科研产出
宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究
《江苏农业科学 》 2007 北大核心
摘要:分别以宿晓红葡萄冬季休眠枝水培新梢和夏季新梢的单芽茎段为外植体,比较了两种外植体离体培养时的污染率、芽萌发率和生根率差异,并对萌发和生根培养基进行了筛选。结果表明,适宜的外植体是冬季休眠枝水培新梢单芽茎段,其污染率低于夏季新梢单芽茎段外植体,芽萌发率高于夏季新梢单芽茎段外植体,生根率两者无差异;筛选出适宜芽萌发培养基1/2MS+0.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L IAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,生根培养基1/2MS+1 mg/L IBA+0.05 mg/L IAA+20 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。
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番茄SRAP-PCR体系优化与品种分子鉴定
《南京农业大学学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:对番茄基因组DNA的SRAP-PCR体系中Mg2+、dNTPs和引物浓度进行了优化,结果表明反应体系中适宜浓度为Mg2+1.5~3.0 mmol.L-1,dNTPs 0.05~0.20 mmol.L-1,引物0.25μmol.L-1;模板DNA为10~20 ng(10μL反应体系)。运用优化的体系,筛选获得3个合作906与其父母本多态性标记引物组合。利用15个引物组合对11个番茄主要品种以及1个近缘野生种进行种质鉴定的SRAP标记分析,10个多态性的引物组合共检测到55个多态性位点,平均每个引物可鉴别3.7个品种,双引物组合m e8/em8-1与m e6-1/em14-1可以区分所有供试材料。应用NTSYS-pc软件进行聚类分析(UPGMA),园艺性状相似的品种在较近的遗传距离聚类,表明SRAP可有效用于番茄品种资源鉴定与遗传多样性分析。
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鹅催乳素受体基因cDNA5′端序列克隆
《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:为寻找鹅就巢性相关基因,从洪泽湖性成熟公鹅睾丸组织分离并合成鹅cDNA第一链;利用RACE克隆了鹅催乳素受体基因(gPRLR)5′端序列。所克隆的499 bp 5′端序列可划分为348 bp的5′-UTR、151 bp的以ATG作为起始密码子的阅读开放框。与鸡催乳素受体基因(cPRLR)cDNA序列作比对,此499 bp序列可划分为238 bp的第1外显子、69 bp的第2外显子、114 bp的第3外显子及81 bp的部分第4外显子,起始密码子位于第3外显子45 bp处。阅读开放框核苷酸序列与cPRLR cDNA同源部位的阅读开放框同源性达到88%,推导的氨基酸序列同源性达到84%。
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绿原酸对异育银鲫血液非特异性免疫因子的影响
《江苏农业科学 》 2007 北大核心
摘要:用含不同剂量绿原酸(0~0.04%)的饲料饲喂异育银鲫,分别对异育银鲫在摄食0、10、20、30 d时血液中白细胞数量、血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、碱性磷酸酶活性进行了测定。结果表明,饲料中添加适量的绿原酸对异育银鲫血液中各非特异性免疫因子具有不同程度的正效应,但在效应时间上呈现出非同步的特点,其中血液白细胞以在饲料中添加200 mg/kg绿原酸饲喂30 d时最高,为1.894×107/m l,比对照组提高了43.70%(P<0.05);血清溶菌酶活性和超氧化物歧化酶活性以在饲料中添加200 mg/kg绿原酸饲喂10 d时最高,为5 734.4 U/m l、239.72 U/m l,分别比对照组提高了159.7%、109.9%(P<0.05);而碱性磷酸酶活性则以在饲料中添加25 mg/kg绿原酸饲喂30 d时最高,为9.14 U/100m l,比对照组高145.7%(P<0.05),但在高剂量(400mg/kg)长时间饲喂时,将会抑制异育银鲫血液白细胞的产生及血清碱性磷酸酶活性。
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凝胶组成对小麦SSCP技术的影响
《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:SSCP技术易受凝胶浓度、丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例和添加物等诸多因素的影响。本研究探讨了凝胶中丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例、凝胶浓度和添加物等。结果显示:凝胶中丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29∶1、凝胶浓度为12%、凝胶中不添加蔗糖和甘油为最佳的凝胶组成,单链DNA条带清晰,杂带少,容易观察。
关键词: 小麦 聚丙烯酰胺凝胶 DNA单链构象多态性技术
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农杆菌介导葡萄糖氧化酶基因转化油菜
《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:以甘蓝型油菜带柄子叶为转化受体材料,采用农杆菌介导法进行葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GO)基因的转化,经卡那霉素抗性筛选获得大量的不定芽。PCR检测结果显示其中22株呈阳性。淀粉-KI染色结果表明在转基因植株中检测到H2O2。在转基因植株×非转基因植株(F1代)中,卡那霉素抗性筛选显示86%的株系呈现典型的孟德尔单基因显性遗传。F1代盛花期茎秆菌核病活体接种结果证实,转基因植株后代菌核病抗性明显提高。证实GO基因已转入油菜植株中并得到有效表达。
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杀虫晶体蛋白基因CrylAc在生防菌B-916中的表达
《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:枯草芽孢杆菌生防菌B-916对水稻纹枯病和稻曲病具有良好的防治效果,为拓宽其防治范围,兼治病虫害,本研究采用B-916内源芽孢形成期特异表达启动子成功实现了杀虫晶体蛋白基因CrylAc在野生型生防菌B-916的高效表达,成功构建了兼治水稻病、虫害的工程菌E-916.经SDS―PAGE电泳分析,异源CrylAc基因在对数生长后期其表达产物杀虫晶体蛋白占到胞内总蛋白的28%.杀虫和抑菌试验结果表明构建的工程菌对水稻二化螟具有杀虫活性,且保持了其原有对水稻纹枯病的拮抗性能.构建的工程菌具有良好的分离稳定性,连续培养25h,稳定性高于95%;连续培养50h稳定性高于70%;连续稀释培养50h,质粒丢失频率为每代小于10^-3个.
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