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马铃薯类病毒cDNA双体探针的研制及其在检测上的应用

园艺学报 2009 北大核心 CSCD

摘要:在马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)基因组中BamHⅠ位点处(87~92nt),设计两对含有BamHⅠ重叠区(overlop)的引物。将PCR扩增获得的全长PSTVd分别插入到pGM-T载体中。通过BamHⅠ位点,将两个PSTVd单体连接,构建了PSTVd双体载体。以此载体为模板,通过PCR标记技术,制备了高灵敏高专化的PSTVd双体cDNA地高辛标记探针。以CDP-Star为反应底物进行化学发光反应结果判读,建立了PSTVd的高效杂交检测体系。该体系可以对马铃薯薯块、叶片、芽等不同组织样品进行检测,检测灵敏度达到0.05pg。通过对67份田间采集的样品和实验室保存的资源材料进行检测,比较了cDNA双体探针核酸斑点杂交技术(nucleic acid spot hybridization,NASH)、反转录聚合酶链式反应(reverse-transcriptional polymerase chain reaction,RT-PCR)和往返-聚丙烯酰胺凝胶电泳(return-polyacrylamide gel electrophoresis,R-PAGE)检测技术的阳性样品检出率,结果显示,NASH技术阳性样品检出率为67.7%,与RT-PCR相一致,高于R-PAGE技术的阳性检测率(53.7%)。

关键词: 马铃薯 马铃薯纺锤块茎类病毒 探针 双体 核酸斑点杂交

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加大服务三农力度,促进科技成果推广

黑龙江农业科学 2009 CSCD

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马铃薯病毒分子检测技术研究进展

中国马铃薯 2009

摘要:对种子、苗木和无性繁殖材料以及在发病早期对植株进行快速准确地检测尤为重要。目前国内外马铃薯病毒分子检测技术的研究,主要涉及以蛋白质和核酸为基础的检测方法。以蛋白质为基础的检测方法主要根据免疫学原理,包括酶联免疫吸附反应测定法、直接组织斑免疫测定法和胶体金免疫层析法。以核酸为基础衍生的检测方法较多,主要有RT-PCR检测技术、免疫捕捉-RT-PCR检测技术、核酸杂交检测技术、指示分子NAS-BA技术、实时荧光定量PCR技术和基因芯片技术。

关键词: 马铃薯 病毒 分子检测

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李芽变新品种-龙园桃李

山西果树 2009

摘要:龙园桃李是在龙园蜜李的母株上发现的枝条芽变,2008年5月通过了黑龙江省农作物品种审定委员会审定.果实桃形,平均单果重48.5g,最大62g;缝合线深,两侧较对称;果皮较厚,底色浅黄色,阳面粉红色;果肉橙黄色,肉质硬韧,纤维少,汁液中,酸甜适中.可溶性固形物含量12.6%,酸含量1.02%,扁核,核小.

关键词: 农作物品种审定委员会 芽变 新品种 可溶性固形物含量 平均单果重 黑龙江省 橙黄色

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黑龙江省水稻冷害 Ⅰ冷害发生的时间规律

黑龙江农业科学 2009 CSCD

摘要:通过对50余年黑龙江省部分市、县气象资料和产量数据的分析,阐述了黑龙江省水稻低温冷害发生的时间规律。自20世纪80年代以来,全球气候变暖,水稻生育期内的气温也呈明显增加趋势。而在最近的几年间,6~8月份的日平均温度却呈现下降的态势,这正是导致2002年、2003年和2006年部分水稻产区障碍型冷害发生的原因。

关键词: 水稻 冷害 发生规律

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丝兰提取物对体外模拟条件下绵羊瘤胃脲酶活性的影响

中国饲料 2009 北大核心

摘要:本试验采用体外培养法,研究添加不同浓度的丝兰提取物对绵羊瘤胃脲酶活性的影响。分别通过添加0、100、1000、10000mg/L以及在此基础上细化添加0、100、200、300、500、1000mg/L的丝兰提取物,测定其对1%尿素分解产生的氨浓度的测定,确定丝兰提取物抑制瘤胃微生物脲酶活性的最佳抑制范围。综合生产成本及使用效果,本试验结果表明,丝兰提取物的浓度为300mg/L时,对氨浓度抑制效果较好。

关键词: 丝兰提取物 瘤胃 脲酶活性 体外法

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铁线蕨栽培管理技术

中国园艺文摘 2009

摘要:铁线蕨(Adiantum capillarus-veneris)又称铁丝草、铁线草,为铁线蕨科铁线蕨属多年生草本观叶植物。广泛分布于地球的热带、亚热带地区,在我国长江以南的地区和长江以北的陕西、甘肃和河北均有分布。铁线蕨在蕨类植物中属小型陆生蕨,铁线蕨乃至于蕨类植物是地球上最早出现的陆生植物类群,具有4亿多年的悠久历史,堪称植物的活化石。1形态特征多年生常绿草本,丛生、喜温暖、湿润和半阴的环

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丰收24大豆密植栽培技术

种子世界 2009

摘要:大豆密植栽培是目前大豆栽培应用面积较大,发展速度较快的一项先进栽培技术。密植栽培技术具有四大优点。一是密植栽培增加密度,扩大了绿色面积,提高了光能利用率,充分利用土壤中的水分和养分从而实现个体与群体合理配置,达到高产。二是适合机械化管理。三是封垄早,宜控制草荒,便于生产管理。四是增产幅度大,比常规垄作栽培一般增产达8%~10%,高达23%。

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抗草甘膦转基因大豆(RRS)在黑土生态系统种植的安全性研究

大豆科学 2009 北大核心 CSCD

摘要:为明确抗草甘膦转基因大豆(RRS)在黑土生态系统种植的安全性,经过连续3年田间和盆栽试验,分析了抗草甘膦转基因漂移(漂流)可能性,及抗草甘膦转基因大豆(RRS)在黑土区对根际生态系统微生物数量,氮代谢和两种土壤酶活性的影响。结果表明:在自然条件下花粉漂移几乎是不可能的,但如人为加大虫媒传播(大于10头·m-2),抗草甘膦基因的漂移概率接近0.05%,漂移距离为0.7m。RRS除对根际真菌数影响不显著外,对根际土壤细菌、放线菌、氨化和硝化细菌均表现降低趋势。在大豆不同生育期,RRS除对根际土壤真菌数影响不显著外,对根际土壤细菌,放线菌,氨化和硝化细菌均表现降低趋势;RRS根际土壤细菌多样性指数与均匀度指数均低于亲本RRS-S;氨化强度与RRS-S相比差异不显著,RRS根际土壤硝化强度显著低于亲本RRS-S;RRS降低了过氧化氢酶和脲酶活性。

关键词: 抗草甘膦基因 转基因大豆 黑土生态系统 土壤细菌多样性

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维生素C对视黄酸受体β基因的调控

湖北农业科学 2009 北大核心 CSCD

摘要:采用半定量RT-PCR方法,研究了在体外培养的猪成纤维细胞内添加不同浓度的维生素C后,视黄酸受体β基因(RARβ)的表达变化情况。结果表明,维生素C能够促进RARβ基因的表达,而且不同浓度和不同作用时间对RARβ基因的表达影响效果不同。

关键词: 成纤维细胞 维生素C 视黄酸受体β基因 RT-PCR

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