科研产出
食用菌菌渣高效降解菌的筛选及主菌株产酶环境优化
《黑龙江农业科学 》 2023
摘要：为筛选出高效降解食用菌废弃菌渣的复合菌系，有效促进菌渣的降解速率，明确复合菌系主要功能菌株最佳发酵环境。利用富集培养、限性继代培养和低温逐代驯化技术对205份采集的菌源材料进行筛选，通过对纤维素酶活性的测定，选取最佳菌源提取物料。同时采用划线分离培养，分离主要功能菌株，对菌株的产酶条件进行优化。结果表明，从205份菌源提取物质中分离纯化的1个具有较强的纤维素降解能力的材料，发现该菌属于曲霉属，产酶较高的主菌株是聚多曲霉（Aspergillus sydowii）,对该菌株的产酶环境优化发现，产半纤维素酶和纤维素酶的最优环境是菌渣35 g·L-1、硫酸铵3.5 g·L-1、吐温-80为1.4 mL·L-1、KH2PO4 1.0 g·L-1、MgSO4·7H2O 1.0 g·L-1、NaCl 0.5 g·L-1、FeSO4·7H2O 0.1 g·L-1,培养时间为15 d。最终明确了复合菌系中主要功能菌株的菌株类别及其发酵环境，可为废弃菌渣资源的快速降解提供宝贵资源，并为菌渣资源肥向利用提供技术依据。
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牛病毒性腹泻病毒LN-1株的分离鉴定及基因组序列分析
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】查明并掌握辽宁地区牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus, BVDV）的流行特性及生物学特点，为BVDV的防治提供理论基础和技术支持。【方法】采集辽宁省某养牛场疑似发生BVDV感染的病死牛脾脏组织，用牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV）、牛呼吸道合胞体病毒（Bovine respiratory syncytial virus, BRSV）、牛副流感病毒3型（Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3）及BVDV基因特异性引物进行RT-PCR鉴定，将组织液接种MDBK细胞分离病毒。对细胞进行细胞病变效应（CPE）观察后再通过电镜观察、间接免疫荧光试验（IFA）鉴定病毒，PCR扩增病毒全基因组序列并对其进行遗传进化分析。【结果】BVDV特异性引物RT-PCR鉴定结果为阳性，在280 bp处有条带，与预期条带大小相符，其余病原特异性引物未扩增出条带，证明未感染其他病原；分离得到的毒株在MDBK细胞中培养未出现明显细胞病变效应；病毒纯化后，经电镜观察可见直径约为50 nm的病毒粒子；免疫荧光试验结果显示，在接种分离毒株的MDBK细胞内可观察到亮绿色荧光，而对照细胞没有荧光，将分离得到的病毒命名为LN-1株；全基因组扩增序列大小为12 269 bp,遗传进化分析发现，LN-1株与XC、SD-15及ZM-95株在同一分支，与XC株核苷酸相似性为96.2%,属于BVDV-1m型。【结论】本研究成功分离出1株1m型BVDV毒株，对后续疫苗研发、流行病学调查及致病机理等方面研究具有重要意义。
关键词： 牛病毒性腹泻病毒（BVDV） 全基因组测序 病毒分离 免疫荧光鉴定 遗传进化分析
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基于转录组学分析性别、月龄对荷斯坦牛网膜脂肪组织炎症相关基因表达的影响
《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：公牛(Bos taurus)去势和长期育肥能够促进内脏脂肪的沉积,过多的脂肪沉积易引发机体慢性炎症,然而有关牛网膜脂肪组织炎症的分子机理研究相对较少.本研究以牛网膜脂肪组织为研究对象,旨在探究性别和月龄对荷斯坦育肥牛网膜脂肪组织炎症相关基因表达的影响.选择16月龄荷斯坦公牛(BF16)、阉牛(SF16)及26月龄阉牛(SF26)各3头,测定生长和血液生化指标,屠宰后采集网膜脂肪组织,进行组织切片苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,采用RNA-seq技术对3组牛网膜脂肪组织进行转录组学分析,筛选组间差异基因,并对差异基因进行GO功能注释和KEGG富集分析、qPCR验证、候选基因筛选及蛋白网络互作分析.结果显示,共得到1173个组间差异表达基因,富集在8个基因表达趋势模式中;功能分析显示差异基因富集多个与炎症相关的生物学过程和信号通路;随机选择6个差异表达的基因进行qPCR验证,表达趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果可靠;筛选到与炎症相关的5个生物学过程条目和5个信号通路共50个非冗余基因,聚类分析发现,与BF16组相比,去势能够上调SF16组网膜脂肪组织中抗炎症和促脂肪细胞分化基因(如TNF-α诱导蛋白3(TNF alpha induced protein 3,TNFAIP3),骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)等)的表达,下调促炎症基因(如白细胞介素1β(interleukin-1beta,IL1B))的表达;与BF16和SF16组相比,长期育肥能够上调SF26组网膜脂肪组织中衰老和慢性炎症相关的基因(如半乳糖凝集素3(galectin 3,LGALS3),C-C基序趋化因子受体7(C-C motif chemokine receptor 7,CCR7)等)的表达.蛋白网络互作分析显示IL1B为关键中心节点.本研究结果为优化利用荷斯坦阉牛生产大理石纹牛肉技术提供理论依据.
