科研产出
耐药结核分枝杆菌基因变异研究
《中华检验医学杂志 》 2000 北大核心 CSCD
摘要：目的 研究耐多药结核分枝杆菌katG、inhA基因的变异机理。方法 用katG、inhA基因片段为引物 ,聚合酶链反应扩增产物 ,克隆后制备质粒 ,直接测定DNA序列。结果 15株耐异烟肼菌株均有katG基因突变 ,主要为点突变 ,其中 14株有 4 63位和 3 15位AA密码子改变。在 18个耐异烟肼菌株中 ,全部出现基因inhA基因变异 ,主要为点突变和缺失 ,以单个位点变异为主 ,各菌株变异不同。katG、inhA基因同时出现变异的比例高。结论 结核分枝杆菌耐药基因变异复杂 ,我国耐多药结核菌株与国外的菌株katG、inhA基因变异特点不同。
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番石榴的营养与施肥
《中国南方果树 》 2000 北大核心
摘要：1 番石榴的营养特性1 1 番石榴的养分需要量国外研究表明 ,每生产 10 0ｋｇ番石榴鲜果所带走的养分为 ,氮 1 83ｋｇ、磷 0 39ｋｇ、钾 1 62ｋｇ、钙0 90ｋｇ、镁 0 2 2ｋｇ、钠 0 2 4ｋｇ。其氮磷钾钙镁比为 1∶0 2 1∶0 89∶0 4 9∶0 12。番石榴养分需要量与品种、产量、修剪程度等因素有关。番石榴产量越高 ,修剪程度越重 ,所需的养分量越多。1 2 不同生长期矿质养分的变化规律番石榴叶片养分含量随着树体的生长发育呈规律性变化。据印度Ｓａｎｙａｌ等报道 ,叶片氮含量 3～ 8月逐渐上升 ,之后呈下降趋势 ,并在 12月至翌年 1月再次呈现上升趋势。番石榴树体 7月氮、钾含量与雨季产量 ,11月氮含量与冬季产量都有显著相关性。其在 7月和 11月对氮的需要与 2月和 6月对钾的需要表现得较为明显 ,而对磷的生理需求没有表现出特定的时段性。2 番石榴的施肥2 1 幼龄树施肥幼龄树施肥以促进生长、迅速形成丰产树冠为目的。定植时施用基肥 ,以堆肥、厩肥、人粪尿和饼麸肥为主。每株施用 10～ 15ｋｇ ,配施少量磷、钾、钙肥 ,可施过磷酸钙或钙镁磷肥 1ｋｇ。除施基肥外 ,配合修剪和培养枝梢的次数施肥 ,原则上掌握培养一次枝梢施肥一次 ,以基肥为主 ,配施少量速效氮肥。幼龄番石榴每年至少施两次主肥 ,第 1次在正造果采果后的 8～ 9月施 ,可株施腐熟厩肥 2 0～ 30ｋｇ ,复合肥 0 5ｋｇ ,第 2次壮果肥在 4月下旬至 5月上旬 ,施复合肥 1 5～ 2 0ｋｇ ,配以叶面施肥。2 2 结果树施肥番石榴需肥比例 ,台湾提出氮磷钾的标准为 2∶1∶4 ,钾肥需求量较高。马来西亚提出的标准为 1∶1∶1或 2∶1∶2。两者之间存在差异 ,这可能与叶片或果实中含有较高的钾有关 ,也可能是品种的差异由于番石榴全年都可开花、结果 ,施肥应依培育哪一次花为重点来决定。围绕促发健壮春梢和秋梢 ,促进两造果的花芽分化、着果与壮果 ,改良土壤 ,促进根系发达等进行。广州地区对中、迟熟品种主要培育正造果。施肥分 3次 ,第 1次施肥在春梢抽出前 ,第 2次在开花后 ,第 3次在采果后 ,对有翻花果的早熟品种 ,正造果及翻花果采收后各施一次肥。在广西 ,2月上旬施促梢肥 ,3月施促花肥 ,5月施壮果肥及促二造果果枝萌发肥 ,7月再施壮果肥 ,9～ 10月施二造果壮果肥 ,12月施过冬重肥。在台湾 ,番石榴多进行产期调节栽培 ,减少夏、秋果 ,增加冬、春果 ,并根据土地肥力情况进行施肥。一般于 2、5、7、8及 11月各施肥一次 ,贫瘠地则每月施一次 ,这些均为追肥 ,以速效性化肥为主。而分解缓慢的有机肥 ,可提早于 2月间施下 ,作为基肥以便缓慢分解利用。 