5种主要海水养殖病原菌多重微流控荧光定量PCR快速检测技术的建立

徐媛媛; 于永翔; 王印庚; 王春元; 李永杰; 刘定远; 秦蕾; 张正; 《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：在养殖现场开展多病原的快速检测是水产养殖产业健康发展的重要技术需求之一。本研究选取哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）的vhhA基因、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的toxR基因、大菱鲆弧菌（Vibrio scophthalmi）的luxR基因、鳗弧菌（Vibrio anguillarum）的empA基因和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种（Photobacterium damselae subsp.damselae）的Mcp基因作为靶基因，设计特异性引物，通过优化反应体系和条件，并在微流控芯片进行集成，建立了可同步检测这5种病原菌的多重微流控荧光定量PCR检测技术。结果显示，本研究所建立的检测技术最佳反应体系：2×Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix 5μL,Primer F/R各1μL,DNA模板2μL,ddH2O 1μL。反应条件为95℃30 s,95℃5 s,61℃30 s，扩增30个循环。通过绘制标准曲线发现，在10~9～10~4 copies/μL浓度范围内均有良好的线性相关性。该方法对哈维氏弧菌、副溶血弧菌、大菱鲆弧菌、鳗弧菌和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种特异性强，对5种病原菌的最低检测限分别为40、20、200、500和20 CFU/mL，显示出较高的灵敏度，且样品平均检测时间缩短至26 min左右。本研究结果为开发水产养殖多病原快速、精准的现场检测技术奠定了重要基础。

关键词： 哈维氏弧菌 副溶血弧菌 大菱鲆弧菌 鳗弧菌 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种 微流控PCR 现场快速检测

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合方鲫2号育种和推广-专访中国工程院院士、湖南师范大学刘少军教授

罗红; 《科学养鱼 》 2023 北大核心

摘要：2022年由湖南师范大学和湖南岳麓山水产育种科技有限公司共同研制的新型优质鲫鱼合方鲫2号顺利通过了全国水产原种和良种审定委员会的审定。一直以来，由中国工程院院士、湖南师范大学刘少军教授牵头的国家大宗淡水鱼产业技术体系育种技术与方法岗位团队在大宗淡水鱼新品种培育的道路上砥砺前行，结出了累累硕果，在鱼类育种技术和方法上屡屡创新，有效推动了我国水产种业振兴的步伐。近日，科学养鱼杂志社编辑有幸采访了刘少军院士，了解合方鲫2号的育种情况及其团队近几年的研究成果。

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渔业科技创新助力实现藏粮于技

李梦龙; 董晓丽; 马卓君; 韩刚; 《科学养鱼 》 2023 北大核心

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发酵菜粕在水产养殖中的应用研究进展

石桉宁; 王亚军; 《科学养鱼 》 2023 北大核心

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3种鱿鱼鱼糜凝胶品质比较

张奇秀; 郭全友; 陈婷婷; 李孟婕; 苏雨瞳; 房思维; 包海蓉; 《食品与机械 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：目的:寻找更优质的鱿鱼鱼糜制品原料。方法:以秘鲁鱿鱼、北太平洋鱿鱼、阿根廷鱿鱼为研究对象，通过比较3种鱿鱼鱼糜的凝胶强度、持水性、蒸煮损失、流变特性、化学作用力等指标，研究其凝胶特性差异。结果:3种鱼糜的凝胶强度、持水性由高到低依次为阿根廷鱿鱼＞秘鲁鱿鱼＞北太平洋鱿鱼，蒸煮损失则反之。动态流变温度扫描显示，3种鱼糜的储能模量（G′）均随温度先降低至最小值（45℃）,然后升高至最大值（75℃）后再次降低，当温度达到90℃时，阿根廷鱿鱼鱼糜的G′较另两种鱿鱼鱼糜更高。阿根廷鱿鱼鱼糜的离子键、氢键、疏水相互作用显著强于其他两种鱿鱼鱼糜。结论:阿根廷鱿鱼鱼糜的凝胶品质最佳，是鱿鱼鱼糜的最佳原料品种；生产中需要根据3种鱿鱼鱼糜的不同特点利用辅助手段来提高其凝胶品质。

