科研产出
猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ蛋白的间接ELISA检测
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要:为了建立快速检测猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae)抗体的间接ELISA方法,将质粒pET-rApxⅡ转化至BL21,IPTG诱导表达毒素rApxⅡ融合蛋白,经亲和层析纯化后的蛋白作为检测抗原。对ELISA各检测条件进行优化,结果显示,抗原最适包被浓度为10μg/mL,血清最佳稀释度为1∶80。用建立的ELISA方法对猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、猪副嗜血杆菌、大肠杆菌阳性血清进行检测,均无交叉反应。利用建立的ELISA方法从172份临床血清样本中检测出84份阳性血清样本,而利用Cps-ELISA试剂盒检测到74份阳性样品,本方法检测总符合率达83%。
关键词: 胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅡ 间接ELISA 检测方法
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淀粉基生物可降解薄膜的制备及性能研究
《中国塑料 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:摘要:将环氧氯丙烷(EDH)改性玉米淀粉与线形低密度聚乙烯(PE-LLD)、低密度聚乙烯(PE-LD)、马来酸酐接枝聚乙烯(PE-g-MAH)共混,以环氧大豆油作为增塑剂,加入少量三元乙丙橡胶(EPDM)增弹成分,并通过不同吹膜成型方法制备了厚度为0.012mm的可降解薄膜,采用红外光谱分析、扫描电子显微镜等测试手段对该薄膜的性能进行了研究.结果表明,当改性淀粉含量达到70%时,薄膜仍具有优良的力学性能;用旋转模头吹膜有助于提高降解薄膜的淀粉含量.
关键词: 线形低密度聚乙烯 低密度聚乙烯 环氧氯丙烷 玉米淀粉 薄膜 生物降解
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菜用甘薯品种宁菜薯1号的选育及配套栽培技术
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要:宁菜薯1号系江苏省农业科学院粮食作物研究所从苏薯9号放任杂交的组合后代中选育出的一个菜用型甘薯品种。该品种茎尖产量高、适口性好、品质优、中抗根腐病和病毒病,2013年3月通过全国甘薯品种鉴定委员会的品种鉴定。通过采用菜用甘薯的优质高产栽培技术可进一步提高宁菜薯1号的茎尖产量和品质。
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猪传染性胃肠炎病毒江苏株的分离与鉴定及其S基因序列分析
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:应用ST细胞,从临床上表现为腹泻症状的病死仔猪肠内容物中分离得到一株病毒,并对该病毒进行RTPCR,直接免疫荧光与动物回归等试验,证实该病毒为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),命名为JS2012株。应用PCR方法克隆出其初代(P1TS)与50代(P50TS)的S基因片段,进行序列测定,并将该基因序列与已发表的18个不同来源的TGEV毒株进行同源性和亲缘关系的比较分析。结果表明,各毒株间核苷酸同源性为96.0%~99.9%,氨基酸的同源性为96.5%~99.9%。TGEVJS201PITS株与中国江苏省HN2002株和美国Miller M6亲缘较近,表明不同地区分离毒株的S基因差异不大,而与P1TS相比,P50TS的S基因在1 124~1 129位置有6个碱基的缺失,对比发现,这种变异接近于弱毒株Purdue P115株所发生的变异,提示所发生的缺失可能与病毒毒力的减弱相关。
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结球甘蓝抗霜霉病基因连锁的SCAR标记开发
《分子植物育种 》 2013 CSCD
摘要:结球甘蓝霜霉病是由十字花科寄生霜霉菌引发的严重病害。本研究利用高代自交系‘R103’抗病亲本和‘S101’感病亲本及其F2分离群体,于霜霉病病发高峰期田间自然诱发抗性鉴定,由单基因显性控制。运用AFLP分子标记技术,结合BSA法,对双亲和2对抗、感基因池的筛选和验证,获得2个与结球甘蓝抗霜霉病基因相关的AFLP标记。204 bp BoRAAC/CAC标记转化为SCAR标记,发现在抗病亲本和抗病池中与感病亲本和感病池中条带只存在量上的差异,在抗性选择起中只能起辅助作用;191 bp BoRAAG/CTC标记(EU-635443.1),转化为SCAR标记,仅在抗病亲本和2个抗病池中获得目的条带,经F2群体单株验证后,与抗性位点的遗传距离为5.7cM。利用BoRAAG/CTC113标记对F1和BC1群体与多年苗期霜霉病抗性鉴定的20份结球甘蓝种质资源进行验证和筛选,该标记与品种(系)的霜霉病抗性吻合率达到95%,初步表明该标记可应用于早期结球甘蓝抗霜霉病抗性辅助选择。