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水稻机械直播(插秧)同步深施肥技术及配套机具
《农机使用与维修 》 2023
摘要：水稻机械直播(插秧)同步深施肥对比水稻传统撒施化肥技术具有省肥、省工、增产和减少环境污染等优点.该项技术的主要内容是在水稻机械直播(插秧)的同时通过机械的方法将水稻专用复合肥深施于稻田中,其目的是使所施的肥料在土壤中经过缓释溶解,为水稻生长长期供肥,延长了肥效,提高了肥料的利用率,该技术是农机同农艺结合的典范.论述了水稻机械直播(插秧)种植模式的施肥技术,分别介绍了水稻机械直播(插秧)同步深施肥配套机具中的具有代表性机型的主要结构、工作原理、技术参数及机具的特点.
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优质玉米种质资源N6321创制与利用
《黑龙江农业科学 》 2023
摘要：玉米种质资源是选育玉米新品种的基础,针对现阶段市场需求,利用常规育种手段与分子辅助育种相结合,创制聚合高产、抗病、抗逆、脱水快等优点的新种质资源,是确保玉米持续增产和稳产的重要途径.优异种质资源N6321是利用先玉508玉米品种作为基础材料,通过人工辅助选择,创制而成.经对该新种质物候期、抗性能力、丰产性、血缘等多方面的研究表明,N6321隶属瑞德群,需有效积温2650℃,抗叶斑病、高抗丝黑穗病、高抗茎腐病和中抗穗腐病,丰产性好.利用N6321选育的玉米新品种嫩单21,具有矮秆、耐密、早熟、宜机收的优点,适合在黑龙江省第一积温带下限、第二积温带上限种植,在实际生产中得到广大种植户的青睐.此种选育模式在未来玉米生产中有较好的推广价值.
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寒地大豆高产栽培技术分析
《大豆科技 》 2023
摘要：高产优质栽培技术可提升大豆产量和品质，但是针对我国寒地大豆主产区栽培技术的系统研究较少，亟需建立系统高产优质栽培技术体系服务寒地大豆生产需求。本研究在前期品种筛选基础上，以确定的最适主栽大豆品种黑河43号为研究对象，设置5个种植密度，分析不同种植密度条件下农艺性状变化规律，明确影响大豆产量和品质的主要因素，集成寒地大豆高产优质栽培技术，为提升寒地大豆主产区产量提供技术参考。结果表明，GGE-biplot分析显示黑河43号为寒地高产大豆品种，种植密度为41万株/hm~2时，大豆产量最高。株高随种植密度的增加呈逐渐增加趋势，产量随种植密度的增加呈先升后降趋势。有效荚数和单株粒数随种植密度的增加呈减少趋势。寒地大豆百粒重与降水量和积温呈正相关；蛋白质含量与降水量呈正相关，与积温呈负相关。在卫星遥感数据指导下，整合测土配方施肥、种衣剂拌种、叶面肥喷施和防虫除草等技术措施，集成寒地高产优质大豆生产技术，为寒地大豆生产提供技术支持和理论指导。
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利用毕赤酵母底盘产生大麻二酚酸合成酶及其催化活性分析
《食品工业科技 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了实现大麻二酚酸合成酶(CBDAS)的微生物底盘高效表达,为体外合成大麻二酚(CBD)提供重组酶.首先从高CBD含量大麻叶片中克隆CBDAS基因,利用生物信息学方法分析其蛋白的基本理化性质,构建重组质粒pPIC9K-CBDAS后转化毕赤酵母菌,筛选重组蛋白CBDAS高表达的培养条件,并分析CBDAS的催化活性.结果表明,构建的pPIC9K-CBDAS融合蛋白表达系统能在毕赤酵母中表达;在甲醇添加量为 1%、培养基pH6.0和培养 48h的诱导条件下表达量最大;重组酶CBDAS催化底物大麻萜酚酸(CBGA)反应 4h后大麻二酚酸(CBDA)含量显著增加(P<0.05),在 8h后 CBD含量显著增加(P<0.05),在 12h时合成 CBDA和CBD量达到最大值;CBDAS在大麻叶片大麻萜酚酸(CBGA)粗提液和CBGA标品中反应 12h后分别生成CBDA 60.64和 20.12 ng/mL,CBD 128.01和 207.87 ng/mL,具有较强的催化活性.通过酵母异源表达实现了大麻CBDAS的重组表达,为经济高效地合成CBDA和CBD提供活性酶.
关键词： 大麻 大麻二酚酸合成酶 大麻二酚 异源表达 条件优化
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