科研产出
牛病毒性腹泻病毒反向遗传学研究进展
《中国畜牧兽医 》 2012 北大核心
摘要：为了预防控制和消灭牛病毒性腹泻病(bovine viral diarrhea,BVD),深入研究牛病毒性腹泻病毒的致病机理和免疫机制非常必要,构建全长感染性cDNA克隆技术平台已成为研究RNA病毒的一条有效途径。文章针对黄病毒科瘟病毒属牛病毒性腹泻病毒反向遗传学的研究现状进行综述。
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滴灌湿润体内土壤墒情监测点位置的试验研究
《人民黄河 》 2012 北大核心
摘要：为了快速精确地监测土壤水分,通过田间试验观测了滴灌带一个湿润体内不同位置的7个中子仪监测点0～120cm深度土壤剖面的水分分布,分析了膜下滴灌湿润体内土壤水分随监测点位置的变化情况。结果表明:土壤含水率的差异,只与监测点与滴灌带的距离有关,距滴头5 cm处的监测点与距滴灌带30 cm处的土壤含水率垂直分布无显著性差异,与距滴灌带55、70 cm处的土壤含水率垂直分布有显著性差异。因此,墒情监测点应布置于距滴灌带0～30 cm范围内,不宜超过此范围。
关键词： 膜下滴灌 监测点位置 湿润体 土壤墒情 显著性检验
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捻转血矛线虫Hc38基因部分功能域的原核表达与鉴定
《中国预防兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为原核表达捻转血矛线虫Hc38基因的保守结构域,本研究参照GenBank中Hc38基因序列设计引物,扩增出Hc38基因的保守结构域序列,命名为HcP,将其克隆到表达载体pET32a中,并转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和western blot结果表明,HcP基因在大肠杆菌中高效表达,表达的重组蛋白分子量约为49.4 ku,并且表达产物能够与感染捻转血矛线虫的山羊血清产生特异的免疫印记条带,具有良好的反应原性。
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piggyBac转座子在绒山羊基因组中的整合位点及其特征分析
《中国农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】构建piggyBac(PB)转座子表达载体系统,研究PB转座子在绒山羊基因组中的整合位点。【方法】构建pB-CMV-EGFP-Neo转座载体和pcDNA-Trans辅助载体,利用lipofectamine 2000介导共转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得稳定转染的转基因细胞系。提取转基因细胞基因组DNA,利用反向PCR检测piggyBac转座子整合位点。【结果】构建了转座系统并成功介导外源基因在绒山羊成纤维细胞染色体中整合,获得了转基因细胞系;反向PCR检测显示在绒山羊基因组中有21个PB转座子整合位点;整合位点TTAA毗邻一侧的5个碱基组成中,PB转座子3′倾向于插入到富含AT(58.35%)碱基的区域,PB转座子5′倾向于插入到富含GC(57.8%)。【结论】PB转座子可在绒山羊基因组中发生高效转座,获得的整合位点信息可为利用PB转座子开展绒山羊研究提供理论参考。
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抗菌肽SMAP-29基因密码子优化及其在毕赤酵母中的表达
《安徽农业科学 》 2012 北大核心
摘要：[目的]对抗菌肽SMAP-29的基因密码子进行优化,并使其在毕赤巴斯德酵母(Pichia pastoris)中表达。[方法]根据已知抗菌肽SMAP-29的氨基酸序列,参照毕赤巴斯德酵母密码子的偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,并同载体pPIC3.5K连接,电击转化至毕赤酵母受体菌GS115中,经G418筛选高拷贝转化子,并用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型。用甲醇诱导表达构建好的重组酵母表达基因工程菌,并裂解酵母细胞进行Tricine-SDS-PAGE分析。[结果]在诱导至第2天的细胞裂解液中检测到与预测的SMAP-29分子量相当,约为3.2 kD的表达带;表达产物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明显的抑菌作用,而对大肠杆菌抑菌效果不明显。[结论]该研究为SMAP-29在生物医学、农业等领域中的应用奠定基础。
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干旱区戈壁地灌溉量对“克瑞森”无核葡萄根系及果实品质的影响
《北方园艺 》 2012 北大核心
摘要：以"克瑞森"无核葡萄为试材,研究了干旱戈壁地灌水对"克瑞森"无核葡萄根系及果实品质的影响,以提高葡萄产量和土壤水分利用率。结果表明:滴灌条件下葡萄根系在土壤纵向40cm以下的生物量变大,即葡萄果实采摘后的根系相比果实开花前在40～65cm处葡萄根系的分布量增加了26.2%;果实单粒重和果实硬度均随灌溉量的增大呈现出先降低后升高的趋势,而果实横径明显降低;灌溉量为400m3/667m2的处理最佳,产量为730.1kg/667m2,比对照增产62.6%,达到极显著差异水平;葡萄产量与灌溉量的指数模型拟合效果较为理想,相关系数达到了显著性。
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超声波协同纤维素酶提取骏枣多糖工艺优化
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：在单因素试验的基础上,选择纤维素酶添加量3 500 U/g(酶活200 U/mg以上),浸提时间40 min,利用Box-Behnken的中心组合设计及响应面法(RSM)探讨了超声波功率、液料比、pH值和温度等因素的优化组合提取骏枣多糖,通过建立二次回归模型,确定其最佳提取工艺条件为:超声波功率330 W、液料比18、pH值6.7、温度54℃。在此工艺条件下,骏枣多糖的提取量为7.25 g。结果表明,超声波协同纤维素酶法是提高骏枣多糖得率的有效途径之一。
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