关键词： 鱿鱼 品种 鱼糜凝胶 凝胶特性 流变

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中华蛸消化系统组织学结构及消化酶活性研究

李雪梅; 王兴强; 陈四清; 李凤辉; 常青; 党保成; 韦寿永; 边力; 《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探明中华蛸(Octopussinensis)的消化机能，明确适宜的投喂频率，减少互残造成的经济损失，本研究对中华蛸消化系统各器官进行组织学观察，并比较了摄食前后各消化器官消化酶活性以及机体营养物质的代谢水平的变化。结果显示，中华蛸嗉囊、胃、盲囊和肠由黏膜层、黏膜下层和肌层组成，内壁含有较多的褶皱，胃壁肌层最发达，盲囊和肠黏膜褶皱层无护膜；前唾液腺和后唾液腺均为复合管状腺，由腺管及大量的分泌导管组成；肝脏内肝小叶界限不易分辨。中华蛸摄食后，胰蛋白酶活性显著高于脂肪酶和淀粉酶活性。肝脏是分泌消化酶的重要器官，胰蛋白酶活性在肝脏最高为(148.74±21.25)U/mg，淀粉酶和脂肪酶活性在肝脏和胃最高。摄食后血浆总蛋白在120 min达到最低值后上升，血糖和肌糖原浓度在200min达到最大值后下降，血浆胆固醇和血浆甘油三酯浓度变化幅度较小。消化过程分为2个阶段：第1阶段食物进入嗉囊和胃部，肝脏分泌大量胰蛋白酶，机体的营养物质为消化过程供能，含量下降；第2阶段胰蛋白酶活性处于较高水平，营养物质逐步被消化吸收。中华蛸完整的消化吸收过程约400 min，研究表明，中华蛸养殖生产中适宜的投喂间隔时间为6～7 h。

关键词： 中华蛸 消化系统 组织学 消化酶 消化时间

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几种典型氮源加富培养对胶州湾浮游植物群落结构的影响

赵可歆; 李晓娇; 陆庆沅; 赵海翔; 崔正国; 曲克明; 《海洋环境科学 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：陆源输入氮源对近岸海域浮游植物生态系统有至关重要的作用。为了解胶州湾海域浮游植物对不同陆源输入氮源的响应，本研究于2020年秋季在青岛近海海域进行了现场加富实验，并通过显微镜镜检和矩阵因子化程序（CHEMTAX）分析了不同氮源加富培养对胶州湾浮游植物群落结构的影响。结果表明，单一氮源对浮游植物细胞生长的促进作用表现为尿素（CH₄N₂O）＞氯化铵（NH₄Cl）＞硝酸钠（NaNO₃）；李村河河水中的复合氮源极显著地促进了浮游植物的生长（P＜0.01）；氮源加富培养后，胶州湾海域优势种由甲藻（Pyrrophyta）演替为硅藻（Bacillariophyta）；显微镜镜检结果与CHEMTAX分析结果的线性回归分析显示，在不同氮源培养体系中，甲藻细胞丰度与Chl a生物量呈显著正相关关系（r=0.656,P＜0.05），硅藻细胞丰度与Chl a生物量呈极显著正相关关系（r=0.674,P＜0.01）；浮游植物对溶解有机氮（DON）的利用率大于溶解无机氮（DIN），对复合氮源的利用率大于单一氮源。本研究阐明了几种典型氮源加富培养对胶州湾浮游植物优势种的影响，可为海洋生物资源开发和利用提供理论参考，并为近岸水域海洋生态环境保护提供理论依据。

关键词： 胶州湾 浮游植物 氮源加富 CHEMTAX

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基于UPLC-Q-TOF/MS代谢组学技术探究α-酮戊二酸对碳酸盐碱胁迫下鲫血清代谢的影响

丁璐; 刘英杰; 魏晓凤; 耿传业; 刘文质; 韩琳; 袁芳英; 王鹏; 孙言春; 《中国水产科学 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究饲料中添加α-酮戊二酸（α-ketoglutarate,AKG）对碳酸盐碱生境胁迫下鲫（Carassius auratus）血清代谢变化的影响机理,设置淡水对照组（Con组）、NaHCO₃暴露组（CA组）以及NaHCO₃暴露AKG饲料添加组（AKG组）,采用UPLC-Q-TOF/MS代谢组学技术,结合主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）等多元模式识别技术分析鲫血清代谢物组成及含量变化特征,鉴定显著差异代谢物并进行相关代谢通路分析。结果显示,与对照组相比, CA组有27个差异代谢物,富集到了甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、色氨酸代谢等12条代谢通路;与CA组相比, AKG组有38个差异代谢物,富集到了甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、不饱和脂肪酸生物合成等14条代谢通路。研究结果表明,碳酸盐碱胁迫会造成鱼类氧化应激损伤,发生甘油磷脂代谢、鞘脂代谢和能量紊乱,而饲料中添加AKG能够促进TCA循环提供稳定的碳源和能量供应,通过正向调节甘油磷脂代谢、鞘脂代谢和氨基酸代谢等代谢途径来提高盐碱胁迫下鱼类的抗氧化能力和免疫能力,从而缓解盐碱胁迫诱导的氧化应激损伤。本研究在代谢层面上阐明了AKG作为饲料添加剂缓解淡水硬骨鱼类盐碱胁迫损伤的有效性,为AKG在盐碱水域增养殖领域的实际应用提供了科学依据。

