科研产出
木瓜蛋白酶水解对豆乳中抗原蛋白含量和亚基构成的影响
《食品工业科技 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：采用木瓜蛋白酶水解传统生浆工艺制备的豆乳,用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定酶解残余物中抗原蛋白含量,用SDS-PAGE分析其蛋白分子亚基组成,并通过正交实验优化了木瓜蛋白酶的水解条件。结果表明,当保持豆乳自然p H(6.5~6.8)、酶浓度3500 U/m L、水解温度53℃、水解时间15 min时,β-伴球蛋白的α'、α亚基被完全水解,大豆球蛋白的酸性多肽链基本消失,碱性多肽链含量明显减少,同时产生了大量14 k Da以下组分,此时β-伴球蛋白残留率为56.6%。
关键词： 豆乳 抗原蛋白 木瓜蛋白酶 水解 蛋白质亚基 抗原性
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分散固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定土壤中噻唑磷残留
《农药 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立土壤中噻唑磷的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)进行残留测定。[方法]土壤样品采用乙腈提取和PSA+C_(18)分散固相萃取,采用UPLC-MS/MS多反应模式(MRM)进行分析测定。[结果]噻唑磷添加水平在0.1~10μg范围内,平均回收率为94.3%~107.5%,相对标准偏差为7.9%~11.0%。采用外标法定量,方法的检出限为0.001 mg/L,定量限为0.005 mg/kg。[结论]该方法简单、准确、重复性较好且节省溶剂,适用于土壤环境中噻唑磷的残留检测。
关键词： 噻唑磷 土壤 分散固相萃取 超高效液相色谱串联质谱法 残留
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热带海岸典型森林类型土壤有机碳储量和碳氮垂直分布特征
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：热带海岸森林是重要的碳库,很容易受到人类活动的干扰,包括森林砍伐和气候变化。因此,迫切需要探明森林土壤有机碳储量,为热带海岸森林的保护和恢复提供理论依据。以热带海岸4种典型森林类型为研究对象,研究土壤中有机碳和全氮垂直分布特征及其与其他土壤理化性状关系。结果表明:不同林型土壤有机碳和全氮在土壤剖面中的垂直变化规律一致,表层含量较高,随着剖面深度增加含量逐渐降低,且不同土壤层次间呈现显著性差异。不同森林类型土壤有机碳和全氮含量平均值分别为1.35~7.06、0.08~0.61 g/kg,其中椰子人工林的土壤有机碳和全氮含量平均值最高,分别为7.06、0.61 g/kg,其次是香蒲桃天然次生林(6.07、0.44 g/kg)。各森林类型土壤碳氮比平均值依次为大叶相思人工林﹥木麻黄人工林﹥香蒲桃天然次生林﹥椰子人工林。各森林类型0~100 cm土层土壤有机碳储量从大到小依次为椰子人工林、香蒲桃天然次生林、大叶相思人工林和木麻黄人工林。相关分析结果表明,各个森林类型土壤有机碳与土壤容重呈显著负相关,与全氮呈显著正相关。说明椰子人工林和香蒲桃天然次生林森林生态系统达到平衡稳定状态,其碳汇效益较木麻黄人工林和大叶相思人工林显著,对热带海岸森林生态系统健康的经营与维护具有重要意义。
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金刚砂辅助农杆菌转化狗尾草种子高效遗传转化体系的建立
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：狗尾草(Setaria viridis)是研究C4植物光合作用的优秀模型,同时也是研究非生物胁迫耐受性和生物能源原料的模型。经济、简单、灵活、快速、高效的转基因技术是模式植物应用发展的基础,本研究直接以狗尾草成熟种子为外植体,经过种子活化、金刚砂辅助农杆菌转化、抗性愈伤或丛生芽诱导、成苗、生根等基本过程,建立了一套新的狗尾草组织培养农杆菌转化技术,是国内外直接利用狗尾草活化种子进行农杆菌转化的初次报道。新的转化技术转化周期缩短为9~10周,转化效率A10达19.2%,ME34达22.2%,该方法对狗尾草品系的依赖性小,更适于难以利用已有方法建立转化体系的品系或野生种的转化。
