科研产出
高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)是世界上分布最广的侵染甘蔗的病毒之一,引起甘蔗花叶病,对甘蔗产业危害很大。根据SrMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列合成一对引物,以海南(SrMV-HN)染病植株总RNA为材料,采用RT-PCR方法克隆了长约987 bp的目的片段。将CP基因与质粒pET32a(+)连接,构建了含SrMV CP基因的融合蛋白原核表达载体pET32a-SrMVCP。然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测出一条约36kD的特异融合蛋白表达谱带。融合蛋白主要以可溶性蛋白形式稳定表达。通过优化诱导条件,确立了CP基因表达的最佳条件:IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为4 h,诱导温度为30℃。用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清。通过酶联法(ID-ELISA)测定本试验制备的SrMV CP抗血清工作浓度为1∶1 000,Western blotting检测结果表明,抗血清与SrMV-HN诱导表达的CP蛋白发生特异性反应。对田间25个甘蔗样品进行检测,结果表明该抗血清的效价高、灵敏度高、特异性强,可以应用于田间样品的检测。
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海南省4种农业类期刊学术论文影响力的比较研究
《热带农业科学 》 2013
摘要：采用科技期刊学术论文影响力动态评估模型,对海南省4种农业类期刊2008~2012年《中国期刊引证报告》中连续5年收录的7个评价指标,包括来源文献量、总被引频次、影响因子、即年指标、他引率、国际论文比和基金论文比进行综合分析。结果显示:《热带作物学报》和《热带农业科学》中学术论文的影响力逐年稳步提高,《分子植物育种》和《热带林业》均有不同程度的波动;《热带作物学报》与《分子植物育种》中学术论文的影响力相差不大,其Ir值分别为1.71、1.73;《热带农业科学》中学术论文的影响力增长率最高,达1.13。
关键词： 农业类期刊 学术论文影响力 动态评估 模型 海南省
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巴西橡胶树HbSIP1基因启动子的克隆和序列分析
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为研究橡胶焦磷酸酶基因的表达特征及其在天然橡胶生物合成中调控机理,根据巴西橡胶树焦磷酸酶基因HbSIP1序列,利用GenomeWalker方法对HbSIP1基因启动子序列进行了分离,对其序列进行了生物信息学分析,并构建了含有该序列的植物表达载体pSIP1-1381Z。结果表明:分离获得了1198bp的HbSIP1基因启动子序列,该序列具有真核生物典型启动子结构特征,并含有众多应答激素和胁迫信号的调控元件。对HbSIP1的启动子区的克隆和分析,为进一步研究HbSIP1的功能和表达调控机制奠定基础。
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巴西橡胶HbERF3启动子的克隆与分析
《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据巴西橡胶HbERF3基因序列,利用GenomeWalking技术对其启动子进行克隆和分析,得到了长度为1 572 bp的HbERF3基因的5’端上游启动子区,且分析结果表明,该序列具有典型的真核生物核心启动子区和转录起始位点,除了含有多个TATA-box、CAAT-box等基本顺式元件外,该序列还包含多种与激素应答、逆境胁迫相关的元件。对HbERF3启动子区的克隆和序列分析,为进一步研究HbERF3的表达调控和功能奠定了基础。
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提高后勤用工规范性,提升后勤服务水平
《科技与企业 》 2013
摘要：农业科研事业涉及范围较广,工作类别繁多。从农、林、牧、副、渔各大业到农田水利建设、食品加工技术、生物科学以及相关的科学研究工作,都需要后勤部门予以维护。从运行管理机制上来说,严格的制度管理,是保障各项工作的顺利运行的必要手段。农业科研事业单位后勤作为其中的运行中枢,承担着重要责任。从目前农业发展现状来看,后勤服务工作中还面临着许多问题,使得各项机制的运行形同虚设。为了实现农业科研事业单位机制的有效运行,必须对其后勤服务进行有效管理,以提高后勤用工规范,提升后勤服务水平,实现农业科研事业单位经济效益和社会效益的统一。
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工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-lac2)的构建及诱导表达漆酶的研究
《工业微生物 》 2013 CSCD
