科研产出
高效液相色谱法测定鸡肉中的氟喹诺酮类药物
《热带农业科学 》 2009
摘要：建立鸡肉中4种喹诺酮类药物的HPLC-FLD检测方法。鸡肉样品经过无水硫酸钠脱水后用酸化乙腈提取,用乙腈饱和的正己烷除去杂质,下层乙腈液经氮气吹干后用流动相定容,再加入乙腈饱和的正己烷,混匀后在高速离心机上离心,下层液体用于高效液相色谱分析。采用Xbridge C18柱分离,以乙腈-磷酸二氢钠为流动相等度洗脱,荧光检测器检测,外标法定量。4种喹诺酮类药物标准曲线的线性回归系数均在0.999以上,线性范围为0.2～50μg/L,环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星检出限为1.0μg/kg,达氟沙星检出限为0.3μg/kg。在20、40、80μg/kg添加水平下的添加回收为86.3%～102.3%,相对偏差为1.0%～4.6%。该方法具有快速,灵敏的特点,符合现行兽药残留分析的要求。
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不同处理对银合欢种子发芽率的影响
《安徽农业科学 》 2009 北大核心
摘要：[目的]筛选出打破种子硬实的最佳处理方式和处理时间。[方法]分别用擦破种皮、热水、无水酒精、40%氢氧化钠溶液、30%双氧水溶液和98%浓硫酸浸种对热研1号银合欢种子进行处理,研究各处理对银合欢种子发芽率的影响。[结果]银合欢种子的发芽势为20.0%,发芽率为27.3%,硬实率为89.3%。砂布磨破种皮的银合欢种子的发芽势为82.0%,发芽率为83.3%。与对照相比,其发芽势上升了62.0个百分点,发芽率上升了56.0个百分点。无水酒精、氢氧化钠和双氧水浸种处理对银合欢种子的发芽势和发芽率无显著影响。浓硫酸浸种时间从1 min到9 min,处理后种子的平均发芽率随着浸种时间的延长而提高,浸种9 min的平均发芽率最高,达78.0%,比对照提高了50.7个百分点。[结论]该研究为银合欢的规模化栽培利用和田间大量快速育苗提供了理论依据。
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海南海域海洋红酵母的分离鉴定和应用性能评价
《中国农学通报 》 2009 北大核心
摘要：从海南海域的海滩、红树林、渔港码头、产盐滩涂、入海河沟分离海洋红酵母,旨在从中筛选与养殖对象共生的优良菌株。从海南海域分离和纯化海洋红酵母,对海洋红酵母进行形态和生理学及分子生物学的鉴定,大量发酵海洋红酵母,提取分离类胡萝卜素并测定其含量,并将海洋红酵母与鱼虾等养殖对象共培养试验。结果表明,共分离了40多株酵母菌,经形态和生理鉴定以及产类胡萝卜素试验,筛选得到一个高产类胡萝卜素的红酵母属(Rhodotorula)菌株。该菌株在葡萄糖2%、蛋白胨2%、酵母提取物0.3%、核黄素2×10-6 mol/L、pH 4.5的培养基中,于28℃振荡(180 r/min)培养72 h,其细胞生物产量可达87.55 g/L,类胡萝卜素含量可达520 mg/L;可以在13%高盐和pH 1.0强酸中培养生长;经过与鱼共培养试验,结果显示在合适的菌体浓度条件下,该菌株对鱼无毒害,并与鱼共生。该菌株与鱼共生,显示良好的应用前景,将其应用于盐诱导基因启动子的克隆和盐诱导表达外源基因蛋白(如抗菌肽)的海洋红酵母工程菌的构建,可以更好地应用于水产养殖业。
关键词： 海南海域 海洋红酵母 分离和鉴定 类胡萝卜素 共生试验
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香蕉束顶病毒海口分离物NSP基因的原核表达
《热带作物学报 》 2009 CSCD
摘要：应用PCR方法从感染香蕉束顶病毒的香蕉植株幼嫩假茎和叶片总DNA中克隆NSP(Nuclear shuttle protein)基因的编码区,并通过Gateway技术定向重组到原核表达载体pDESTTM-17中的6×His标签下游,经菌落PCR和测序鉴定结果表明,成功构建了原核表达载体pDESTTM-17-NSP。阳性克隆转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达、SDS-PAGE分析和western blot检测,结果显示,融合蛋白以包涵体的形式稳定表达,分子量约为20ku,与预计值相符。通过诱导条件的优化,确定了最佳的融合蛋白表达条件为25℃、0.1mmol/LIPTG条件下诱导4h。从而为制备NSP多克隆抗体和进一步研究NSP的功能奠定了基础。
关键词： 香蕉束顶病毒 Gateway重组技术 NSP 原核表达
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杀菌剂对番木瓜胶孢炭疽菌的室内毒力测定
《农药 》 2009 北大核心
摘要：胶孢炭疽菌引起的炭疽病是番木瓜最主要的田间及采后病害,采用菌丝生长速率法测定了20种杀菌剂对胶孢炭疽菌的室内毒力。结果表明:咪鲜胺、苯醚甲环唑、氟硅唑、腈菌唑+醚菌酯、丙环唑、戊唑醇、烯唑醇、吡唑醚菌酯8种药剂的抑菌效果较好,EC50值在0.01～0.47mg/L之间;其中咪鲜胺对病菌的EC50值最低,抑菌效果明显高于对照多菌灵,成为最具潜力的替代使用药剂,氟硅唑、戊唑醇和丙环唑3种药剂EC50值也较低,抑菌效果仅次于咪鲜胺。
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抑菌剂和筛选剂对香蕉受体系统的影响
《基因组学与应用生物学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：本研究将抑制农杆菌生长的两种抑菌剂头孢霉素和特泯丁,以及3种筛选剂潮霉素B、卡那霉素和PPT除草剂,以不同浓度添加到香蕉的3种受体系统中,研究它们对香蕉组织生长与分化的影响。实验结果表明:不同抑菌剂和筛选剂对香蕉再生体系的影响程度不同,不同香蕉再生体系对相同抑菌剂和筛选剂的敏感性也不同,因此不同香蕉再生体系需要选择不同的抑菌剂与筛选剂的最佳的配比和组合配比。3种筛选剂在香蕉的3种再生体系中的筛选能力顺序都为:PPT>潮霉素B>卡那霉素。
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云南猪屎豆属遗传多样性的ISSR分析
《草业学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：以云南41份野生猪屎豆属种质为材料,用ISSR进行分析,结果表明,100个ISSR引物中共筛选出16个多态性明显、反应稳定的引物,41份材料DNA共扩增出164条条带,平均每个引物的扩增条带数为10.3条,其中多态性条带总数为159条,多态性比率为99.3%。材料间遗传相似系数范围在0.481 7~1.0000,表现出丰富的遗传多样性;通过正交设计优化,得出适合猪屎豆属野生植物的ISSR-PCR反应体系为:40 ng模板DNA、引物0.2μmol/L、200μmol/L dNTP、1×Buffer(Mg2+plus)、0.5 U Taq酶(TaKaRa);ISSR引物最佳退火温度为50或53℃;通过聚类分析,可将41份猪屎豆属种质分为5大类,同一种的种质可以很好的聚成一类;通过对思茅猪屎豆ISSR鉴定,得出它与猪屎豆属的遗传相似系数接近,然而确定该物种属于猪屎豆属需要做更多的鉴定。
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