科研产出
浙江红肉柚类胡萝卜素合成酶基因片段的SNP分析
《果树学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对浙江红肉柚类资源进行遗传多样性分析,为其搜集保护和合理利用提供理论依据。【方法】采用RTPCR技术从11份浙江红肉柚类资源中克隆6个类胡萝卜素合成主链上的关键酶基因片段,分析所得基因片段中的SNP位点,对浙江红肉柚类资源的遗传多样性进行精确研究。【结果】在11份供试材料中克隆到的八氢番茄红素合成酶(PSY)、八氢番茄红素脱氢酶(PDS)、ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)、番茄红素β环化酶(LBCY)、番茄红素ε环化酶(LECY)、β-胡萝卜素羟化酶(BCH)的基因片段长度分别为348、521、426、429、403、459 bp,其中PSY、ZDS、LBCY、LECY、BCH的基因序列在供试材料中分别有2、12、2、1、1个单核苷酸位点发生变异,多态性频率分别为1 SNP/174 bp、1 SNP/43.3 bp、1 SNP/213 bp、1 SNP/403 bp和1 SNP/459 bp,而PDS基因序列在11份供试材料中高度保守,无核苷酸位点变异。利用Mega软件NJ聚类法对6个基因片段的核苷酸序列进行遗传多样性分析显示,11个样品聚为3大类群。‘官南红柚’‘文成红心柚’‘处红柚’‘木兰柚’亲缘关系较近,归于第一类;‘古磉柚’‘永嘉红心柚’‘青田红柚’归于第二类;‘红肉蜜柚’‘麻步文旦’‘四季柚’和‘红心四季柚’归于第三类。【结论】浙江红肉柚类资源果肉中类胡萝卜素合成主链上的关键酶基因在编码区除PDS外均存在SNP变异,其中ZDS的单核苷酸多态性频率较高,PSY、LBCY、LECY和BCH 4个基因片段的SNP变异位点较少,说明类胡萝卜素生物合成基因在柚品种间总体较为保守,但这些变异可能是导致果肉红色深浅程度的变因。根据6个基因片段核苷酸序列的遗传多样性分析,‘官南红柚’、‘文成红心柚’、‘处红柚’和‘木兰柚’,‘古磉柚’‘永嘉红心柚’和‘青田红柚’,‘红肉蜜柚’‘麻步文旦’‘四季柚’和‘红心四季柚’,分别归于亲缘关系较近的同一类群。
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不同柑橘品种对链格孢褐斑病的感病性离体评价
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：链格孢褐斑病(Alternaria alternata pv.citri)主要为害橘类,以及橘和柚,或橘和橙的杂交柑橘,引起落叶、落果、枯梢,带病果实因果面病斑而难以鲜销。文章应用该病菌的孢子悬浮液接种离体叶片法评价了42个柑橘品种对褐斑病的感病性,发现橘类中的太田椪柑、新生系3号椪柑、岩溪晚芦、红橘418、杨小2-6南丰蜜橘、乳橘、无核早橘、瓯柑和满头红均高度感病,少核本地早、朱红和砂糖橘表现免疫;杂柑中的明尼奥拉、奥尔兰多、诺瓦橘、卡拉橘、濑户香、天草、津之香和默科特高度感病,大谷伊予柑和西之香为轻微感病,而爱伦达尔、红玉柑、清见、不知火和南香免疫;橙类、柚和柠檬对褐斑病免疫;而温州蜜柑、常山胡柚和金柑等一些品种的感病性则有待进一步确定。
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蝉花虫草活性成分的抗惊厥作用
《菌物学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：本研究采用活性追踪的方法,逐步从人工培养蝉花虫草分离获得A(50%乙醇回流提取)、B(膜分离)、C(大孔树脂洗脱)和D(Sephadex LH20柱纯化)等4种样品,单一化合物D纯度为98.62%,鉴定为N6‐(2‐羟乙基)腺苷[N6‐(2‐hydroxyethyl)‐adenosine,HEA]。研究各样品对戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)诱导的小鼠惊厥模型的影响,以及选择性腺苷A1受体(AA1R)拮抗剂DPCPX或选择性腺苷A2A受体(AA2AR)拮抗剂ZM241385对HEA作用的影响,并采用苏木精‐伊红(hematoxylin‐eosin,HE)染色、免疫组化(immunohistochemical,IHC)染色和蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)等技术进一步探究HEA抗惊厥作用的机制。结果表明,各样品(i.p.)均有抗惊厥活性,HEA(40–60mg/kg,i.p.)能显著延长惊厥小鼠的存活时间和降低死亡率,DPCPX(2mg/kg,i.p.)能够拮抗HEA的抗惊厥作用,而ZM241385无此作用;HE、IHC和WB的结果进一步揭示DPCPX显著降低HEA的作用。综上所述,蝉花虫草的HEA具有抗惊厥作用,并且可能通过激活腺苷A1受体而起作用。