关键词: 结球甘蓝 霜霉病 抗霜霉病基因 AFLP标记 SCAR标记
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淹水胁迫下2个李砧木品种光合特性变化及其与环境因子的关系
《南京农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:以正常浇水为对照,研究了持续淹水胁迫下2个李砧木品种(‘GF43’和‘GF1869’)光合特性的变化,并对影响净光合速率变化的环境因子进行了分析。结果表明:淹水总体上使2个品种叶片的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、光饱和点(LSP)、表观量子效率(AQY)、CO2饱和点(CSP)和羧化效率(CE)降低,光补偿点(LCP)和CO2补偿点(CCP)升高。试验结束时,淹水处理‘GF43’和‘GF1869’的LSP与LCP差值与对照相比分别降低78.32%和67.46%,而CSP与CCP差值与对照相比分别降低46.43%和57.07%。淹水使植株对光和CO2适应的生态幅变窄,碳同化能力变弱,前期P n降低的主要原因是气孔因素而后期则为非气孔因素。灰色关联分析表明,与淹水胁迫下P n密切相关的环境因子为大气相对湿度(RH)(灰色关联度‘GF43’为0.576 5,‘GF1869’为0.791 7),其次是环境温度(T a)。此外,长期淹水后‘GF43’的Pn、Tr、水分利用效率(WUE)和AQY下降幅度均较‘GF1869’小,表明‘GF43’较‘GF1869’耐涝。
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水牛生长分化因子9成熟肽基因克隆及重组蛋白质和多克隆抗体的制备
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:为了获得水牛生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)重组蛋白质和抗GDF9抗体,根据GDF9基因编码区序列(GenBank:FJ529501.1)设计1对引物,用水牛基因组DNA为模板扩增水牛GDF9成熟肽基因序列,并与其他反刍动物的GDF9成熟肽基因序列进行同源性比较。将该序列克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间以构建重组表达载体,并将重组表达载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),转化菌经IPTG诱导表达重组蛋白质。经Ni-NTA凝胶纯化后的重组蛋白质与矿物油佐剂混合免疫新西兰兔制备抗GDF9抗血清,使用ELISA方法检测血清抗体效价,从抗血清中进一步纯化GDF9抗体。结果显示,成功获得了水牛GDF9成熟肽基因序列,该序列在牛和其他反刍动物之间高度同源。成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导后表达了分子量为1.96×104的GDF9重组蛋白质,其最高表达量达到菌体蛋白质总量的30%左右。成功制备了抗GDF9抗血清,血清效价达到1∶51 200,抗血清经纯化后得到了高纯度的GDF9抗体。GDF9重组蛋白质和抗GDF9抗体有望应用于提高羊繁殖性能和促进动物胚胎发育的研究和技术开发。
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蓝莓叶多酚与蓝莓果渣多酚提取物抗氧化活性研究
《食品工业科技 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:通过7种方法比较了蓝莓叶多酚(Blueberry leaves polyphenols,BBLP)提取物、蓝莓果渣多酚(Blueberry pomace polyphenols,BBPP)提取物以及对照品Rutin的抗氧化活性。在ABTS~+清除能力、还原力、亚硝酸盐清除能力、FRAP值、ORAC值方面,BBLP与BBPP均高于Rutin或者与其相当。而三种样品DPPH·清除能力顺序为BBLP>Rutin>BBPP,·OH清除能力顺序为Rutin>BBLP>BBPP。除亚硝酸盐清除能力和ORAC值与BBPP相当、·OH清除能力弱于BBPP外,BBLP在其余4种方法中表现出的抗氧化活性均强于BBPP。结果表明,BBLP与BBPP具有较强的抗氧化作用,可用于开发天然抗氧化剂。
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