科研产出
烟草疫霉PnRXLR5863的克隆及信号肽鉴定
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：烟草疫霉引起的剑麻斑马纹病是剑麻生产的主要病害之一。RXLR效应蛋白是疫霉菌中数量最多的一类效应蛋白。为了分离鉴定烟草疫霉中对剑麻产生致病作用的RXLR效应蛋白，本研究基于生物信息分析结合PCR技术克隆候选基因，并利用酵母信号肽捕获系统对信号肽进行功能研究。本研究从烟草疫霉中克隆了一个编码RXLR效应蛋白的基因，命名为PnRXLR5863；该基因长度为402个碱基，编码的蛋白含有134个氨基酸；分子量为15.46 kD，等电点为5.27，是一个疏水性蛋白；SignalP 4.0预测该蛋白含有一个长度为23个氨基酸的信号肽；进化分析结果显示，PnRXLR5863与来自烟草疫霉的蛋白亲缘关系最近；实验结果表明，Pn RXLR5863的信号肽，能够使YTK12酵母菌株在CMD-W和YPRAA培养基上生长，并且能将TTC溶液转变为砖红色，表明PnRXLR5863的信号肽具有分泌活性。本研究的结果为进一步研究烟草疫霉侵染剑麻过程中Pn RXLR5863的致病功能提供依据。
关键词： 剑麻（Agave sisalana） 烟草疫霉 RXLR效应蛋白 信号肽
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不同品种菠萝果皮穿刺力学特性研究
《山西农业大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心
摘要：[目的]为探究不同品种、不同果眼位置的菠萝果皮抗穿刺损伤性能,以'巴厘'、'金菠萝(MD2)'、'甜蜜蜜(台农16号)'、'金钻(台农17号)'4种菠萝为研究对象进行穿刺特性试验.[方法]选取样品菠萝赤道线处A(果眼中心)、B(2个果眼之间)、C(果眼边)、D(3个果眼交界点)、E(4个果眼交界边)为穿刺点位,基于WSW-50E微机控制电子万能试验机取得力-时间穿刺曲线,分析得出果皮硬度;分析穿刺探头穿透果皮的加载深度从而计算平均果皮破裂深度;绘制果皮应力σ(Mpa)-应变ε(%)曲线,拟合曲线计算果皮韧性以及不同穿刺点位的弹性模量.通过相关性分析明确品种与穿刺点位对菠萝穿刺力学性能的影响.[结果]不同品种菠萝果皮硬度F大小排序均为A>C>B>D>E,品种不同和穿刺部位不同对果皮硬度的影响均显著.果皮韧性变化规律与果皮破裂深度在穿刺不同点位时规律一致,但品种不同导致排序顺序不同,其中'巴厘'排序均为A>C>D>B>E;'金菠萝'排序均为A>C>D>E>B;'金钻'排序均为A>C>D>B>E;'甜蜜蜜'排序均为A>E>C>D>B.'巴厘'果皮弹性模量区间为0.010 7~0.013 8 Mpa;'金菠萝'果皮弹性模量区间为0.014 0~0.015 6 Mpa;'金钻'果皮弹性模量区间为0.010 3~0.013 4 Mpa;'甜蜜蜜'果皮弹性模量区间为0.010 2~0.014 8 Mpa,4种菠萝不同穿刺点位弹性模量大小与其果皮破裂深度/果皮韧性排序相反.相关性分析结果表明,'金菠萝'对果皮破裂深度影响呈极显著(P<0.01),其它品种不显著;E点对果皮破裂深度呈显著性影响(P<0.05),其它穿刺点位不显著;'巴厘'对果皮韧性影响呈极显著(P<0.01),'甜蜜蜜'对果皮韧性呈显著性影响(P<0.05),其它品种不显著;E点对果皮韧性影响均呈极显著(P<0.01),C点对果皮韧性呈显著性影响(P<0.05),其它穿刺点位不显著.[结论]本研究揭示了菠萝果皮不同穿刺点位生物力学特性具有各向异性,并计算得出不同品种菠萝果皮弹性模量区间.明晰菠萝果皮硬度、破裂深度、果皮弹性模量、果皮韧性受品种及穿刺点位影响的变化规律,为菠萝采收、加工设备优化改进提供一定理论基础.
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木薯MeMYC2.2基因耐低温功能研究
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：MYC2(MYeloCytomatosis)转录因子是植物应对逆境胁迫过程中茉莉酸信号传导相关的核心转录因子.本研究旨在初步分析木薯MeMYC2.2基因在低温胁迫响应中的功能.利用生物信息学分析木薯MeMYC2.1和MeMYC2.2基因的结构及其编码蛋白的理化性质;通过定量PCR分析了上述2个基因在木薯组培苗叶片中对低温胁迫的响应;通过转基因拟南芥研究MeMYC2.2的抗冻功能.木薯组培苗叶片中2个MeMYC2基因的表达均在低温胁迫早期被诱导,其中,与MeMYC2.1相比,MeMYC2.2差异表达更显著.MeMYC2.2蛋白主要定位于细胞核中,且在酵母中具有明显转录自激活功能,表明该蛋白具有转录因子特性.与野生型相比,过表达MeMYC2.2的转基因拟南芥抗冻能力显著提高.在低温处理下,CBF3基因在转基因拟南芥中的表达量要明显高于其在野生型的表达量,但另外3个CBF基因在转基因拟南芥中的表达量明显下降.木薯MeMYC2.2的表达受低温和茉莉酸调控,可以提高植物的抗冻性,且可能影响CBF基因对低温的响应.本研究为进一步利用MeMYC2基因改良木薯的低温耐受性奠定了理论基础.
