科研产出
PRSV-NIb基因同源dsRNA的原核表达及其在番木瓜叶片原生质体瞬时表达体系中诱导RNA沉默的研究
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要：为探索利用PRSV-NIb基因同源dsRNA的原核表达产物在体外防治番木瓜环斑病毒的可行性,利用较保守的PRSV-NIb基因3′端的312、501和809 bp区段分别构建了含有PDK内含子的3个发夹RNA编码结构,并选用pSP73和M-Jm109LacY分别作为宿主载体和宿主菌构建了高效的dsRNA原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-N312、M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-N501、M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-N809,经IPTG诱导成功表达了dsRNA,并证明dsRNA不被DNase I和RNase A降解,稳定性较好。还利用PRSV-NIb基因构建了GFP瞬时植物融合表达载体pNIb-GFP,对经3种dsRNA和GFP瞬时融合表达载体共转化的番木瓜叶片原生质体的共聚焦显微镜观察及通过半定量RT-PCR对其中mRNA表达量的分析,结果表明融合基因NIb-GFP的表达均发生了不同程度的下调,说明dsRNA在原生质体中引发了针对同源基因的沉默。
关键词： 番木瓜环斑病毒 核内含体蛋白b dsRNA 原核表达 RNA沉默
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感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价
《植物研究 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&PlateTM"Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。
关键词： 香蕉束顶病毒 香蕉叶片 酵母双杂交cDNA文库
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不同培养基成分对铁皮石斛组织培养的影响
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体,讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。结果表明:最适合铁皮石斛原球茎诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.5mg/L,原球茎诱导率为95%;最适合原球茎增殖的培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA1mg/L;最适合原球茎分化的培养基为MS+6-BA5mg/L+NAA1mg/L,其分化率达80%;最适合铁皮石斛根诱导的培养基为MS+IBA1.5mg/L+香蕉泥100g/L,其生根率为100%。
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木薯褐斑病菌的室内药剂筛选
《热带农业科学 》 2013
摘要：采用孢子萌发法对分离自海南的木薯褐斑病菌进行了10种杀菌剂的室内筛选.结果表明,国光多菌灵(50%多菌灵WP)和咪鲜胺(25%咪鲜胺EC)的EC50值最小,抑菌效果最好;腐霉利(50%WP)的EC50值最大,抑菌效果最差.建议生产上使用多菌灵和咪鲜胺等来防治木薯褐斑病.
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螺旋粉虱感染蜡蚧轮枝菌对其保护酶和解毒酶活性的影响
《植物保护 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：测定了螺旋粉虱3龄若虫在感染蜡蚧轮枝菌后几种保护酶和解毒酶的活性变化情况。结果表明,螺旋粉虱在感染蜡蚧轮枝菌后不同时间其体内保护酶和解毒酶的活性会产生一定程度的变化。螺旋粉虱的SOD、GST和EST比活力在感染36h后达到最大值,显著高于同期对照组的比活力,分别为对照组的1.21、1.27倍和1.47倍;感染后36h和48h,CAT的比活力显著高于对照组的比活力;而感染后不同时间的POD及MFO比活力差异不显著,与对照组的比活力也无显著性差异。初步判断,螺旋粉虱感染蜡蚧轮枝菌后,其体内的防御机制与SOD、CAT、GST及EST活性有一定的相关性,与POD和MFO活性关联不大。
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西瓜砧木种传尖孢镰刀菌粗毒素研究
《中国植保导刊 》 2013 北大核心
摘要：采用乙酸乙酯和乙醚萃取法提取2株西瓜砧木种传镰刀菌粗毒素中的镰刀菌酸,并用高效液相色谱(HPLC)进行了定量分析;测定了镰刀菌酸粗毒素对西瓜砧木幼苗的致萎蔫作用。结果表明,2株种传尖孢镰刀菌粗毒素中都可检测到镰刀菌酸,质量浓度分别为69.9μg/mL和842.3μg/mL。用2株种传尖孢镰刀菌粗毒素处理西瓜砧木幼苗根部能引起幼苗枯萎,且西瓜砧木幼苗的萎蔫程度随着粗毒素中镰刀菌酸浓度的升高和处理时间的延长而加重。关于西瓜砧木种传尖孢镰刀菌粗毒素中镰刀菌酸含量的检测及其引起幼苗萎蔫为国内首次报道。
关键词： 西瓜砧木 尖孢镰刀菌 粗毒素 镰刀菌酸 高效液相色谱
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高效液相色谱-二极管阵列检测同时测定苦荞中芦丁和槲皮素的含量
《食品科技 》 2013 北大核心
摘要：用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)建立了苦荞中芦丁和槲皮素同时测定的方法;采用Intersil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.5%磷酸溶液(用磷酸二氢钾调节pH至4.5)(40:60),流速为1.0 mL/min,检测波长为255 nm。结果:芦丁和槲皮素峰均能良好分离,进样量的线性范围分别为1.98~39.60μg/mL和2.08~41.60μg/mL,平均加样回收率分别为99.2%和98.3%,RSD分别为0.3%和0.48%;试验结果表明所用方法简便、准确、重复性好,可用于苦荞中芦丁和槲皮素的含量测定。
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菠萝粉蚧种类调查及发生规律研究
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要：菠萝粉蚧是为害菠萝的粉蚧的统称,是菠萝凋萎病的主要传播媒介,本文对我国菠萝粉蚧的种类和发生规律进行了研究。结果表明:在我国,为害菠萝的粉蚧主要是菠萝洁粉蚧,仅在海南乐东菠萝园发现有新菠萝灰粉蚧危害;菠萝洁粉蚧目前仅限在菠萝上为害;新菠萝灰粉蚧主要为害剑麻,也为害菠萝和粉蕉;我国暂未发现2种粉蚧混合发生的现象。秋季是雷州半岛地区菠萝洁粉蚧自然种群快速增长期,12月下旬菠萝洁粉蚧自然种群数量进入高峰期;气温和降雨量是影响菠萝洁粉蚧自然种群增长的重要因子,高温、低温均不利于菠萝洁粉蚧生长和繁殖,降雨量对菠萝洁粉蚧的自然种群数量具有明显的抑制作用。
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