科研产出
飞蝗几丁质酶5-1抗体制备及表达特性分析
《中国农业科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过制备飞蝗(Locusta migratoria)几丁质酶5-1(LmCht5-1)的多克隆抗体,建立飞蝗体内LmCht5-1蛋白水平检测方法,分析LmCht5-1在4龄飞蝗的表达特性及组织定位。【方法】采用MEGA软件对LmCht5-1和LmCht5-2氨基酸序列进行比对,利用Expression网站对LmCht5-1氨基酸序列进行抗原表位预测分析,获得LmCht5-1抗原结构区域;以飞蝗c DNA为模板,通过PCR扩增LmCht5-1的抗原片段;同时通过酶切连接构建含有鸡血清白蛋白OVA的载体p ET32a-OVA;然后通过酶切连接将LmCht5-1插入到p ET32a-OVA载体构建p ET32a-OVA-LmCht5-1;将p ET32a-OVA-LmCht5-1转入表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达重组蛋白OVA-LmCht5-1;利用Ni-NTA纯化后免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体。通过ELISA方法检测抗体效价;利用Western blot检测抗体特异性。提取4龄飞蝗不同日龄表皮,采用Western blot分析LmCht5-1蛋白表达模式。对4龄飞蝗注射ds LmCht5-1,检测蛋白水平LmCht5-1表达量,并通过免疫组化方法对LmCht5-1进行定位及功能分析。【结果】通过LmCht5-1和LmCht5-2序列比对和抗原表位预测分析,获得LmCht5-1的471—533AA可作为抗原区域;通过酶切连接分别获得p ET32a-OVA和p ET32a-OVA-LmCht5-1。经诱导表达和纯化后获得重组蛋白OVA-LmCht5-1,分子量为71.34 k D;免疫后制备多克隆抗体OVA-LmCht5-1,ELISA检测效价为1﹕102 400。多克隆抗体OVA-LmCht5-1用于Western blot检测时可特异性识别LmCht5-1,与LmCht5-2蛋白无交叉反应。利用Western blot方法检测4龄若虫各日龄表皮中LmCht5-1蛋白的表达,发现LmCht5-1蛋白随发育日龄其表达量逐渐增加,在蜕皮当天达到峰值,蜕皮后快速降至最低点。对飞蝗若虫N4D2注射ds LmCht5-1,检测到在N4D5时,LmCht5-1的转录水平和蛋白水平均被显著抑制,抑制率分别为70.0%和73.6%。选取注射ds LmCht5-1和ds GFP的4龄飞蝗表皮,进行免疫组化实验显示LmCht5-1定位于表皮细胞和旧表皮中,其功能失活引起旧表皮中几丁质不降解。【结论】获得飞蝗LmCht5-1多克隆抗体可特异性识别LmCht5-1,可用于Western blot和免疫组化检测。明确LmCht5-1在飞蝗4龄若虫蜕皮当天表达最高,定位于表皮细胞和旧表皮中。ds LmCht5-1可减少表皮细胞和旧表皮中LmCht5-1的表达,阻碍旧表皮中几丁质的降解。
关键词： 飞蝗 几丁质酶5-1 抗体制备 表达分析 Western blot
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山西省食用型杂交向日葵栽培技术
《现代农业科技 》 2018
摘要：总结了山西省食用型杂交向日葵栽培技术,包括品种选择、种植地块选择、播种、田间管理、病虫害防治等方面内容,以期为当地种植户提供参考。
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晋西沿黄枣区新引入制干品种的试验研究
《西北林学院学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为改变晋西沿黄枣区制干枣品种单一、品质较差的状况,筛选出适宜该枣区栽培的优良制干枣品种,以引入到该枣区的12个制干枣品种为研究对象,对各品种的主要物候特性、树体生长结果表现、单株产量、抗裂性、抗缩果病性和果实品质进行了观测分析。结果表明,临黄1号、圆铃枣、相枣、赞皇大枣、陕北长枣、方木枣和木枣抗裂1号等7个品种能较好地适应该枣区的气候和土壤条件,丰产性较好,制干品质优良,并且具有较强的抗裂性和抗缩果病性,与该枣区主栽品种中阳木枣和保德油枣相比,具有明显的综合优势,可以作为替代品种进行栽培推广。
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一种新型肥料在谷子生产中的应用
《山西农业科学 》 2018
摘要：为研究新型复合肥对谷子生长与产量的影响,于2017年在山西省东南部地区进行田间试验.结果表明,新型复合肥处理下谷子的株高、穗质量、穗长、穗粗、千粒质量、单穗粒质量、产量均上升,公顷产量为4 890 kg,与对照相比增产幅度达21%.说明新型配比化肥对谷子生长和产量有利,具有广阔的应用前景.
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农业科技人才队伍建设研究
《山西农经 》 2018
摘要：对于农业科技而言,人才是体现其科技力量的重要载体,同时也是其实现创新发展的根本保障。针对农业科技方面的人才队伍建设进行研究,分析该领域当前的人才队伍建设情况,并探讨加强农业科技人才队伍建设的具体措施,希望能够对相关工作有一定的促进作用。
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