PCR和RACE方法克隆了LcPAL基因(Genbank No.KX781247)。该基因cDNA长度为2 544bp,含有2 163bp的完整开放阅读框,编码720个氨基酸。蛋白序列分析表明,其包含典型的PAL酶活性中心序列(GTITASGDLVPLSYIA),与其他植物的PAL蛋白有很高的同源性。系统进化树表明,枸杞LcPAL与茄科植物的PAL蛋白聚为一类,说明两者的亲缘关系较近。利用实时荧光定量PCR方法检测发现,LcPAL基因在枸杞的叶中表达量最高,果实中表达量最少。其在聚乙二醇(PEG)、氯化钠(NaCl)胁迫下诱导表达,但表达模式不同。研究结果推测从枸杞中克隆获得苯丙氨酸解氨酶(LcPAL),是典型的PAL家族成员,在枸杞各组织发育过程中具有重要功能,且在枸杞抗干旱和抗盐逆境过程也起一定作用。
关键词： 枸杞 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 基因克隆 表达分析
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蚕豆SSR-PCR体系建立及优化
《青海大学学报 》 2017
摘要：为了建立适宜蚕豆的SSR-PCR反应体系,用于蚕豆的SSR分子标记研究。以青海12号、透心绿为材料,通过正交设计L16(45)对蚕豆SSR-PCR反应体系中的Taq酶,Mg~(2+),dNTPs,引物和模板DNA 5个因素的4个水平进行优化试验。结果表明:各因素不同水平对PCR反应均有影响,各因素对PCR扩增结果的影响大小分别为:Taq酶>dNTPs>模板DNA>引物>Mg2+。最终筛选出蚕豆最佳SSR-PCR反应体系(20μL):1U Taq酶,0.75 mmol/L d NTPs,100 ng模板DNA,2μmol/L引物和1.5 mmol/L Mg~(2+)。
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水分亏缺对青稞产量及籽粒氮、磷、钾含量的影响
《麦类作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为明确水分亏缺对青稞产量性状和籽粒N、P、K含量的影响,采用温室抗旱鉴定池种植的方法,对10个青稞品种设置水分充足(CK)、轻度水分亏缺、重度水分亏缺处理,分析其不同水分条件下的产量性状和籽粒中N、P、K的累积状况。结果表明,水分轻度亏缺下,导致各品种产量降低的因素不尽相同,昆仑14号和肚里黄的成穗数降低,柴青1号的穗粒数和千粒重降低,其他7个青稞品种的穗粒数、成穗数和千粒重均有所降低。水分重度亏缺下,10个青稞品种的成穗数、穗粒数和千粒重均显著降低,导致其籽粒产量显著降低。10个青稞品种的籽粒减产幅度随水分亏缺程度加剧而增大。昆仑15号、昆仑14号、肚里黄和柴青1号可作为不同生态区重要的高产种质资源;康青8号和昆仑14号可作为高氮素积累的种质;旱地紫和昆仑14号可作为高磷素积累的种质;藏青2000可作为高钾素积累的种质。
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黑果枸杞及其白色果实F3′5′H基因启动子克隆及活性分析
《河北农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过3次染色体步移克隆出黑果枸杞及其白化果实F3′5′H基因的启动子片段并测序。分析发现2个启动子序列的同源性高达90.3%,对启动子序列进行预测,发现两者中均具有TATA-Box、CAAT-Box、TCrich repeats、WUN-motif、Sp1、Box I、G-box、skin-1motif及ARE元件。另外在黑果枸杞启动子中预测到与茉莉酸甲酯响应相关的元件TGACG-motif,而在黑果枸杞白化果实启动子中没有预测到。将2个启动子片段与GUS报告基因融合构建植物表达载体,利用农杆菌介导的瞬时转化法转化烟草叶片,通过组织化学染色来确定启动子的启动活性。结果表明2个启动子均具有启动活性,利用荧光定量对2个启动子所驱动的GUS基因的表达量进行了分析,结果表明黑果枸杞启动子所驱动的GUS基因的表达量是黑果枸杞白化果实的3.09倍。
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基于高通量测序研究青藏高原茶卡盐湖微生物多样性