8月及 11月的追肥对冬春果发育、提高品质有重要作用 ,是产期调节不可缺少的。在印度 ,氮、钾肥一般在 2月、5月上旬 (雨季果 )、7月上旬和 8月分 4次施下。柯立祥等推荐泰国拔番石榴的年株施肥量为氮0 2ｋｇ(折合尿素 0 4 4ｋｇ) ,五氧化二磷 0 1ｋｇ(折合过磷酸钙 0 73ｋｇ)、氧化钾 0 4ｋｇ(折合氯化钾 0 67ｋｇ)。而台湾推荐的较详细的年施肥量见表 1。 在南非 ,7年生树番石榴年株施肥量为 ,硝酸铵表 1 台湾推荐番石榴年施肥量 (ｋｇ 株 )树 龄(年 ) 肥料三要素量 氮 磷 钾 施 肥 量 硫酸铵 过磷酸钙 硫酸钾 总量 10 0 40 0 40 0 4 0 2 0 0 2 2 0 0 80 5 02 0 0 6 0 0 6 0 0 6 0 30 0 33 0 12 0 753～ 40 12 0 12 0 12 0 6 0 0 6 6 0 2 41 5 05～ 6 0 2 0 0 12 0 2 0 1 0 0 0 6 6 0 40 2 0 67～ 80 2 5 0 140 2 5 1 2 5 0 77 0 5 0 2 5 29～ 10 0 30 0 180 30 1 5 0 0 990 6 0 3 0 911年以上 0 40 0 2 0 0 40 2 0 0 1 10 0 80 3 90钙 (含氮 2 8% ) 0 8ｋｇ ,过磷酸钙 (含磷 10 5% ) 0 3～0 4 5ｋｇ ,氯化钾 (含钾 50 % ) 0 4ｋｇ。印度番石榴高产果园的年株施肥量为氮0 583ｋｇ、磷 0 2 71ｋｇ、钾 0 399ｋｇ。氮磷钾三要素比例为 1∶0 4 6∶0 68。强调氮肥的施用 ,这可能与当地果园缺氮有关。肥料施用时 ,可于树冠的垂直位置挖沟 ,将肥料施入沟内 ,混合后覆土。另外磷肥可在离树蔸 10 0～ 160ｃｍ处挖长 60ｃｍ环沟后施下 ,可提高肥料利用率 ,比靠近树蔸施肥的效果要好。旱季施肥若与灌溉配合 ,肥效更佳。此外 ,根外追肥对番石榴也有较好的效果。叶片施锌保果作用显著 ,还可提高果实中可溶性固形物含量。Ｓｈａｒｍａ等在印度分别于始花期 ( 3月中旬 )和着果 50 %以上后 ( 5月中旬 )两次叶面喷施 0 6%硫酸锌取得较好效果。在 2月的第 1周和 3月的第2周或 6月的最后 1周和 8月的第 2周分别对春梢和秋梢两次喷 2 %硝酸钙 +萘乙酸 10 0ｍｇ ｋｇ ,可促进枝梢生长 ,提早开花 ,提高着果率。 2月 (雨季果 )或7月 (冬季果 )喷 0 3%硫酸镁可提高果实品质。而在开花期、着果初期及着果后 3周分 3次喷施 2 %尿素 +0 4 %硫酸锌 +乙烯利 2 50ｍｇ ｋｇ +萘乙酸10ｍｇ ｋｇ ,可促进生长 ;喷施 0 2 %硼砂可促进果实增大。台湾于 9～ 10月每 5天喷一次 ,连续 3次喷0 4 %～ 0 6%磷酸二氢钾 ,可提高冬春果的品质。3 番石榴营养诊断及缺素症的矫治3 1 土壤诊断番石榴树粗生 ,能适应各种类型的土壤条件。从酸性较强的砖红壤到含盐分较高的海滩地均能生长 ,但以土层深厚、土质松软肥沃的沙质壤土为好。我国种植番石榴地区多为贫瘠的坡地赤红壤或砖红壤 ,土壤严重酸化 ,养分缺乏 ,保肥与供肥能力差。结果树较为缺乏的矿质元素有钾、钙、镁、硼和锌 ,在坡地垦植种植初期 ,氮和磷也较低。广东省农科院土壤肥料研究所对 35个蕉柑果园的调查结果 ,可为了解果园营养状况提供参考 :土壤普遍缺氮 ,4 0 %缺磷 ,70 %缺钾 ,65%缺镁 ,55%缺硼 ,4 0 %缺锌。酸性土壤易缺镁 ,据台湾省的资料 ,土壤中代换性镁约在 70ｍｇ ｋｇ以下时为缺镁 ,降至 35ｍｇ ｋｇ为严重缺镁。