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猪流行性腹泻病毒流行毒株S基因截短表达与抗原性分析

畜牧与兽医 2015 北大核心

摘要:临床分离获得1株猪流行性腹泻病毒(PEDV),对其纤突(S)基因5'端序列分析比较表明,该分离株(NB2011)与目前国内流行的猪流行性腹泻病毒毒株同源性为99%以上,与经典毒株(CV777)的同源性仅为82.6%。经氨基酸分析比较,PEDV纤突蛋白发生明显变异,在抗原位点35-55aa以及100-145aa区间存在很大差异。本试验对CV777株与临床分离的NB2011株的S基因N端差异较大的区段(CV777-S661,NB-S673)进行原核表达,分别获得经典株和流行株S基因N端表达蛋白。Western blotting结果表明,S661和S673重组蛋白均能与PEDV阳性血清产生特异性反应,且不与PEDV阴性血清反应。对两种蛋白进行交叉斑点试验,结果表明两者在反应原性上存在差异。研究结果为进一步阐明PEDV流行毒株抗原表位的变异及研究PEDV免疫保护机制打下基础。

关键词: 猪流行性腹泻病毒 S蛋白 原核表达 抗原性

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浙江省红颜草莓镶脉病毒(SVBV)的调查与茎尖脱毒技术研究

核农学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了解浙江省草莓主要产区红颜草莓镶脉病毒的感染情况,建立适宜的草莓脱毒快繁技术体系,调查了浙江省主要草莓产区草莓镶脉病毒的分布情况。PCR检测结果表明,大部分红颜品种的植株感染了SVBV。序列分析表明,所感染的病毒与NCBI中报道的病毒相似性达98%以上。以0.2 mm匍匐茎茎尖为外植体,用MS培养基+0.3 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1GA+0.01 mg·L-1IBA+3%蔗糖(p H值5.8)进行脱毒培养。PCR检测结果显示,茎尖培养植株的脱毒率达到93%。采用以上方法可以培养根系发达、抗性强的植株。试验结果将为建立完善的草莓病毒脱毒技术体系提供一定的技术指导。

关键词: 草莓 茎尖 脱毒 草莓镶脉病毒(SVBV)

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余杭区耕地地力等级划分及养分空间分布研究

浙江农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:根据余杭区2 814个耕地地力调查和采样点数据,结合Arc GIS技术对余杭区37 772.3 hm2耕地地力进行评价与等级划分。研究结果表明,余杭区耕地质量整体较好,一到五级田所占比例分别为1.0%,39.6%,44.1%,13.1%,2.2%。一级田和二级田主要分布在平原区和沿河谷地,三级田和四级田主要分布在平原区向山区过渡的低山丘陵区,质量较差的五级田主要分布在西北部和西南部的山区。余杭区低山丘陵地带的土壤养分差异较大,平原地带的各项养分含量变异较小;全区耕地土壤全氮和有机质含量较为丰富,有效磷相对缺乏,速效钾含量变化较为平稳。

关键词: 耕地地力 等级划分 土壤养分

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水稻OsWRKY7基因的表达研究

中国水稻科学 2015 北大核心 CSCD

摘要:WRKY蛋白是植物中一类重要的转录因子,不仅参与植物生长发育的调控,还参与植物对各种生物和非生物胁迫的响应。本研究从水稻日本晴中分离OsWRKY7基因的编码序列(CDS),并克隆其启动子序列进行表达研究。首先通过实时定量PCR的方法检测不同组织中OsWRKY7基因的相对表达量,结果表明,OsWRKY7在叶片中的表达水平较高,且开花期的剑叶中表达量高于7d苗龄的幼叶。进一步将OsWRKY7启动子与GUS报告基因融合,构建了植物表达载体pOsWRKY7-GUS,并将此载体转化日本晴。转基因植株不同组织染色分析结果显示,该启动子在植株的主根尖、叶片、颖壳中有GUS活性,其中叶片上可见全叶范围分布的大量蓝色斑点,这些染色结果与实时定量PCR的结果一致。进一步的接菌和激素处理还显示,OsWRKY7启动子在根和叶中的表达均受水稻白叶枯病菌[Xanthomonas oryzae pv.Oryzae(Xoo)]P10生理小种侵染的诱导,同时还受外源施加的细胞分裂素和生长素诱导,而水杨酸则会抑制其在根和叶中的表达。此外,我们还将OsWRKY7基因的CDS序列分别与绿色荧光蛋白和酵母GAL4的DNA结合域融合,对该基因进行水稻茎原生质体亚细胞定位分析和酵母自激活检验,结果显示该基因定位于细胞核中并具有转录自激活活性。上述结果表明OsWRKY7具有明显的转录激活因子特征,其很可能参与了水稻对白叶枯菌的防御反应以及对多种激素信号的转导过程。

关键词: OsWRKY7基因 启动子 表达特性 亚细胞定位 转录活性

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桑树绿枝扦插繁殖过程中ABI4和PIN1基因的表达变化及与生根性能的相关性