关键词： 金蝉花 N6‐(2‐羟乙基)腺苷 腺苷受体 抗惊厥 机理
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NaCl胁迫下沙枣幼苗的离子代谢特性
《林业科学研究 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)是胡颓子科(Elaeagnaceae)胡颓子属(Elaeagnus Lnn.)的落叶小乔木,主要分布于我国西北五省,在新疆塔里木河、玛纳斯河、甘肃疏勒河、内蒙古的额济纳河两岸有天然的沙枣林分布,在北京、天津和山东等地也开展了引种栽培[1-2]。沙枣的果实、叶片、花和种子等在食品加工、药物提炼和饲用开发等领域具有较高的价值,沙枣木材也是高级家具和工艺品制作的良材[1];同时,沙枣具有耐旱、耐盐碱和抗风沙的特性,并且沙枣根系上有固氮根瘤菌,能提高土壤肥力,改善土壤环境,因此,沙枣已经被列为半干旱地区和盐土地
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利用SRAP标记绘制中国芥菜基因源分子指纹图谱
《热带作物学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以中国9个省份和地区的86份芥菜种质资源为供试材料,利用SRAP分子标记和DNA指纹图谱分析软件,绘制芥菜遗传资源基因组DNA指纹图谱。从270对SRAP引物中筛选出40对多态性明显、条带清晰的引物组合,对86份供试材料基因组DNA分子进行扩增,共扩增出632条谱带,其中多态性条带427条,多态性比率为67.56%,表明芥菜种质资源遗传多样性较丰富。以供试的86份芥菜种质资源的SRAP扩增条带为基础,建立供试材料扩增条带指纹数据库的Excel文件,然后利用自主开发的DNA指纹图谱软件,构建86份芥菜种质资源的DNA指纹图谱,获得了所有芥菜种质资源的分子"身份证"。结果表明,SRAP分子标记非常适合芥菜DNA指纹图谱的构建。
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磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因在乳酸乳球菌中的异源表达
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：根据乳酸乳球菌密码子的偏好性,在不改变编码蛋白的基础上,优化设计并合成枯草芽孢杆菌磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因,将其与大肠埃希菌-乳酸乳球菌穿梭质粒p AMJ399连接,构建重组质粒p AMJ399-PIPLC,并电转化至乳酸乳球菌中进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示:重组蛋白以可溶性蛋白的形式分泌于胞外,分子质量约35 ku,与预期蛋白大小一致。重组蛋白在PI-李斯特氏菌显色平板上显现明显的乳白色晕圈,证明重组蛋白具有酶活性,磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)在重组乳酸乳球菌中成功获得表达。通过优化培养条件,以2%转接量,在含有1%红霉素抗性的GM17液体培养基中,于32℃静止培养24 h,测得培养基上清液中PI-PLC的浓度为1.092μg·m L-1。
关键词： 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C 克隆表达 乳酸乳球菌 GPI锚定蛋白
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不同碳源促进污染水体氮素转化的微生态过程
