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DNA流式细胞术在植物遗传及育种中的应用

中国细胞生物学学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:DNA流式细胞术是一种分析和测定分离细胞核DNA含量的方法。该方法的关键技术包括制备完整细胞核悬浮液、核酸荧光染料染色、根据相对荧光密度(DNA含量)对细胞核进行分类。由于样品制备及分析方便快捷,该技术已成为植物倍性鉴定、基因组大小测定、生殖途径鉴定等研究的重要工具。该文在对DNA流式细胞术基本原理简要介绍的基础上,对其在植物遗传和育种中的应用进行了综述。

关键词: 流式细胞术 植物 基因组大小 细胞核DNA含量 遗传 育种

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稗草成熟胚诱导愈伤组织再生植株的初步研究

植物生理学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:以成熟稗草种子作为外植体,通过去除大部分胚乳和消毒处理,置于诱导培养基(MS+0.6 g·L~(-1)水解酪蛋白+2.0 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1) 6-BA+0.2 mg·L~(-1) NAA)上,黑暗条件下培养7 d后超过80%种子长出愈伤组织。将愈伤组织置于继代培养基(MS+0.2 mol·L~(-1)甘露醇+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+0.5 mg·L~(-1) 6-BA)上,光照条件下培养7 d后有超过80%的愈伤组织成活。将继代后的愈伤组织转入分化培养基(MS+0.6 g·L~(-1)水解酪蛋白+0.2 mg·L~(-1) ZT+2.0 mg·L~(-1) NAA)上,培养14 d后超过60%的愈伤组织分化成苗。将分化苗转入生根培养基(1/2MS+0.6 g·L~(-1)水解酪蛋白)上,7 d后有超过90%的分化苗生根。试管苗经3 d炼苗后移栽入土壤,成活率达100%。

关键词: 稗草 成熟胚外植体 组织培养 植株再生

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减压对水蜜桃采后呼吸途经和活性氧代谢的影响

中国食品学报 2016 EI 北大核心 CSCD

摘要:研究了(10±5)k Pa、(80±)5 k Pa两个减压压力处理及常规冷藏对水蜜桃贮藏期间褐变指数、呼吸途经、活性氧和相关酶活性变化的影响。结果表明,减压处理可有效减少果肉丙二醛的含量,减轻膜脂过氧化,减缓果肉褐变的发生。减压处理果实中的超氧阴离子产生速率低于对照,而H2O2含量在减压贮藏中保持稳定。减压处理的交替氧化呼吸途径在贮藏中后期得到增强,并有效保持APX、POD酶活性,说明减压处理在减少活性氧生成的同时,有利于活性氧的清除。采用(10±5)k Pa压力处理更有利于维持采后贮藏的活性氧代谢能力。结论:减压在采后保鲜上的作用与活性氧代谢相关。

关键词: 减压 水蜜桃 呼吸途径 活性氧代谢

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副猪嗜血杆菌血清13型菌株免疫原性外膜蛋白的筛选与分析

中国预防兽医学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:为筛选副猪嗜血杆菌血清13型分离株ZJ1018具有免疫原性的外膜蛋白,本研究从该分离菌提取外膜蛋白进行双向电泳分离,并进行免疫印迹分析。共对21个蛋白点进行质谱分析,通过NCBI数据库搜索,共对应14种蛋白,包括7种外膜蛋白。其中OmpA、palA、D15为与血清5型菌株共有的免疫原性蛋白,D15蛋白在不同血清型菌株中氨基酸序列同源性不低于99.4%;蛋氨酸ABC转运体底物结合蛋白、GS60、外膜脂蛋白A属于在副猪嗜血杆菌中被筛选出的新的免疫原性外膜蛋白。本研究为副猪嗜血杆菌亚单位疫苗的开发提供了新的依据。

关键词: 副猪嗜血杆菌 外膜蛋白 血清型 免疫原性

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人工接种发酵倒笃菜工艺优化

核农学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:为提高倒笃菜的品质,缩短其生产周期,本试验将传统方法制得的倒笃菜中分离出的优势菌植物乳杆菌d-1作为发酵菌种,采用三因素三水平试验,建立各因素和响应值之间的数学回归模型。结果表明,倒笃菜的最优发酵条件为:加盐量5.20%,p H值4.60,接种量5.00%。此条件下制得的倒笃菜亚硝酸盐含量低,品质优良。本研究可为人工接种发酵倒笃菜的工业化生产提供技术支持。

关键词: 倒笃菜 人工接种发酵 加工工艺 优化

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浙江省鸭、鸡、鹅群感染坦布苏病毒的血清学调查与分析

浙江农业学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:为分析坦布苏病毒(TMUV)在鸭、鸡、鹅群中的感染情况,开展了血清流行病学调查。2010—2014年间,在浙江省11个地市采集鸡、鸭、鹅血清样品4 989份,采用ELISA方法检测TMUV抗体水平。结果表明:鸭、鹅、鸡的抗体阳性率分别为27.33%,6.94%,1.11%。按年度分析,在2010—2011年鸭TMUV引起的产蛋下降疫情流行期间,鸭感染群的TMUV抗体阳性率为54.83%,鹅、鸡未采样检测;2012年鸭、鹅TMUV感染群的抗体阳性率分别为33.88%,20.00%,鸡未检测到抗体阳性群;2013年鸭、鹅、鸡TMUV感染群的抗体阳性率分别为49.68%,10.00%,28.00%;2014年鸭、鹅TMUV感染群的抗体阳性率分别为39.19%,6.67%,鸡未检测到抗体阳性群。总体来看,鸭群在2010—2011年TMUV流行期间的抗体水平最高,表明鸭群是TMUV感染的主要禽种。