蚕业科学 2015 北大核心 CSCD

摘要:脱落酸非敏感型转录因子ABI4、生长素运输载体蛋白PIN1分别通过调控脱落酸和生长素的运输而影响植物不定根的发育与生长。以经生根粉诱导处理和未经诱导处理的桑树绿枝插穗为材料,用实时荧光定量PCR、Western blot技术检测插穗生根发育过程中基部皮层ABI4和PIN1基因的转录与蛋白质表达水平变化。当插穗出现不定根时,ABI4的转录与表达水平急剧下调,PIN1的转录水平急剧上调,而后在新生根伸长期二者均有所回复;生根剂诱导处理插穗后加大了其基部皮层ABI4的转录与表达下调幅度和PIN1的转录上调幅度,且PIN1在新生根伸长期持续高表达。ABI4的转录水平与不同桑品种生根率之间均呈显著的负相关关系(γ=-0.915),与生根数量没有相关性;而PIN1的转录水平与生根率和生根数量均呈显著的正相关关系(γ=0.880,γ=0.982)。农桑14号和强桑1号等是绿枝生根率高的桑品种,其插穗不定根出现时基部皮层ABI4的转录、表达下调幅度和PIN1的转录上调幅度大于大10等生根率低的桑品种,提示易生根品种的插穗在不定根出现时期ABI4的低水平和PIN1的高表达会更利于插穗根原基的形成、分化及新生根的生长。

关键词: 桑树 扦插 脱落酸非敏感型转录因子 生长素运输载体蛋白 表达水平 生根性能

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杂交粳稻春优84机插制种技术

杂交水稻 2015 北大核心 CSCD

摘要:根据单季杂交粳稻春优84(春江16A/C84)的父母本特征特性和在浙江湖州地区的机插制种实践,总结了该组合机插制种技术。

关键词: 杂交粳稻 春优84 制种技术

浙江省高产水稻叶片形态研究

浙江农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:测量浙江省粳稻区试所用的12个水稻品系叶片指标,发现水稻株高非常接近,茎叶夹角相似,对照品种杂交籼稻与这12个品种差异较大。采用二次函数建立模型,拟合归一化的叶片形态,建立水稻叶片器官库。归一化处理后品种间叶片大小以及形状表现出一致的规律性,叶位越高,最大宽越偏向于基部,叶位越低,越远离基部。所选13个品种的叶型系数可以统一设置为0.73,但是品种之间和同一品种内部不同位置的叶片叶型系数差异极显著,统计分析表明,同一品种不同位置的叶片叶型系数差异(P=1.95e-11)大于不同品种同一位置的叶型系数(P=4.89e-3),表明目前育种上水稻形态有趋同的趋势。

关键词: 水稻育种 叶片形态 二次函数模型 叶型系数

茄科作物WRKY转录因子全基因组鉴定、进化及功能

分子植物育种 2015 北大核心 CSCD

摘要:WRKY转录因子是存在于高等植物基因组内最重要的转录因子基因家族之一,在植物生长发育、应对生物胁迫(病菌和病毒等)和非生物胁迫(冷害、热害、高盐及干旱等)等一系列生物学进程中发挥重要作用。本文对茄科蔬菜作物(番茄、马铃薯、茄子和辣椒)WRKY转录因子的相关研究进行了综述。在全基因组水平上,分析了WRKY转录因子的数量、分类、基因表达模式以及功能等特征,为未来解析茄科作物WRKY转录因子的分布特征、进化关系以及功能奠定基础。

关键词: 茄科植物 WRKY转录因子 进化 功能

大白菜抽薹性状相关SSR分子标记的筛选

分子植物育种 2015 北大核心 CSCD

摘要:耐抽薹大白菜(Brassica rapa L.ssp.pekinensis)新品种选育一直是大白菜育种的一个重要课题。本研究采用耐抽薹性状差异较大的大白菜亲本早抽薹材料‘26’和晚抽薹材料‘502’配制杂交组合,选取62对简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)引物,根据集团分离分析法(bulked segregant analysis,BSA),进行大白菜晚抽薹性状基因相连锁的分子标记研究。结果得到了2个在早抽薹基因池中扩增出特征带的SSR标记Na12-E02和BRMS-026,经F2单株验证发现仅BRMS-026与大白菜早抽薹基因紧密连锁,根据Kosambi函数估算其连锁距离为7.2 cM,表明可利用分子标记BRMS-026辅助选育大白菜耐抽薹品种。本研究结果可为最终形成可供育种实践应用的分子标记辅助育种体系和大白菜晚抽薹品种的选育提供理论依据。

关键词: 大白菜 抽薹 SSR标记

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胡柚果肉组分的降糖作用及其降糖成分分布研究

营养学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:目的研究胡柚果肉不同极性组分单独和相互对3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖的影响,并测定已知具有降血糖功效的成分在这些组分中的分布。方法将胡柚果肉乙醇提取物(EE)分成极性大小依次增加的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水5个组分,测定其加入1 mg/L EE(EE1)前后3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的消耗量;并测定黄酮、类胡萝卜素、柠檬苦素、诺米林、橙皮苷和柚皮苷等成分在这些组分中含量。结果胡柚果肉中各组分均可促进3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗;在加入EE1后,二氯甲烷组分和正丁醇组分与其联合作用效应与它们和EE1单独作用效应之和相比,促进3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖的量基本相同,而石油醚组分(20 mg/L、30 mg/L)、乙酸乙酯组分(20 mg/L、30 mg/L)和水组分(20 mg/L、30 mg/L)与其联合作用效应与它们和EE1单独作用效应之和相比,显著抑制3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖(P<0.01);具有降血糖功效的黄酮类化合物主要分布在乙酸乙酯组分中,柚皮苷和橙皮苷含量较高,柠檬苦素类化合物主要存在于二氯甲烷组分中,含有柠檬苦素和诺米林,类胡萝卜素主要存在于石油醚组分中。结论胡柚果肉石油醚组分、乙酸乙酯组分和水组分中的某些物质会对3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖发生拮抗作用。

关键词: 胡柚 不同极性5个组分 乙醇提取物 3T3-L1脂肪细胞

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