摘要：用PCR法扩增枯草芽孢杆菌的漆酶基因lac2。构建表达质粒pPIC9K-lac2。通过电转法将lac2基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性和高表达漆酶的转化子作为工程菌GS115(pPIC9K-lac2)。在发酵罐中发酵GS115(pPIC9K-lac2)表达重组蛋白。在50 L发酵罐中加入20 L无机盐发酵培养基。在发酵的第一阶段连续24 h补加50%甘油-0.8%PTM4增殖P.pastoris,然后用甲醇-0.8%PTM4诱导49 h。在发酵过程中,通过调节搅拌的频率和通气量,将溶氧维持于20%～30%,用氨水维持pH 5.0.放罐时生物量为A_(600)=266.5,表达漆酶1097.5U/L发酵液。
关键词： 漆酶 枯草芽孢杆菌 基因表达 P.pastoris 发酵 高密度发酵
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细菌介导RNAi研究甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因功能
《应用昆虫学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：甘蔗Saccharum officinarum L.是热带和亚热带地区种植的主要作物之一,也是许多国家和地区重要的糖料来源。为了解决甘蔗在农业生产中常常被甘蔗螟虫为害,重点控制甘蔗二点螟Chilo infuscatellus Snellen是一条显著提高甘蔗产量和品质的有效途径。近年来,RNA干扰技术已发展成为控制虫害、提高作物品质的新方法,通过dsRNA诱导的RNA干扰可以用来研究昆虫功能基因。本文以甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因为靶标,建立细菌介导的RNAi方法表达CiHR3基因dsRNA,通过提取靶标基因dsRNA,喂饲甘蔗二点螟3龄和5龄幼虫,结果显示:3龄甘蔗二点螟幼虫在一周内发生形态显著变化、体重明显下降;5龄甘蔗二点螟幼虫在一周内形态也出现显著变化,更明显的是出现畸形蛹,非正常化蛹。本研究结果验证了昆虫蜕皮调节转录因子CiHR3可作为甘蔗二点螟生物防治的靶标基因,为后续植物介导的RNAi表达dsRNA防治甘蔗螟虫打下很好的基础。
关键词： 细菌介导RNAi 甘蔗二点螟 CiHR3 生物活性测定
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高性能吸水膨胀橡胶的制备和性能
《橡胶工业 》 2013 北大核心
摘要：介绍一种高性能吸水膨胀橡胶的制备新方法:在丙烯酸钠接枝天然胶乳制备吸水膨胀橡胶过程中,加入纳米晶纤维素(NCC)和纳米硅溶胶(NSS)以同时提高吸水膨胀橡胶的吸水性能和物理性能。结果表明,当丙烯酸钠单体用量为60份、NCC用量为0.75份、NSS用量为3份时,吸水膨胀橡胶的综合性能最好,吸水率达10.013,吸水平衡时间为11h,二次吸水比率为97.3%,拉伸强度为12.25MPa。
关键词： 吸水膨胀橡胶 丙烯酸钠接枝天然胶乳 吸水性能 物理性能
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辛硫磷与阿维菌素对桉树枝瘿姬小蜂的混配增效作用
《农药 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究不同作用机制的杀虫剂混配对桉树枝瘿姬小蜂增效作用。[方法]采用玻管药膜法测定辛硫磷与阿维菌素混用对桉树枝瘿姬小蜂成虫的生物活性,研究2种药剂的联合增效作用。[结果]辛硫磷与阿维菌素对桉树枝瘿姬小蜂具有一定的生物活性,并以有效成分7∶1混配,表现增效作用,共毒系数为220.38,对幼虫、蛹和成虫的校正死亡率分别为76.47%、66.67%和64.00%,优于单剂单独使用。[结论]辛硫磷与阿维菌素混用对桉树枝瘿姬小蜂有增效作用,其中以有效成分7∶1混配增效作用最好。
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巴西橡胶树蔗糖磷酸合成酶基因的克隆和表达分析
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要：分析橡胶树EST数据库,得到一个注释为SPS(蔗糖磷酸合成酶)的EST序列重叠群(contig)。通过PCR扩增和测序技术获得该基因的全长cDNA和基因组序列,命名为HbSPS1。序列分析显示,HbSPS1基因长度为5 298 bp,包含13个外显子和12个内含子。对应的cDNA编码序列(CDS)为3 156 bp,推测编码1 050个氨基酸,分子量大小为118.1 ku,等电点为6.05。采用荧光定量PCR技术分析该基因的表达模式,结果表明,HbSPS1基因主要在胶乳中表达,在乙烯利和机械伤害处理的胶乳中呈下调表达,在割胶影响下略有上调表达趋势,同时该基因在叶片发育过程中呈上调表达。说明HbSPS1基因可能参与胶乳蔗糖代谢和叶片发育调控。
关键词： 巴西橡胶树 蔗糖磷酸合成酶 表达分析 乙烯利 机械伤害
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