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香蕉MaASR1基因通过ABA途径提高拟南芥抗旱性的作用机制
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：香蕉MaASR1基因在植物响应逆境胁迫时发挥着重要作用,为了进一步研究MaASR1基因转入拟南芥后增强其抗旱性的分子机制,运用DNA芯片技术来筛选野生型的拟南芥和转MaASR1基因的拟南芥在不做任何处理和干旱胁迫处理条件下的差异基因。对基因芯片中与ABA途径相关的上调和下调大于2倍的差异基因进行了荧光定量PCR的验证,实验结果发现在以上两种处理条件下,转MaASR1基因的拟南芥体内ABA的生物合成量比野生型拟南芥低,而ABA的降解量却升高。当受到干旱胁迫时,转基因拟南芥体内ABI5和ABF1基因的表达量会得到提高,而ABI5基因可以赋予转基因拟南芥株系耐旱性和抗旱性的功能是因为LEA类的蛋白被其调控表达和提高了ABA诱导基因的表达水平。ABF1基因发挥其提高转基因株系抗旱性的功能则可以通过参与ABA信号途径以及与其它的ABI类基因共同作用来实现。除此之外转基因拟南芥株系抗旱性的提高,与CBL/CIPK复合物参与的胁迫应答途径无关。以上结果为解析MaASR1基因作为转录因子通过ABA途径提高植物抗旱能力的分子机制奠定基础。
关键词： MaASR1基因 基因芯片 干旱胁迫 脱落酸 实时荧光定量PCR
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巴西橡胶树α-微管蛋白HbTUA2基因的克隆、表达及生物信息学分析
《植物生理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：微管蛋白是微管的重要组成部分,参与维持细胞骨架的稳定及延伸。本研究采用RT-PCR和RACE技术从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中克隆到一个α-微管蛋白基因,命名为Hb TUA2(Gen Bank登录号:KX809698)。该基因c DNA全长1 940bp,其中开放阅读框1 353 bp,编码含450个氨基酸残基的蛋白质序列。Hb TUA2与其他植物TUA蛋白高度同源,具有TUA蛋白家族保守的GTP结合位点和转录后调控片段。基因结构分析表明,Hb TUA2具有4个外显子和3个内含子,内含子外显子剪切符合"GT-AG"规则。荧光定量PCR分析表明,Hb TUA2在巴西橡胶树叶片、雌花、雄花、茎尖、树皮及胶乳等组织中均有表达,在雌花中表达量最高,其次是茎尖和雄花,在叶片、树皮和胶乳中表达量较低。此外,Hb TUA2的表达还受高盐、干旱、低温、过氧化氢(H_2O_2)、乙烯利和茉莉酸甲酯(Me JA)调控,表明Hb TUA2可能参与巴西橡胶树乙烯和茉莉酸信号途径及逆境胁迫应答过程。
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秋季珠江口外海海域的生态环境特征
《海洋环境科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：于2015年9月(秋季)对珠江口外海海域不同深度水体中的营养盐、溶解氧(DO)和叶绿素a(Chl a)进行了调查,通过分析它们的空间分布特征及相互关系对珠江口外海海域的生态环境进行了研究。调查期间,营养盐、DO和Chl a的浓度和分布情况表明珠江口外海海域的生态环境总体较好,该区域的近岸受一定程度的陆源影响。在垂直分布上,珠江口外海海域水体的温度和盐度层化明显,导致营养盐、DO和Chl a的垂直分布均出现明显的差异。珠江口外海海域浅层水体(约小于50 m)的营养盐由于受浮游植物光合作用的影响而具有较低的浓度,深层水体(约大于50 m)的营养盐由于受有机物氧化分解的影响而具有较高的浓度。基于营养盐浓度和比值初步判断调查区域的营养盐限制情况,发现珠江口外海海域大部分浅层水体的营养盐可能同时存在氮限制和磷限制。综合分析营养盐、DO和Chl a之间的关系,发现2015年秋季珠江口外海海域的水体整体上处于异化作用占主导的阶段。
关键词： 珠江口外海海域 营养盐 DO 叶绿素a 生态环境特征
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香蕉花芽分化期抗枯萎病相关基因表达分析