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温度、光照强度和盐度对冬青叶马尾藻生长和光合生理的影响
《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：冬青叶马尾藻（Sargassum ilicifolium）是海南岛近岸海藻场的重要建群种。利用叶绿素荧光技术，结合藻体光合色素含量和生长率变化，研究了冬青叶马尾藻的生理生态学适应性，为海藻场的保护和恢复提供技术支撑。在不同温度（10、14、18、22、26和30℃）、光照强度(10、20、40、80、120、140和200μmol·m-2·s-1)和盐度（16‰、20‰、24‰、28‰、32‰、36‰和40‰）条件下，测定冬青叶马尾藻的特定生长率、叶绿素含量和最大光量子产量（Fv/Fm）等参数。结果显示，冬青叶马尾藻生长的适宜温度为18～26℃，适宜光照强度为20～120μmol·m-2·s-1，适宜盐度为16‰～36‰。研究发现，冬青叶马尾藻是喜温的大型海藻，其对低温胁迫更为敏感，过低或过高的光照强度会导致藻体损伤。因此，在对以冬青叶马尾藻为主的海藻场进行保育和恢复的过程中，应充分考虑温度、光照强度对其生长和空间分布的影响。
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乳酸菌和糖蜜对构树叶青贮品质和细菌多样性的影响
《草地学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为改善构树(Broussonetia papyrifera)叶青贮发酵品质,探究乳酸菌和糖蜜对构树叶青贮发酵指标和细菌多样性的影响,本实验以构树叶为原料,设置对照、添加乳酸菌(L)、糖蜜(M)和乳酸菌+糖蜜混合(ML)4个处理,贮藏30天后,测定其营养成分、发酵品质并及细菌群落结构.结果显示,除了添加乳酸菌组,其他添加剂处理pH值均显著降低(P<0.05),乳酸含量提高(P<0.05),乙酸(P<0.05)和丙酸含量下降.微生物分析表明与CK组相比,M和ML组均提高了细菌群落多样性,另外,添加剂处理改变了细菌群落结构,与CK相比,糖蜜处理组(M)乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度显著提升,魏斯氏菌属(Weissella)和肠杆菌属(Enterobacter)相对丰度降低.综上,构树叶青贮添加糖蜜可提高青贮饲料的发酵品质,并改变青贮细菌多样性.
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滴灌施肥与有机肥施用对金菠萝养分吸收及产量品质的影响
《中国南方果树 》 2023 北大核心
摘要：以金菠萝（MD-2）为试材，设置不施肥、常规施肥、常规施肥+有机肥、滴灌施肥、滴灌施肥+有机肥等5个不同施肥处理，比较不同处理对其生长、养分吸收、产量和果实品质的影响。结果表明，与常规施肥处理相比，滴灌施肥处理显著提高金菠萝总叶片数、茎高、茎粗、D叶长、D叶宽和果柄粗度；常规施肥处理下，增施有机肥可显著增加茎高和茎粗。滴灌施肥处理的根、茎、叶、果柄和果实干质量均显著高于常规施肥处理，分别增加了81.72%、303.23%、150.94%、99.61%和86.79%。滴灌施肥、滴灌施肥+有机肥处理的植株氮、磷、钾积累量，果实横径、单果质量和产量均显著高于其他处理。常规施肥处理的果实的维生素C和可滴定酸含量最高，与其他处理差异显著，但该处理糖酸比最低，增施有机肥显著降低了果实可滴定酸含量，提高了糖酸比。
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杧果脱镁叶绿素酶基因MiPPH的克隆及植物表达载体构建
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：叶绿素降解是果实色泽形成过程中一个主要的影响因素。脱镁叶绿素酶（pheophytinase, PPH）是叶绿素降解代谢的关键酶。本研究提取杧果果皮总RNA，采用RACE方法,克隆得到一个脱镁叶绿素酶基因，并对其进行了初步的生物信息学分析。序列分析表明MiPPH基因cDNA序列全长1 267 bp，开放阅读框为1 113 bp，可编码370个氨基酸，分子量为41.73 kD，等电点为5.22。使用NCBI上的Conserved domains分析MiPPH蛋白结构域,结果显示MiPPH含有PLN02578、Abhydrolase＿1共2个结构域，其中PLN02578为保守域,其他物种PPH也都含有这个水解酶（Hydrolase）保守域，说明PPH蛋白有高度的保守性。通过BLAST上其他植物的氨基酸序列进行相似性比对，利用DNAMAN生成的系统进化树发现杧果MiPPH蛋白序列和与同为漆树科的开心果的PPH蛋白序列相似度较高，亲缘关系较近。利用定量PCR技术对不同品种中的MiPPH基因表达量进行分析，发现绿色‘桂七’品种表达量最高，而黄色‘金煌’品种表达量最低，黄色‘金煌’品种和红色‘贵妃’品种表达量相差不大。本试验成功构建pCAMBIA2300-GFP-MiPPH植物表达载体，通过农杆菌介导的烟草瞬时表达，亚细胞定位MiPPH主要定位于细胞核。本试验为后续进行PPH基因的功能验证提供试验基础。
