科研产出
肠出血性大肠杆菌O157:H7△hly△stx△toxB基因缺失株的构建
《华北农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157:H7是食源感染的人兽共患病原菌。志贺毒素(Shiga toxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是O157:H7重要的毒力因子。选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,借助于sm10宿主菌获得O157:H7杂交菌株,通过同源重组,依次获得O157:H7(△hly△stx△toxB)基因缺失株,△hly△stx△toxB接种HEp-2细胞和感染链霉素处理的Balb/c小鼠,明确缺失株粘附定植的能力。经PCR鉴定,hly、stx和toxB基因分别被壮观霉素(Spc+)、庆大霉素(Gm+)和卡那霉素(Kan+)基因表达盒所代替,Western blot鉴定结果显示,O157:H7(△hly△stx△toxB)检测不到相应的Stx、Hly和ToxB蛋白。O157:H7(△hly△stx△toxB)生长特性与亲本株无明显差异。对于HEp-2细胞的粘附能力明显降低。Balb/c小鼠排菌时间和排菌量明显减少和降低。本研究成功获得O157:H7(△hly△stx△toxB),并且明确Stx、Hly和ToxB的缺失导致了O157:H7对HEp-2细胞和Balb/c小鼠的粘附和定植能力降低。本研究旨在为研制EHEC O157:H7基因缺失疫苗奠定物质基础。
关键词： 肠出血性大肠杆菌O157:H7 hly stx toxB 缺失株 小鼠 粘附
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江苏省机械化植棉的可行性分析
《中国棉花 》 2011 北大核心
摘要：本文分析了建国后江苏省植棉业的发展形势、纺织工业对原棉总量的需求变化以及我国棉花生产丰歉状况对世界原棉价格的影响。在深刻剖析近20年来江苏省棉花生产逐渐滑坡原因的基础上,提出变革棉花种植方式,改营养钵育苗移栽为麦(油)后直播,选用优质、高产、特早熟新品种,走机械化植棉之路。从常年大麦或油菜收获后至初霜期这一阶段≥10℃有效积温与新疆棉区的比较,结合已育成的优质、高产、特早熟棉花新品系大区试验结果,阐明了江苏省实现机械化植棉的可行性。调整农作物布局,将江苏省棉区逐步向秋季少雨的沿海、徐淮地区集中,形成优质、高产、高效植棉带。转变农业经营方式,通过土地的流转或有偿使用,实现麦(油)后直播棉花的大面积成片种植。根据农村经济的发展状况,提出江苏省机械化植棉分两步实施的发展战略。
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‘黄冠’梨正常试管苗与玻璃化苗生理生化及超微结构的比较研究
《园艺学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以正常和玻璃化‘黄冠’梨试管苗为试材进行组培快繁、生理生化及组织结构比较研究。结果表明:玻璃化苗较正常苗增殖能力显著降低,增殖出的试管苗仍为玻璃化苗,并且玻璃化程度加重;干物质积累较正常苗低31.3%,淀粉含量低29.57%,而可溶性糖含量高13.92%;叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总含量分别降低40.16%、43.24%和39.52%;ZR、IAA、GA含量,GA/IAA和ZR/IAA均高于正常苗,而ZR/GA显著低于正常苗;叶绿体数量减少、体积变小、类囊体叠跺不整齐,细胞核畸形或缺失。碳水化合物含量较低、激素代谢紊乱、光合结构破坏及细胞核物质减少是梨玻璃化苗的重要特征,可能是后代增殖能力显著降低的主要因素。
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微囊藻毒素MC-LR通过NO引起青菜幼苗的氧化胁迫反应
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：研究了微囊藻毒素(MC-LR)对青菜幼苗的胁迫效应。通过回归方程计算得出,浓度为4.23 mg/L的MC-LR处理5 d使青菜幼苗生长减少50%。通过特异性荧光探针DCFH-DA和DAF-2DA实时监测青菜幼苗体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量,发现MC-LR处理能够诱导ROS和NO的产生。抑制剂研究结果表明,MC-LR胁迫下,NO主要通过硝酸还原酶(NR)途径产生。采用NR抑制剂结合MC-LR共同处理,能够显著缓解MC-LR单独处理引起的ROS含量上升和抗氧化酶基因(Cu/Zn-SOD、CAT、APX)的转录水平升高。这些结果表明,微囊藻毒素MC-LR通过NO引起青菜幼苗的氧化胁迫反应。
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小麦赤霉病的抗性遗传分析
《麦类作物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为给小麦抗赤霉病遗传改良提供参考,利用苏麦3号及5个当地推广小麦品种为亲本,按Griff-ing双列杂交法Ⅱ配制15个杂交组合,以赤霉病病小穗率为抗性指标,研究了小麦赤霉病抗性的遗传。结果表明,在6个小麦品种中,苏麦3号和扬麦9号赤霉病抗性的一般配合力最好,能极显著地提高杂种后代的赤霉病抗性。小麦赤霉病抗性的遗传符合加性-显性模型,同时受加性和显性效应的作用,且加性效应更重要,显性程度为部分显性。控制赤霉病遗传的增效等位基因为显性,增减效等位基因频率在亲本中的分配存在显著差异。苏麦3号具有最多的控制赤霉病抗性遗传的显性基因,而宁麦8号则具有控制赤霉病抗性遗传最多的隐性基因。小麦赤霉病抗性可能受2～3对主效基因的控制,狭义遗传力较高,早代选择有效。论文最后还就小麦抗赤霉病育种进行了探讨。
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一种快速高效的DNA提取方法研究
《麦类作物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：DNA提取技术是分子实验的一个重要步骤,快速、高效的植物DNA提取方法是样品需要量大的分子实验的一个关键技术。本实验通过改进传统的DNA提取方法,使用96孔联体试管板,而不是单个离心试管,对叶片进行冷冻干燥后粉碎,无需使用液氮。在实验过程中,使用排枪操作,CTAB法提取DNA。以小麦为例,依据该方法提取幼苗叶片DNA,并选取6对引物对DNA样品进行PCR扩增,使用ABI PRISM3730 DNA分析仪对扩增产物进行分析,以检测提取的DNA质量。结果表明,本实验的DNA提取方法所得到的PCR扩增条带均有较高的强度。在6对实验引物的扩增结果中,扩增条带强度最好的引物有98%的样品在6935~16786 RFU(Relative Fluorescence Unit)之间;扩增条带强度较低的引物有93%的样品在532~1111 RFU之间;在所有的PCR扩增反应中,最低PCR扩增条带强度为205 RFU,缺带样品数量平均只有0.8%。按照本实验的方法操作,每人每天可提取上千个样品的DNA。因此,该DNA提取方法是一种高效、快速、能获得高质量DNA的有效方法。
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