关键词: 坦布苏病毒 ELISA抗体 血清流行病学调查

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鸽子GR基因cDNA克隆与表达分析

农业生物技术学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)是保守的核受体超家族中的一员,属于核转录因子,GR对维持机体稳态起着重要作用,同时在动物繁殖代谢过程中扮演着重要的角色。本研究旨在克隆鸽子(Columba livia domestica)GR基因的c DNA全长并分析其组织表达谱。参照鸡(Gallus gallus domesticus)的GR基因序列设计引物,利用RT-PCR和RACE技术,克隆得到了鸽子的GR基因的c DNA序列。测序结果表明,鸽子GR基因包含有2 313 bp的全长CDS序列,102 bp的5'UTR序列,以及18 bp的3'UTR序列,共编码770个氨基酸(Gen Bank登录号:NM_001037826.1)。通过序列同源性分析发现,鸽子GR氨基酸序列与鸡的同源性为94%,与短吻鳄(Alligator mississippienses)的同源性为85%,与人(Homo sapiens)的同源性为75%。通过与鸡、鳄鱼和人的氨基酸序列比对分析发现,鸽子的GR氨基酸序列中有一个非常保守的DNA结合区(DNA binding domain,DBD)和一个保守性较高的激素识别区(hormone recognition domain,LBD),此外还包括一个GR特异区域。利用q RT-PCR技术发现在鸽子不同组织中均有表达,表达量由高到低依次为睾丸、胰、肺、卵巢、腹部脂肪、肝、心、骨骼肌、肾、脾、输卵管、胃、下丘脑、大脑、肠和嗉囊。睾丸中表达量显著高于其他组织(P<0.05),其次为胰腺和肺(P<0.05),在嗉囊中的表达量显著低于其他各组(P<0.05)。本研究获得鸽子GR基因c DNA全长、组织表达规律,为进一步研究鸽子GR基因的功能提供了基础资料。

关键词: 鸽子 糖皮质激素受体基因(GR) 克隆 组织表达

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植物免疫诱抗剂对番茄灰霉病和早疫病的抑菌效果

农药 2016 北大核心 CSCD

摘要:[目的]检测植物免疫诱抗剂对番茄灰霉病和早疫病病菌生长的影响,分析其抑菌活性。[方法]采用菌丝生长速率法对比多菌灵和5种植物免疫诱抗剂抑菌效果。[结果]5种植物免疫诱抗剂都会抑制早疫病菌生长,效果显著的为吡唑醚菌酯和氨基寡糖素;高浓度香菇多糖促进灰霉病菌的生长,另外4种药剂则具抑制作用,效果明显的为吡唑醚菌酯和植物免疫增产蛋白。[结论]植物免疫诱抗剂对病原菌生长具有不同影响,可为田间应用提供参考。

关键词: 植物免疫诱抗剂 番茄灰霉病 番茄早疫病 抑菌效果

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大豆异黄酮还原酶基因的鉴定及生物信息学分析

大豆科学 2016 北大核心 CSCD

摘要:异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物,是大豆主要的功能活性成分之一。异黄酮还原酶(isoflavone reductase,IFR)是异黄酮分解途径的关键酶之一,在调控异黄酮含量及成分方面起着重要作用。本研究基于大豆全基因组测序数据,利用生物信息学方法鉴定了大豆异黄酮还原酶基因家族成员,并对其基因的序列特征、结构特征和遗传多样性进行了分析。结果表明:大豆异黄酮还原酶(GmIFR)家族含有17个成员,蛋白序列介于191(GmIFR07)和376(GmIFR11)个氨基酸之间,序列相似性为19.59%(Gm IFR07和GmIFR11)~98.43%(Gm IFR12和GmIFR17),结构分析表明这些基因内含子数目差异较大,2~6个不等,不均匀的分布在大豆的1、4、6、9、11、12和16号染色体上。

关键词: 大豆 异黄酮 异黄酮还原酶 基因家族

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SgP5CS基因克隆和生物信息学分析

浙江农业学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:利用同源克隆的方法,获得了碱蓬P5CS基因全长ORF,命名为SgP5CS。SgP5CS ORF全长2 151 bp,生物信息学软件预测其编码716个氨基酸组成的多肽,相对分子量为77 431.8 u,等电点为5.71,为稳定的亲水性蛋白,无跨膜结构域。Clustal X多重序列比对发现SgP5CS编码的氨基酸序列与盐角草P5CS相似性为93%,与盐角草P5CS的亲缘关系最近,其次是甜菜。脯氨酸是生物体内重要的渗透调节剂,而Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶则是植物合成脯氨酸的关键酶之一,SgP5CS的克隆将为进一步的功能分析鉴定基础。

关键词: 碱蓬 P5CS 脯氨酸

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