猪瘟病毒E0蛋白的高效表达及其间接ELISA检测方法的建立

吴素丽; 孙惠玲; 钱永华; 《动物医学进展 》 2009 北大核心

摘要：Trizol法提取猪瘟兔化弱毒株(C株)总RNA,根据GenBank中E0基因序列设计特异性引物,扩增克隆E0基因,插入原核表达载体pET-32a(+),转化进BL2l(DE3)内进行表达。将表达的重组pET-E0蛋白通过His亲和层析柱纯化,以纯化后的蛋白为诊断抗原,包被96孔聚乙烯平板,通过探索抗原包被量和血清稀释倍数,建立检测猪瘟E0抗体的ELISA方法。通过对蛋白表达条件和ELISA反应条件的优化,确定E0蛋白能在BL2l(DE3)内高效表达,表达量达30%,蛋白分子质量约为50 ku,且蛋白以可溶性形式存在。纯化后蛋白浓度为2 mg/mL;抗原最适包被量为300 ng;血清最适稀释度为1∶50。经阻断试验、交叉反应试验和与IDEXX公司猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合性(83%)试验证明,建立的E0-ELISA简便、特异、稳定,为研制开发E2标记疫苗的应用和推广提供配套的检测方法。

关键词： 猪瘟病毒 E0 原核表达 间接ELISA

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北京市郊典型农田施肥研究与分析

杜连凤; 吴琼; 赵同科; 刘继培; 安志装; 刘宝存; 张东兴; 《中国土壤与肥料 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：通过问卷调查形式,对京郊粮田、菜田和果园3种农田施肥现状进行研究。结果表明,菜田和果园化肥施用量较高,氮、磷、钾肥均显著高于粮田。菜田和果园氮肥用量分别为1741.0和1172.8 kg/hm2,分别是粮田氮肥用量的4.5和3.0倍;磷肥用量分别为1375.1和996.4 kg/hm2,分别是粮田磷肥用量的15.5倍和11.2倍;钾肥用量分别为791.3和602.4 kg/hm2,分别是粮田钾肥用量的21.1和16.1倍。另外,3种利用方式的农田氮、磷和钾肥施用比例不同,粮田为75.4%、17.3%和7.3%;果园为42.3%、36.0%和21.7%;而菜田为44.6%、35.2%和20.3%。3种种植类型中均存在氮肥投入过量、钾肥不足的问题。

关键词： 菜田 果园 粮田 施肥量 施肥比例

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新城疫疫苗对近年流行毒株的保护作用

林健; 刘月焕; 韩春华; 马明; 刘永宏; 潘洁; 《Animal Husbandry and Feed Science 》 2009

摘要：1材料与方法1.1新城疫疫苗对野毒株NDV-2007-HB的攻毒保护试验将130只鸡随机分为13组,每组10只。分别将不同毒株制成的新城疫弱毒活疫苗A、B、C、D、E(均由市场购入)稀释至1ml/羽份,通过滴鼻、点眼、口服途径免疫SPF鸡(北京实验动物研究中心提供),每种疫苗免疫2组,其他3组不接种疫苗。免疫后第14天,

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高盐低pH值法提取玉米基因组DNA的研究

许理文; 王风格; 赵久然; 易红梅; 《玉米科学 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：优化建立了基于玉米叶片的高盐低pH值法提取玉米基因组DNA,经琼脂糖电泳检测表明,提取的DNA主带清晰、无降解现象、质量好,满足基于SSR标记的5色荧光电泳检测系统。此方法比目前提取植物基因组DNA常用的CTAB法和SDS法具有成本低、步骤简单、不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒有机试剂的优点,是提取玉米基因组DNA的一种较好的方法。

关键词： 玉米 DNA提取 高盐低pH值法

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分株和遮荫对花叶芒生长的影响

武菊英; 滕文军; 袁小环; 杨学军; 《园艺学报 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：盆栽条件下研究了分株和遮荫对观赏植物花叶芒(Miscanthus sinensis‘Variegatus’)生长的影响,为种苗快速扩繁和应用配置提供技术依据。分株试验有4个处理,初始分蘖数分别为2～3、5～6、10～12和20～23个/盆,结果表明初始分蘖数对植株生长有明显影响,分株生长6个月后,植株的茎数、花序数、冠幅和地上生物量随初始分蘖数的增加而显著提高,但对植株高度没有影响。初始分蘖数为20～23个/盆时,繁殖系数最低,仅为2.1,而初始分蘖数为2～3个/盆时繁殖系数最高,为6.7,是前者的3.2倍。通过覆盖不同层数的黑色尼龙网形成了4个遮荫度,分别为0,25%,50%和75%。遮荫度对花叶芒的生长有显著的影响,25%～50%遮荫度下,花叶芒的株高、茎数、花序数、地上和地下生物量以及叶绿素含量都显著高于全光照条件下的,但遮荫度增加到75%时,这些指标又明显降低,由此得出25%～50%的遮荫度适合花叶芒生长,高于50%的遮荫度不利于其生长。