关键词： 鲫 α-酮戊二酸 碳酸盐碱胁迫 血清代谢组学 调控机制

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牡蛎–海参筏式综合养殖可行性研究

黄俊杭; 房景辉; 方建光; 于瑞海; 郑小东; 毛玉泽; 蒋增杰; 《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究牡蛎–海参筏式综合养殖模式的可行性，在2个具有代表性的牡蛎养殖区——山东荣成桑沟湾和乳山挂子场海域开展了长牡蛎（Crassostrea gigas）–仿刺参（Apostichopus japonicus）筏式笼养效果对比实验。在牡蛎养殖笼中，奇数层放养长牡蛎，偶数层放养仿刺参。实验设置3个因子：偶数层的底盘类型（普通养殖盘、无孔养殖盘和无孔养殖盘加无节网）、放养仿刺参的密度（1、2和4头/盘）和放养海域（桑沟湾和挂子场），共18个处理组，每组5个重复，实验期为2020年11月—2021年6月。实验期间，对两海域水体6项指标（叶绿素a、颗粒有机物、活性磷酸盐、亚硝酸盐、硝酸盐和铵盐）和实验动物的生长、存活等方面进行跟踪测定和比较分析。结果显示，两海域叶绿素a和颗粒有机物无显著性差异（P＞0.05），但其他4项营养盐指标均差异显著（P＜0.05）。处理组中，两海域各处理组间牡蛎个体体重及肥满度无显著差异（P＞0.05），海参低密度处理组中，海参个体体重及成活率显著高于海参高密度处理组（P＜0.05）；在其他处理条件相同时，无孔养殖盘处理组的仿刺参个体体重高于普通养殖盘处理组，在挂子场海域有显著差异（P＜0.05）。本研究表明，在牡蛎养殖笼偶数层使用无孔养殖盘并放养1头仿刺参，能在降低牡蛎养殖密度的同时，显著提高仿刺参的个体体重和成活率。综上，该牡蛎–海参筏式综合养殖模式可以作为牡蛎规模化养殖区的有益补充。

关键词： 仿刺参 长牡蛎 多营养层次综合养殖 生长 营养盐 水环境

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刺参响应灿烂弧菌侵染差异microRNAs鉴定及靶基因分析

畅孟阳; 李彬; 荣小军; 王锦锦; 于永翔; 王印庚; 廖梅杰; 张正; 范瑞用; 刘清兵; 《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：microRNA参与基因的转录后调控，在真核生物的生长发育、细胞分化和免疫防御等过程中发挥重要作用。刺参（Apostichopusjaponicus）病害问题已成为产业发展的主要限制因素之一，而其病害发生的分子机制尚待进一步完善。本研究以刺参重大疾病“腐皮综合征”的重要致病原灿烂弧菌（Vibriossplendidus）为侵染菌株，通过人工侵染实验制备患病刺参样本，采用miRNA-seq技术对侵染组（PT16S）和对照组（PT10H）各3头刺参的体壁组织进行miRNA测序，通过相关生物信息学软件对miRNAs进行鉴定和分析，筛选差异表达miRNAs （DEmiRNAs）并预测其靶基因，构建关键调控途径的miRNA-mRNA调控网络。结果显示，PT10H组平均得到5 902 588条有效序列，194个已知miRNA和19个新的miRNA;PT16S组平均得到5 053 529条有效序列，182个已知miRNA和42个新的miRNA。对2组鉴定到的miRNA进行差异表达分析，共筛选到2个上调和11个下调的具有显著差异的DEmiRNAs（P≤0.05），上调的DEmiRNAs靶基因预测结合到3010个靶基因，注释到585个GO terms及24条信号通路（P≤0.05），下调的DEmiRNAs靶基因预测到19 072个靶基因，注释到514个GOterms以及22条信号通路（P≤0.05）。对筛选到的DEmiRNAs进行实时荧光定量PCR （qRT-PCR）验证，显示miRNA-seq与qRT-PCR的一致率达到70%。根据KEGG分析结果构建泛素介导的蛋白水解途径和Notch信号通路的miRNA-mRNA调控网络，结果显示，13个DEmiRNAs分别靶向结合134个与泛素介导的蛋白水解相关的m RNAs和109个与Notch信号通路相关的m RNAs,Aja-miR-184、Aja-miR-2478和Aja-miR-9277p等DEmiRNAs可能参与对Notch信号通路和对泛素介导的蛋白水解的调控。相关研究结果将为刺参疾病发生调控网络建立和机制解析提供依据。

关键词： 刺参 microRNA 灿烂弧菌 胁迫应答 靶基因 miRNA-mRNA调控网络

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