《生物技术通报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过对‘巴西蕉’和‘宝岛蕉’花芽分化期响应枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)侵染的转录组进行分析,获得了大量差异表达基因。本研究以‘巴西蕉’和‘宝岛蕉’花芽分化期根部组织为材料,采用实时荧光定量PCR(q PCR)方法测定了10个与特定抗病机制相关基因的表达变化。结果表明,10个基因在‘巴西蕉’和‘宝岛蕉’花芽分化过程中均有表达,但其表达量存在差异。与对照‘巴西蕉’相比,除laccase-4(A)基因在‘宝岛蕉’中的表达量明显下调外,laccase-4(B)、periplasmic beta-glucosidase precursor、glutathione-S-transferase Cla47、class Ⅲ peroxidase 136 precursor、peroxidase N、similar to T-phylloplanin、snakin-1、putative chitinase及cellulose synthase catalytic subunit 12等9个基因的表达量均上调,其中peroxidase N基因的表达量呈极显著上调,相对表达量约为‘巴西蕉’的1 682倍。10个差异表达基因可能参与‘宝岛蕉’花芽分化期对病原菌的防卫反应,为进一步探讨‘宝岛蕉‘复杂的抗病防御反应分子机理奠定基础。
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菠萝蜜果实中糖分积累特征及相关代谢酶活性分析
《果树学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究菠萝蜜果实中的糖分组成及含量积累特征。【方法】以菠萝蜜品种‘马来西亚1号’为材料,利用高效液相色谱法分析不同发育时期果肉中蔗糖、果糖和葡萄糖含量,应用分光光度计法检测淀粉含量及相关代谢酶活性。【结果】菠萝蜜成熟果实中蔗糖含量最高,超过总糖含量的70%,主要在果实采后成熟期积累。果糖和葡萄糖含量接近,各占总糖的15%左右。淀粉是菠萝蜜果实中重要的非结构性碳水化合物,在果实成熟采摘前积累、后熟期间降解。蔗糖酸性转化酶(AI)为主要的蔗糖水解酶,与蔗糖含量呈显著负相关(相关系数为-0.602*)。蔗糖合成酶(SUSY)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)在后熟阶段活性最高,与蔗糖含量呈显著正相关(相关系数分别为0.915**、0.997**),参与蔗糖的合成。腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)在果实发育中期活性最高,与淀粉含量呈显著正相关(相关系数为0.900*)。α-淀粉酶在后熟阶段活力最高。【结论】蔗糖是‘马来西亚1号’菠萝蜜果肉的主要糖分,蔗糖的积累与AI活性呈显著负相关,与SUSY、SPS活性呈显著正相关,主要在后熟期积累。淀粉是菠萝蜜果实发育的主要非结构性碳水化合物。淀粉的积累与AGPase活性呈显著正相关,在果实成熟前合成、后熟期间降解。
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巴西橡胶Pto类抗病同源序列的克隆与系统发育重建（英文）
《广西植物 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：番茄Pto基因是一类可以编码丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)序列的广谱抗性候选基因,其序列克隆与鉴定为深入了解番茄的抗病机制奠定了基础。在该研究中,一对依据Pto基因的保守序列设计的简并引物被用来扩增巴西橡胶中Pto基因抗病同源序列,扩增得到了一个约550 bp的基因片段,其随后被克隆并测序。序列分析发现,其中的7个抗病同源序列与Pto基因高度同源(BLASTX E value<3e-53),所以其被认为是Pto基因抗病同源序列(Pto-RGCs)。通过巴西橡胶的Pto-RGCs多序列比对表明,这些序列包含了多个STKs保守的次级结构域。此外,系统发育分析也表明,巴西橡胶的Pto-RGCs属于Pto基因同源的R基因。该研究结果中Pto-RGCs可为巴西橡胶抗病的发展提供一个有效的基因资源。
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