《微生物学通报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】茶卡盐湖(Chaka Salt Lake,CSL)是青藏高原有名的天然结晶盐湖,具有独特的石盐盐湖矿床,盛产青盐。盐湖卤水环境中存在丰富的嗜盐菌资源和潜在的新种,细菌和古菌的群落结构特征和物种多样性尚不明确。【方法】采用Illumina高通量测序平台对茶卡盐湖水样和底泥混合物中的细菌和古菌群落进行16S r RNA基因(V3-V5区)高通量测序,检测4个样本的群落结构差异和微生物多样性。【结果】获得细菌和古菌总有效序列分别为117 192和110 571条。结果分析表明细菌和古菌的物种注释(Operational taxonomic unit,OTU)数目分别为421和317,获得分类地位明确的细菌种类为14门28纲170属,古菌为5门4纲34属。细菌的优势类群是厚壁菌门(Firmicutes),所占比例为68.37%,其次为变形菌门Proteobacteria(20.49%);优势种属依次为芽孢杆菌属Bacillus(41.94%)、海洋芽孢杆菌属Oceanobacillus(8.03%)、假单胞菌属Pseudomonas(7.67%)、盐厌氧菌属Halanaerobium(7.42%)和乳球菌属Lactococcus(7.38%);古菌的优势类群以广古菌门(Euryarchaeota)盐杆菌纲(Halobacteria)为主,优势菌是Halonotius(17.21%)和盐红菌属Halorubrum(16.23%)。【结论】揭示了茶卡盐湖中细菌和古菌的群落结构及物种多样性,为嗜盐菌的开发及后续微生物资源的挖掘提供了理论依据。
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柴达木盆地黑果枸杞人工栽培条件下有效成分测定与分析
《青海科技 》 2017
摘要：通过对人工栽培和原生条件下黑果枸杞果实有效成分含量的测定与对比分析,得出了黑果枸杞在人工栽培条件下,果实的有效成分含量大部分得到了提高的结果。其中:甜菜碱(10.90%)、总黄酮(15.41%)、多元酚(100%)、α-维生素E(40.15%)、γ-维生素E(45.16%)、δ-维生素E(119.74%)、花青素(16.30%)、原花青素(8.06%)。17种氨基酸总量高达99.72%。其中,8种人体不能合成,又是维持机体氮平衡所必需的药用氨基酸含量的增幅分别为:谷氨酸(88.35%)、天门冬氨酸(179.60%)、精氨酸(114.64%)、甘氨酸(71.37%)、苯丙氨酸(90.68%)、酪氨酸(80.26%)、亮氨酸(58.38%)、赖氨酸(64.93%)。甜菜碱、总黄酮、多元酚、α-维生素E、γ-维生素E、δ-维生素E、花青素、原花青素、17种氨基酸含量的增加,对于黑果枸杞人工栽培意义重大。
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早实薄皮核桃品种引种筛选试验及综合评价
《经济林研究 》 2017 北大核心
摘要：近年来,随着核桃产业的发展和早实薄皮核桃的推广应用,青海省河湟谷地也纷纷引种。由于引种前缺乏相关研究,引进品种杂乱,其表现良莠不齐,优少劣多现象突出。为了筛选出能适于该地区栽培的薄皮核桃品种,对引进的9个早实薄皮核桃品种开展了引种试验和观测分析,采用数据直观分析和主成分分析相结合的方法,对各品种果实的经济学性状进行了分析评价,筛选出了辽宁1号、中林5号为适于青海省栽培的优良品种,这两个品种可在该区域适度发展。
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青海芥菜型油菜多室基因Bjln2连锁标记的SCAR转化
《青海大学学报 》 2017
摘要：为了提高多室油菜分子标记辅助选择育种的效率,以青海芥菜型多室油菜与新芥为亲本构建的BC4分离群体为试验材料,将前人测序的11个与Bjln2连锁的AFLP标记的特异性片段序列信息作为研究基础,根据测序信息设计了12对SCAR引物,将复杂的AFLP标记转化为操作简便的SCAR标记。结果表明:设计的12对SCAR引物中,AFLP组合SA09MG08和SA10MC16被成功转化,多态性良好。由于该标记在BC4分离群体中得到验证,可利用该SCAR标记苗期对多室与二室进行鉴定,有效提高育种效率。
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不同粒色青稞酚类化合物含量与抗氧化活性的差异及评价
《中国粮油学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了比较不同粒色青稞中游离态及结合态酚类化合物的含量及其抗氧化活性的差异。选用52份不同粒色青稞种质资源,采用化学法分析其青稞全籽粒中游离态及结合态总酚、总黄酮含量,通过DPPH、ABTS+·自由基清除能力及FRAP铁离子还原能力评价其体外抗氧化能力差异,利用主成分分析法客观评价其酚类化合物含量及抗氧化活性的品种排名。结果表明:结合酚是有色青稞酚酸的主要存在形式,游离黄酮是青稞中黄酮类物质的主要存在形式,组间含量差异显著,黑色组青稞的总酚类化合物含量较高;不同形态酚类物质对自由基清除能力的强弱具有选择性,游离态酚类化合物含量在一定程度上决定DPPH和ABTS自由基清除能力大小,FRAP铁离子还原能力受青稞中游离态及结合态酚类化合物含量的共同影响;不同粒色组青稞的酚类化合物含量及抗氧化活性存在品种间差异,主成分分析筛选出紫色、蓝色、黑色、黄色组青稞中酚类物质含量及抗氧化活性最高的品种分别为云青2号、循化亮蓝、947和短白青稞。
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