关键词： 观赏草 花叶芒 初始分蘖数 遮荫度 植物生长 叶绿素含量

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转基因作物安全性的解决方法研究进展

王艳辉; 张晓东; 《生物技术通报 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：随着转基因技术的不断发展,转基因作物的种植面积逐年扩大。转基因技术在解决全球不断增长的粮食需求和保障农业的可持续发展等方面发挥了重要作用。然而,人们对转基因作物和转基因食品的安全性一直存在争议。为了解决这个问题,科学家研究出了多项分子技术来消除转基因带来的潜在威胁,尤其是近几年出现的"外源基因清除技术",有望成为解决该问题的有力工具。综述了几种解决转基因作物安全性问题的方法及其最新进展,并对几种方法进行了优缺点分析。

关键词： 转基因作物 安全性 解决方法 标记基因 目的基因

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西瓜专用砧木——京欣砧4号的选育

李海真; 宫国义; 张帆; 贾长才; 姜立纲; 《长江蔬菜 》 2009

摘要：京欣砧4号是用母本04-63和父本04-217配制而成的南瓜(Cucurbita moschata)杂交种,是西瓜专用优良砧木,其发芽率高,出苗齐整、苗壮;与西瓜嫁接亲和性好,共生亲和力强,结合面致密;嫁接苗在低温弱光下生长强健,根系发达,吸肥力强,成活率高;嫁接瓜果实大、产量高,嫁接后对果实的品质影响小。高抗枯萎病,叶部病害轻。

关键词： 西瓜砧木 嫁接 京欣砧4号

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基于DYMEX和DIVA-GIS的昆士兰果实蝇潜在地理分布预测

黄冠胜; 李志红; 万方浩; 王之岭; 林伟; 《植物保护学报 》 2009 北大核心

摘要：利用DYMEX软件的地点比较和DIVA-GIS软件的BIOCLIM两种模型,分析昆士兰果实蝇Bactrocera tryoni(Froggatt)在中国及全球的潜在地理分布。结果表明,两种模型均能预测出我国33.3~18.2°N、95.8~122.1°E范围内的地区为昆士兰果实蝇的潜在地理分布区,其中,海南、云南、广西、广东、福建、贵州和江西南部、四川东部、重庆西部及台湾部分地区为高度适生区;全球昆士兰果实蝇的潜在分布区主要包括澳大利亚、南亚、南美洲、北美洲南部沿海地区、地中海沿岸部分地区以及非洲中南部地区。

关键词： 昆士兰果实蝇 潜在地理分布 DYMEX DIVA-GIS

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杭州地区芳香植物及其在园林绿化中的应用

郑九淼; 孙磊; 唐宇力; 《安徽农业科学 》 2009 北大核心

摘要：介绍了芳香植物在园林应用中的配置方式,列举了杭州地区常见的芳香植物,并探讨了芳香植物在杭州现代园林中主要应用形式。

关键词： 芳香植物 园林绿化 应用

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不同赤眼蜂品系ISSR-PCR条件优化及分子鉴定

裴毅夫; 李正西; 王素琴; 康总江; 《昆虫知识 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：赤眼蜂Trichogramma不同品系在寄生能力等生物学特性上存在差异,而这些差异可能被用于优良品系的筛选。通过优化影响赤眼蜂不同品系ISSR-PCR的主要参数,建立适于鉴别赤眼蜂不同品系的ISSR-PCR反应体系和扩增程序。在20μL反应体系中,各反应物的最适含量为10×PCR Buffer 2.0μL,MgCl22.0μL(25mmol/L),dNTPs1.6μL(2.5mmol/Leach),正反向引物各1μL(25μmol/L),DNA模板1.0μL,Taq酶0.4μL(2.5U/μL),和ddH2O。ISSR-PCR的扩增程序为:95℃预变性5min,94℃变性50s,52℃退火1min,72℃延伸1min20s,35个循环,72℃延伸10min。结果表明,在上述优化条件下,采用ISSR-PCR可实现对7个赤眼蜂优良品系的分子鉴定。该研究对于赤眼蜂优良品系的筛选具有潜在的应用价值。

关键词： 赤眼蜂 ISSR-PCR 品系鉴定和筛选

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