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：在试验条件下,向氮污染河道水体中C/N按15∶1补加甲醇、乙醇、乙酸钠、柠檬酸钠、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、羧甲基纤维素钠,检测水体氨氮、亚硝酸盐、硝酸盐、总氮的变化,以及在此过程中水体细菌胞外酶活性、细菌群落结构的变化。结果显示,除甲醇、羧甲基纤维素钠外,补加有机碳源显著降低了水体氨氮的含量,水体β-葡萄糖苷酶活性在碳源补加后快速增加,补加葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的水体中细菌群落结构明显异于其他处理,表明添加有机碳源可显著加快污染水体中氮素的转化,水体微生物在此过程中起到关键作用。水体细菌群落结构和代谢活性对不同类型有机碳源有着不同的响应,因而添加不同有机碳源对水体氮素转化具有不同的促进作用。
关键词： 有机碳源 污染水体 细菌群落 PCR-DGGE 细菌代谢活性
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利用卡氏白和尼罗红染色观察稻瘟病菌有性世代的结构
《中国水稻科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是异宗配合的子囊菌,但至目前,关于其有性世代产生过程和结构的研究相对较少。本研究利用两个稻瘟病菌菌株Guy-11与2539在多种培养基上进行杂交试验,观察有性世代产生情况。结果表明,两菌株在所有参试培养基上杂交后均能产生子囊壳,但子囊壳的数量、产生速度和成熟度各不相同,以燕麦培养基为最佳。为了进一步观察有性世代的结构,我们采用卡氏白和尼罗红对子囊和子囊孢子进行染色和荧光观察。荧光显微镜下,子囊和子囊孢子的细胞壁均能被卡氏白染成清晰的亮蓝色,细胞结构清晰可辨。成熟的子囊壳内可产生大量的子囊,子囊中含有8个子囊孢子,子囊孢子通常含有4个细胞。同时,子囊孢子能够被尼罗红染成橘红色,表明子囊孢子中储藏大量的脂肪类物质。本研究提供了一种有效的观察稻瘟病菌有性世代结构的荧光染色方法,为后续的研究奠定了基础。
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收获期对糯质玉米种子活力及呼吸代谢的影响
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：文章以来源于花甜糯072自交后代的糯质玉米为研究对象,于授粉后16,20,24,28,32,36,40 d收获种子,自然晾干至比较一致的含水量后进行活力测定。研究结果表明,该糯质玉米在授粉后32~36 d前后收获种子质量较高。授粉后32 d收获的种子标准发芽率和顶土萌发率最高,种子浸出液电导率降至最低,后趋于稳定。授粉后36 d的种子千粒重最大,低温发芽率最高。授粉后40 d收获的种子呼吸代谢最强,此时增加代谢时间(IMT)、氧代谢率(OMR)、相对发芽时间(RGT)分别为8.78 h,3.86%·h~(-1),42.56 h,说明此时收获的种子已具备旺盛的呼吸代谢能力。建议糯质玉米种子电导率为4.1~4.3μS·cm~(-1)·g~(-1),IMT,OMR,RGT值分别为11.65~11.78 h,2.86~3.40%·h~(-1),50.51~54.46 h时采收,可获得高活力种子。
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棉渣堆肥过程理化性质变化及腐熟度评价
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：对新疆特色农业废弃物棉渣进行堆肥化处置,以牛粪为调理剂,采用人工翻堆的方法进行高温好氧堆肥试验,研究添加牛粪对棉渣堆肥发酵的影响,探讨堆肥过程中不同部位物料理化性质的差异,并依据发芽指数(GI)评价物料的腐熟程度。结果表明,添加牛粪可以加速物料升温,提高主发酵温度,缩短发酵时间,添加牛粪处理的T值(终点C/N与初始C/N之比)比对照组提前12 d降到0.6以下,且发酵后GI较高,对植物毒性较小。不同部位温度的变化,以中层升温最快,温度最高。中层总有机碳(TOC)下降速率和总氮(TN)上升速率最快,深层次之,表层最慢。深层易形成厌氧区,物料腐熟较慢,堆肥腐熟之前深层GI最低,完全腐熟之后各层之间理化性质无显著差异。
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