而孙光明等提出在粤西砖红壤上交换性镁低于 2 5ｍｇ ｋｇ为供镁能力极低。番石榴立地土壤有效钾、镁的含量都很低 ,且两者有明显的拮抗作用。而当前没有施镁的习惯 ,当大量补施钾肥后 ,很多时候会出现缺镁 ,所以施用钾肥时不要过量。在石灰质土壤上易出现缺钾症 ,有时会出现缺铁和缺锌症。此外 ,南方果园缺硼现象也时有发生 ,土壤中硼含量在 0 1ｍｇ ｋｇ以下即可能出现缺硼症。而酸性和中性土壤含铜量 ( 0 1当量盐酸提取 )小于2ｍｇ ｋｇ时 ,可能出现缺铜症。3 2 叶片营养诊断番石榴叶片营养诊断叶片采样的适宜时期以 4～ 7月龄较好 ,在印度为 7、8月龄 ,而南非推荐采 5月龄叶片 ,于 3月采样。采样部位为未挂果的顶梢第 3、4片新近老熟叶。印度高产番石榴果园的叶片养分模式为 :氮1 8%～ 2 0 % ,磷 0 12 %～ 0 16% ,钾 1 4 6%～2 0 8% ,钙 1 13%～ 1 69% ,镁 0 2 5%～ 0 31% ,铁2 66～ 34 5μｇ ｇ ,锌 176～ 2 67μｇ ｇ ,铜 10～ 13μｇ ｇ。南非的番石榴叶片营养元素的适宜范围为 :氮 1 6%～1 8% ,磷 0 11%～ 0 13% ,钾 1 2 %～ 1 6% ( 7年生树 )或氮 1 3%～ 1 6% ,磷 0 13%～ 0 2 3% ,钾 1 2 %～ 1 6% ( 7年生以上树 )。3 3 主要矿质营养缺素症 (目视诊断 )及防治3 3 1 缺氮 叶片均匀黄化 ,叶色较淡 ,叶面积减少 ,生长受到抑制。发生缺氮时通过增施氮肥或叶面喷施可使症状减轻或消除。3 3 2 缺磷 植株生长缓慢 ,叶片变小 ,叶数减少 ,叶片出现青铜症 ,未成熟就落叶。成熟叶片叶缘出现紫红色素 ,逐渐向脉间扩展 ,后期整个叶片呈紫红色。发生缺磷时及时喷 0 2 %～ 0 6%磷酸二氢钾可暂减缓缺磷带来的危害 ,但要从根本上解决 ,主要从土壤施肥中增加磷肥或找出缺磷原因予以解决。3 3 3 缺钾 叶片顶端呈火烧状 ,边缘失绿 ,枯萎内卷 ,中段叶片叶脉间有棕褐色坏疽斑点。石灰质土壤上可土施硫酸钾或氯化钾 30～ 4 0ｋｇ 666 7ｍ2 。3 3 4 缺镁 叶片叶绿体合成受到影响 ,并从叶脉间开始黄化 ,主脉附近组织仍维持绿色。严重缺乏时 ,脉间细胞有坏死现象 ,出现棕褐色坏疽。黄化症状通常发生在植株的老叶。防治措施 :果园多施有机肥 ,严重缺镁果园每年施用硫酸镁 15～ 30ｋｇ 666 7ｍ2 ,开花期间发现缺镁时 ,可喷 0 5%～ 1 0 %硫酸镁 ,每隔 7～ 10天一次 ,连喷 2～ 3次。3 3 5 缺铁 新叶均匀黄化 ,下位叶仍维持正常绿色 ,植株生长未受到明显影响 ,末期新叶由黄化转为白化。南方果园缺铁与土壤酸化引起的铝毒、锰毒等拮抗因素有关。锰毒害就常伴有对铁的拮抗 ,土壤管理上要注意纠正酸度 ,以施石灰为主。另可用0 5%～ 1 0 %硫酸亚铁加少许ＥＤＴＡ(螯合铁 )或柠檬酸喷叶 ,效果较好。3 3 6 缺硼 初期顶梢叶片出现不规则坏疽 ,上位叶片黄化。中度缺乏时 ,顶芽枯死 ,生长停顿 ,末期顶梢发生枯萎现象。可于始花期前后以 0 2 %硼砂或 0 1%硼酸作叶面施肥 ,喷至叶片布满雾滴为度 ,每隔 15天喷一次 ,共 2～ 3次。果实采后每株土施2 0ｇ硼砂 ,严重缺硼时可适当多施 ,并增施有机肥。3 3 7 缺铜 开始嫩叶轻微失绿 ,随后失绿症扩展到植株的中部叶片 ,有少量嫩叶叶尖边缘坏死 ,并逐渐扩展至叶基。叶片脉间失绿 ,中脉两侧出现褐色 ,节间明显缩短 ,茎的顶端变为深褐色。缺铜严重时 ,嫩叶枯萎、脱落 ,主茎顶端坏死 ,植株呈现死亡现象。铁肥、锌肥、钼肥与铜有拮抗作用。另外 ,缺铜的土壤上重施氮肥 ,会加重植株缺铜番石榴的营养与施肥@臧小平$中国热带农业科学院南亚热带作物研究所!湛江524091 @雷新涛$中国热带农业科学院南亚热带作物研究所!湛江524091
