科研产出
红树林细菌Bacillus sp.次生代谢产物研究
《中国药物化学杂志 》 2008 CSCD
摘要：目的研究红树林细菌Bacillussp.发酵液中的化学成分。方法采用各种色谱方法进行成分分离,综合运用多种波谱学手段确定单体化合物的结构。结果从一株红树林细菌Bacillussp.的发酵物中分离得到6个单体化合物和一个混合物,单体化合物分别鉴定为N-oleoyl-threonine(1)、大豆素(2)、尿嘧啶(3)、胸腺嘧啶(4)、腺嘌呤核苷(5)、腺嘌呤脱氧核苷(6),混合物鉴定为环(脯-甘)二肽(7)和1,5-dideoxy-3-C-methyl-arabini-tol(8)。结论化合物1、8为首次从该属菌株中分离得到。
关键词： 结构鉴定 柱色谱法 红树林细菌 芽孢杆菌属 化学成分 发酵液
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AcNPV polyhedrin与cry3Aa基因的重组与重组融合蛋白在大肠菌中的表达
《中国生物工程杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的:将cry3Aa基因与斜纹夜蛾多角体蛋白(AcNPV Polyhedrin)基因重组,构建重组蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:首先以PHT305a载体质粒DNA为模板,PCR扩增cry3Aa基因。再以PET30a-ph-1a载体质粒DNA为模板,PCR扩增多角体蛋白基因。将两基因片段分别连入PMD18-T克隆载体,测序鉴定。表达载体的构建分为两步,先将SacI和XhoI双酶切下来的cry3Aa基因连入表达载体pET30a,再将PMD18T-Ph经BglⅡ和SacI双酶切,所获得的ph基因片段与具有BglⅡ/SacI末端的pET30a-cry3Aa相连接,构建表达载体pET30a-cry3Aa-ph,表达载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白表达并纯化,SDS-PAGE分析结果。结果:cry3Aa和AcNPV Polyhedrin基因序列与报道完全一致。1mmol/LIPTG诱导4h表达的外源蛋白,经SDS-PAGE分析显示在大约103kDa处有表达产物特异条带。结论:获得cry3Aa与polyhedrine基因的重组蛋白工程菌株,为此基因应用于杀虫剂奠定了基础。
关键词： BT cry3Aa AcNPV polyhedrin 重组 表达
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不同环境中土壤微生物总DNA的提取与纯化
《广西农业科学 》 2008
摘要：采用SDS高盐缓冲液抽提法提取了林地、厂区、菜地3种不同环境中土壤微生物总DNA,结果表明,该方法可以从土壤微生物中提取到长度大于23.1kb的DNA;不同环境中提取的DNA产量和纯度都存在一定的差异,每克干土的DNA提取量介于53.55~579.93μg之间,其中以处于原始状态的丛林提取量最高。粗提的土壤微生物DNA采用酚氯仿和柱式腐殖酸去除剂进行纯化,纯化后的土壤微生物DNA可以用于PCR扩增,使用细菌16SrDNA基因的引物可以扩增到相应的片段。
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Mineirao柱花草MSRA基因的克隆及其植物表达载体的构建
《热带作物学报 》 2008 CSCD
摘要：根据抗病柱花草中的1个AFLP特异片段SG2950-1设计引物,利用RACE技术从Mineirao柱花草中克隆到一个MSRA基因;经测序比对,该序列与细胞色素氧化酶系基因有较高的相似性。构建了植物表达载体,通过冻融法将该载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,为进行该基因的功能分析奠定了基础。
关键词： Mineirao柱花草 MSRA基因 植物表达载体
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氮磷钾肥配施对腰果植株抗寒力的影响
《生态环境 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：2008年3月1日调查海南省昌江县受严重寒害的4龄腰果无性系FL30L9(34)氮磷钾肥配施试验果园,观察受寒害植株的主干树皮和各级分枝树皮保持青绿色或变褐色状。根据植株受寒害程度,分析氮磷钾肥配施对植株抗寒力的影响。测定受寒害植株的株高、冠幅,分析植株受寒害程度与植株大小的相关性。结果表明,氮磷钾肥对腰果植株抗寒力的影响顺序是磷肥>钾肥>氮肥;高氮(N650g·a-1·株-1)、中磷(P2O5200g·a-1·株-1)、中钾(K2O250g·a-1·株-1)的施肥水平,有利于提高植株抗寒力,植株受寒害程度低;植株受寒害程度分别与植株的株高、冠幅呈直线极显著负相关和显著负相关。
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柱花草太空育种后代种子萌发期抗旱性研究
《热带农业科学 》 2008
摘要：以不同渗透势的PEG(6000)溶液模拟水分胁迫条件,研究了柱花草28个品系的耐旱能力。结果表明:较高PEG浓度(20%)明显抑制28个品系胚根和胚芽的生长及种子发芽率、发芽势、发芽速度、抗旱指数和活力指数的提高;PEG浓度对胚芽生长的抑制效应比胚根大;各品系的发芽率、发芽势、活力指数和萌发抗旱指数均随PEG浓度的增加显著降低(P<0.05)。采用模糊隶属函数法对上述7个指标的耐旱性进行综合评价,结果显示9804-4-8、9803-1-16、9803-1-19号品系较为耐旱,9809-54-5、五队224-2、9804-16-1为不耐旱品系,而对照为中等耐旱品系。
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尘螨变应原Der fl全序列的原核表达及生物信息学分析
《四川动物 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的 构建尘螨变应原Der fl原核表达体系,并了解其分子特征.方法 提取粉尘螨总RNA,用RT―PCR合成Der fl编码基因,将其克隆至pMD19-T载体,亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化至大肠杆菌并刚IPTG诱导表达.用生物信息学软件对测序结果进行分析并预测其空间结构.结果从粉尘螨总RNA中扩增获得Der fl cDNA片段,成功构建了表达质粒pET-28a(+)-Der fl,Western blotting显示原核表达获得成功.测序结果提交GenBank,臀陆号为EU095368,该基因长966bp,与参考序列同源性达99.9％,推测其编码氩基酸321个,属疏水蛋白,位于细胞外,信号肽位于1~18氨基酸处.同源性分析提示Der fl和Eur ml相似率为88％,而Der fl和Derpl的相似率为77％,分子进化树中粉尘螨和梅氏嗜霉螨聚成一簇.Derfl的二级结构由α-螺旋(109aa,33.96％)、延伸链(55aa,17.13％)、β-转角(18aa,5.61％)和随机卷曲(139aa,43.30％)组成:结论 尘螨变麻原Der fl原核表达获得成功,为进一步生产重组变麻原奠定了基础.生物信息学分析表明粉尘螨和梅氏嗜霉螨的亲缘关系可能更近,而与屋尘螨关系稍远,此与现行的形态学分类系统并不符合.
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