关键词： 杧果（Mangifera indica L.） 脱镁叶绿素酶（PPH） 基因克隆 植物表达载体
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酸解法青稞糊精理化性质及表征结构研究
《粮食与油脂 》 2023 北大核心
摘要：采用酸解法制备青稞糊精，并对青稞淀粉和青稞糊精的理化性质、形貌结构、短长程有序结构、热特性和葡萄糖当量进行探究。结果表明：青稞淀粉的休止角、膨胀势、溶解率、析水率均大于青稞糊精，而青稞糊精的堆积密度大于青稞淀粉。扫描电子显微镜图像显示，青稞糊精展现出粗糙的表面、杂乱的微结构形态和更小的颗粒尺寸；红外光谱中发现青稞糊精在(1 537±235)cm~(-1)处产生了1个新峰，且青稞糊精的结晶度低于青稞淀粉；通过葡萄糖当量(DE)值可以发现，青稞糊精DE值明显高于青稞淀粉。
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适合全周期间作的橡胶树品种热垦628花药再生体系研究
《热带作物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：在橡胶树体胚发生再生体系研究中,如何快速获得胚性愈伤组织是能否成功建立再生体系的关键.本研究基于课题组前期的研究基础,以橡胶树花药为外植体,通过正交试验设计方案研究了毒莠定、KT、6-BA、IAA四种激素的不同浓度组合对橡胶树花药胚性愈伤组织诱导的影响,结果表明:橡胶树花药愈伤组织诱导的最优组合培养基为MS基础培养基,硫胺素 0.4 mg/L、天冬酰胺 300 mg/L、水解酪蛋白 100 mg/L、脯氨酸 100 mg/L、精氨酸 100 mg/L、谷氨酰胺100 mg/L、L-半胱氨酸-盐酸盐50 mg/L、蔗糖70 g/L、椰子水50 mL/L、植物凝胶2.2 g/L,并添加毒莠定浓度20 mg/L、KT浓度2 mg/L、6-BA浓度1 mg/L、IAA浓度0 mg/L,愈伤组织诱导率达73.3%~100%.所有处理在诱导愈伤组织25~28 d左右,愈伤组织达到快速增殖时期,对胚性愈伤组织的诱导起主要作用的是毒莠定浓度,其浓度在 20~30 mg/L之间时,对胚性愈伤组织的诱导有促进作用.低浓度的毒莠定虽然也能诱导愈伤组织产生,但是这些愈伤组织几乎为无胚胎发生能力的非胚性愈伤组织.同时用获得的 11 个体胚进行植株再生,其中出苗 2 株,7 个只长根不抽芽,2 个既不抽芽也不长根,植株再生率达 18%.因此,在此研究的基础上,对愈伤组织诱导培养基配方进行进一步优化,使其能够更快地从花药中诱导出胚性愈伤组织,缩短胚性愈伤组织的诱导时间,降低变异几率,可为RITA生物反应器提供更好条件的愈伤组织起始原料.
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不同水分、糖蜜添加对姬菇菌糠发酵品质及消化率的影响
《中国饲料 》 2023 北大核心
摘要：本试验旨在研究不同水分和糖蜜添加对姬菇菌糠发酵品质和干物质消化率的影响.菌糠采用单独发酵,调节水分含量分别65%(T1)、70%(T2)和75%(T3),同时做无添加处理(Control)和2%糖蜜添加处理(M).真空密闭发酵60 d.发酵后分析营养成分、发酵品质,并做体外消化试验,分析干物质消化率和瘤胃发酵参数.试验结果表明:发酵菌糠的粗蛋白质、粗脂肪和中性洗涤纤维含量分别为5%、0.96%和64%.随水分升高,pH有降低趋势(P<0.05),乳酸含量显著升高(P<0.05).糖蜜可以显著提升发酵菌糠中的乳酸含量,约提升20%(P<0.05),并显著降低挥发性氨态氮含量(P<0.001).经过体外培养后,高水分发酵菌糠的产气量显著偏高(P<0.05),但干物质消化率没有受到水分的影响(P>0.05).糖蜜添加处理的发酵菌糠显著提升了产气和约9%的干物质消化率(P<0.05),没有影响培养液的氨态氮浓度(P>0.05).综上,姬菇菌糠具有作为反刍动物粗饲料资源利用价值.在发酵过程中,适当添加糖蜜,并且发酵环境的水分控制在75%为最佳.
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