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中国野生葡萄抗黑痘病基因特有的RAPD标记
《中国农业科学 》 2000 北大核心 CSCD
摘要：以中国野生葡萄种间杂交组合毛葡萄商 - 2 4×欧洲葡萄龙眼的 F1群体为试验材料 ,运用 RAPD技术 ,采用集群分离分析 (bulked segregant analysis,BSA)的方法进行中国野生葡萄抗黑痘病基因连锁的分子标记的研究。获得了与抗病基因相连锁的 RAPD标记 :OPJ1 3- 30 0 ,并在杂种后代、中国葡萄野生种、河岸葡萄和欧洲葡萄中进行了验证。这为抗病分子标记辅助选择和利用图谱克隆抗病基因及最终将抗病基因导入优良栽培品种奠定了良好的基础
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结核分支杆菌耐利福平基因rpoB变异机理及其检测的研究
《海南医学 》 2000
摘要：目的研究耐利福平株结核分支杆菌rpoB基因变异及其PCR－SSCP检测方法。方法PCR法扩增rpoB基因．纯化克隆．大量质粒制备．经ABI377系统直接测序。结果17株多耐药结核菌，14株检测出rpoB基因变异。496（Arg），507（Gly→Asp），579（Ala→Gly）和583（Pro→Leu）密码子变异未见报道。全部为点突变，主要是错义突变。在511－533密码子区域变异只占66.7％。地区及耐药谱与rpoB变异无明显规律性。SSCP法检测rpoB的结果与之间测序法一致。结论在511－533之间的23个密码子外的变异比例高．结核菌耐RFP变异与此片断外的基因或其他基因突变有关。SSCP可用于结核菌耐RFP基因的检测。
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橡胶木热冷槽法防腐处理工艺基准的研究
《云南热作科技 》 2000
摘要：用 8种规格的橡胶木家具材和建筑材、4种防腐药液温度以及 9种防腐处理时间 ,组成 144个处理组合做试验 ,研究出一套“橡胶木热冷槽法防腐处理工艺基准”。按照这套“工艺基准”做 ,被处理木材的吸药量就能符合或基本符合国家标准
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安泰生防治芒果炭疽病效应
《热带作物学报 》 2000 CSCD
摘要：在芒果嫩叶及开花期间每隔 ７－ １０ ｄ喷 １次 １０００～２ ０００ ｕ ｇ／ｍＬ安泰生或 １０００ｕｇ／ｍＬ多菌灵杀菌剂可极显著地降低芒果叶片炭疽病的发生；果实中的潜伏侵染炭疽菌菌量亦显著地减少并且降低了贮藏期间果实炭疽病的严重程度。其中 ２ ０００ ｕｇ／ｍＬ安泰生效果最好，其防治叶片炭疽病效果达８１．５８％；采后果实炭疽病防效达６３．２１％。大田喷安泰生后还可适当提高果实产量和外观质量。
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应用DNA分子进行真菌分类的原理及方法
《华南热带农业大学学报 》 2000
摘要：系统介绍现代分子生物技术RFLPs ,PCR ,RAPDs,ALFPs和SAPs技术在真菌分类上的价值以及在某些方面已取得的成就 ,并详细介绍其分类原理和操作方法
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