马立克氏病病毒gB与IL-2融合基因载体的构建及表达

魏雪涛; 李银; 鲍恩东; 《南京农业大学学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：根据已发表的马立克氏病病毒(MDV)血清I型与鸡白介素2(IL2)DNA序列,设计两对引物,用PCR扩增出MDVgB基因和IL2基因,并克隆入pEGFPC1载体,构建了载体pC1gBIL。通过酶切分离外源基因表达盒,并将外源基因表达盒插入pTK2B质粒,成功构建了转移载体pTCgBIL。将转移载体pTCgBIL转染CEF细胞,培养36～48h后,经荧光显微镜观察,有荧光出现,证明该载体得到表达,并通过Westernblotting鉴定证明MDVgB和IL2的融合基因得到了有效的表达。

关键词： 马立克氏病病毒 gB基因 白细胞介素2 融合基因

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加拿大一枝黄花发生情况与防治研究初报

吴竞仑; 李永丰; 王一专; 刘丽萍; 《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD

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猪肺炎支原体P97基因抗原决定簇R1区的克隆与表达

刘茂军; 邵国青; 张映; 聂向庭; 《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因。经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%。W estern b lotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性。

关键词： 猪肺炎支原体 P97基因 克隆 表达

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盐水鸭低剂量辐射保鲜效果的研究

赵永富; 刘春泉; 朱佳廷; 严登秀; 王超; 《江苏农业科学 》 2005 北大核心

摘要：用γ射线(2～4kGy)辐照技术取代微波处理,对真空包装且保鲜处理后的鸭脯灭菌,在室温(最高32℃)下其贮存货架期延长至60～90d,营养成分无显著改变,一般顾客食用正常。但经专业人员鉴别,有轻微辐照味,香味变淡。

关键词： 盐水鸭 低剂量 辐照

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水稻品种淮优粳1号和盐粳5号对条纹叶枯病抗性的遗传分析

周彤; 程兆榜; 周益军; 熊如意; 刘海建; 黄建丽; 徐小兰; 吴扣兰; 《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD

关键词： 水稻 水稻条纹叶枯病 抗性 遗传分析

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饲料中聚醚类抗生素的柱后衍生同时测定方法研究

陈明; 耿志明; 王冉; 柳伟荣; 郑勤; 《中国饲料 》 2005 北大核心

摘要：采用高效液相色谱柱后衍生化法同时检测饲料中莫能菌素和盐霉素的含量。试验采用两个柱后衍生反应器,使莫能菌素和盐霉素在柱后分离后与衍生试剂1(硫酸)和衍生试剂2(香草醛)在不同的反应器中先后分别发生反应,经检测莫能菌素和盐霉素的保留时间分别在13min和17min左右。在饲料中添加莫能菌素和盐霉素浓度分别为20、60、120μg/mL时,莫能菌素的平均回收率为93.0%～97.7%,变异系数为1.05%～1.54%;盐霉素的平均回收率为94.0%～96.5%,变异系数为0.78%～1.01%。

关键词： 柱后衍生 高效液相色谱 莫能菌素 盐霉素 饲料

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鸡蛋中7种磺胺药物的多残留检测方法研究

刘铁铮; 王冉; 柳伟荣; 霍晓荣; 《食品科学 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：本试验研究建立了高效液相色谱法测定鸡蛋中7种磺胺药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶和磺胺喹恶啉)残留的提取、净化和高效液相色谱分析条件,鸡蛋经二氯甲烷提取、固相萃取、净化处理后上机检测,7种磺胺药物标准曲线的相关系数(R2)为0.9995～0.9999,在0.05～0.2mg/kg浓度范围内,回收率为73.2%～102.6%,变异系数为1.8%～8.7%。检测限为0.01～0.02mg/kg,定量限低于0.05mg/kg。

关键词： 磺胺药物 鸡蛋 多残留 固相萃取 高效液相色谱-二极管阵列检测器

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猪雌激素受体基因PvuⅡ酶切片段多态性与产仔性能的关系

孟庆利; 刘铁铮; 《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：研究了雌激素受体(ESR)基因对苏钟猪和二花脸猪繁殖性能的影响。记录 93头母猪 660多窝产仔数用以分析雌激素受体基因型对总产仔数、产活仔数的影响。结果表明,雌激素受体基因A和B等位基因的频率,苏钟猪分别为 0. 536 6和 0. 463 4,二花脸猪分别为 0. 307 7和 0. 692 3;二花脸猪各雌激素受体基因型间头胎总产仔数和产活仔数差异显著(P<0. 05);苏钟猪头胎总产仔数AA基因型与AB、BB基因型之间差异显著(P<0. 05);二花脸猪经产总产仔数和产活仔数AB基因型与BB基因型之间差异显著(P<0. 05)。

关键词： 雌激素受体 总产仔数 产活仔数 猪 PvuⅡ限制性内切酶

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小麦纹枯病菌的分子检测

陈怀谷; 方正; 陈厚德; 林玲; 王裕中; 《植物保护学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：小麦茎基部可寄居多种真菌,并可导致发褐、坏死等症状,与小麦纹枯病相混淆。为准确诊断小麦纹枯病,根据江苏省小麦茎基部常见寄居菌禾谷丝核菌 Rhizoctonia cerealis、立枯丝核菌 Rhi-zoctonia solani、长蠕孢菌 Helminthosporium spp.、交链孢菌 Alternaria spp.、小麦全蚀病菌 Gaeumanno-myces graminis var.tritici 和禾谷镰刀菌 Fsarium graminearum rDNA 的 ITS 区段序列差别,设计合成了2对特异性扩增引物(DNF77+DNR554,DNF81+DNR564)用于小麦纹枯病菌检测。2对引物均能从小麦纹枯病菌株扩增到特异性的分子片段,说明设计的特异性引物可以用来检测小麦纹枯病菌。采集田间具有小麦纹枯病症状、茎基部变褐及健康麦苗,进行病原菌分离,同时提取这些麦苗茎基部 DNA,利用上述2对引物进行扩增。结果表明,仅从能分离到禾谷丝核菌的麦组织中扩增到约480bp 的特异性条带。说明设计的特异性引物可以对田间小麦纹枯病进行早期、快速分子诊断。

关键词： 小麦纹枯病菌 分子检测

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流行性乙型脑炎病毒E基因的克隆、表达及初步应用

张雪寒; 何孔旺; 郭容利; 倪艳秀; 王芳; 俞正玉; 《中国病毒学 》 2005 CSCD

摘要：参照GenBank中的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14株序列设计了一对特异性引物,用PCR方法从SA14-14扩增E基因全长,然后克隆到pMD18-T载体中,转化宿主菌DH5a,提取阳性克隆质粒进行双酶切鉴定,将目的片段定向克隆到pET32a(+)中,转化入BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约73ka的蛋白,Western blotting试验呈阳性,表明E基因得到表达。以纯化的表达产物为核心抗原,猪抗JEV血清为一抗,HRP标记羊抗猪IgG抗体为二抗建立间接ELISA方法,并初步检测了一些血清样品,结果提示表达的蛋白具有很好的应用开发价值。

关键词： 乙型脑炎病毒 E基因 表达 间接ELISA

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