利用ELISA与qRT-PCR技术检测番木瓜PRSV病毒的方法研究

谢秀菊; 夏启玉; 霍姗姗; 杜晓希; 麦贤俊; 张雨良; 郭安平; 李峰; 孔祥义; 赵辉; 《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus, PRSV）是番木瓜生产上最严重的病害之一，其发病率高，传播快，危害重。为及时发现感染PRSV的番木瓜植株，本研究建立了分别利用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术和荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)技术检测番木瓜植株感染PRSV的方法，利用这2种方法检测多株转基因番木瓜与非转基因番木瓜的PRSV含量，并对结果进行比较分析。结果表明：利用PRSV多肽抗原作为标准品制备的抗体建立的标准曲线拟合度较好，可用于ELISA法检测PRSV;qRT-PCR法中选择的内参基因Cpa03g018830在番木瓜的不同生长阶段均稳定表达，可作为PRSV含量测定的内参基因；ELISA法和qRT-PCR法对多株转基因和非转基因番木瓜植株中PRSV含量的检测结果基本一致，表明这2种方法均可用于番木瓜植株中PRSV含量的检测。利用这2种检测手段，可及时发现并铲除感染了PRSV的番木瓜植株，有效预防与控制PRSV传播。

关键词： 番木瓜环斑病毒 酶联免疫吸附 荧光定量逆转录PCR

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3种凝胶结构对天然橡胶塑炼特性的影响

谷丰收; 张福全; 林宏图; 王兵兵; 李高荣; 廖建和; 廖禄生; 《高分子材料科学与工程 》 2024 EI 北大核心 CSCD

摘要：天然橡胶（NR）加工过程中的熟化作用及后续的贮存硬化会导致橡胶烃分子链端基或异常基团与非胶组分形成交联结构产生凝胶。按照凝胶产生的3个主要阶段，可以将凝胶分为胶乳熟化凝胶、凝块熟化凝胶和贮存硬化凝胶，分别制备了含胶乳熟化凝胶的生胶（NR-L）、含凝块熟化凝胶的生胶（NR-C）和含贮存硬化凝胶的生胶（NR-S），研究了凝胶结构的形成方式与NR性能之间的联系。塑炼特性结果表明，门尼黏度和凝胶含量在塑炼时间2 min内快速下降，但NR-L的下降速率要明显慢于NR-C和NR-S，塑炼结束后也保持了更高的门尼黏度值和凝胶含量，说明凝胶网络结构的强度不同，NR-L的网络结构强度更高；氮含量方面，NR-L最高，NR-C最低，酯基含量方面，NR-L最高，NR-S最低。温度扫描应力松弛试验结果表明，NR-L的网络结构主要是由磷脂为枝化点的天然网络组成，NR-S的网络结构主要由以蛋白质为枝化点的天然网络组成。同时，以磷脂作为枝化点的天然网络强度高于以蛋白质作为枝化点的天然网络。

关键词： 天然橡胶 凝胶结构 天然网络 塑炼特性

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侵染海南樱桃番茄的病毒种类鉴定

车海彦; 裴月令; 孙燕芳; 陈园; 罗大全; 龙海波; 《植物病理学报 》 2024 北大核心 CSCD

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橡胶树HbLPAT2基因的克隆与表达分析

王晓琳; 曲鹏; 甘明洋; 仇键; 范睿深; 《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：溶血磷酸酰基转移酶（lysophosphatidyl acyltransferase,LPAT）是控制溶血磷脂酸生成磷脂酸的关键酶，在植物磷脂合成中发挥重要作用。橡胶树（Hevea brasiliensis）是生产天然橡胶的重要来源，其在国防、医疗、高端制品等领域具有不可替代的作用，具有很高的社会价值和经济价值。本研究采用分子生物学技术在橡胶树胶乳中成功克隆出2个Hb LPAT基因家族中负责磷脂合成的关键基因，分别命名为Hb LPAT2a和Hb LPAT2b，其编码序列全长分别为1161 bp和939 bp，分别编码了386个和312个氨基酸。Hb LPAT2a和Hb LPAT2b均含有1个PLN02380的溶血磷脂酸酰基转移酶功能结构域和高度保守的NH（X）₄D基序。Hb LPAT2a有3个跨膜结构域，Hb LPAT2b有1个跨膜结构域，二者均无信号肽，为亲水性蛋白，且含有多个磷酸化位点。亚细胞定位分析表明，Hb LPAT2a和Hb LPAT2b蛋白均定位于内质网上。不同组织部位表达分析表明，Hb LPAT2a和Hb LPAT2b基因均在橡胶树种子中的表达量最高，推测其具有脂质合成功能，而在胶乳中，Hb LPAT2a和Hb LPAT2b的表达量在Hb LPAT基因家族中位居前2位。本研究结果有助于了解Hb LPAT2a和Hb LPAT2b在橡胶树胶乳磷脂合成过程中的功能，为后期橡胶树胶乳品质的遗传改良提供科学依据。

关键词： 橡胶树 HbLPAT2 生物信息学分析 表达分析

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As和Ni超标矿山土壤对不同桑树品种生长及根际微生物多样性的影响

吴春标; 谢云会; 耿涛; 武华周; 娄德钊; 王树昌; 卢芙萍; 《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：闭库尾矿库土壤生态修复及土地再生利用，不仅避免了随意排放风险，还能增加土地使用面积。桑树根系旺盛，抗逆性强，生物量大，用途广泛，在矿山重金属超标土壤修复和再利用中具有巨大潜力。本研究采用原土盆栽法比较3个桑树品种（Y120、G12和G62）一年生幼苗在矿区砷（As）和镍（Ni）复合污染土壤中种植60 d后的生长情况，以及桑树不同部位对As和Ni的富集差异，同时采用宏基因组分析桑树根际土壤微生物的差异，初步阐明不同桑树品种对As和Ni复合污染矿山土壤的适应能力及与其根际土壤微生物多样性间的关系。结果表明：种植60d后，3个桑树品种根际土壤Ni的污染指数均从种植前的中度降为轻度，G62根际土壤As的污染指数则从重度污染降为中度污染。3个桑树品种的地上部分和根系生长部分均受到抑制，但G62的生长总体优于Y120和G12,G12生长较差。3个桑树品种对As的转运系数和富集系数均小于Ni，对As的富集能力为根>叶>茎，根部积累As的量占植株总量的47.33%～50.52%，品种间差异较小，但对Ni的富集能力则在不同品种间存在差异，G12、G62、Y120根部Ni积累量占植株总量依次为25.67%、38.46%和47.14%，品种间差异较大。生长较好的G62根际土壤中Nocardioides、Thiomonas和Rhizobium 3个属的丰富度显著高于G12和Y120，其中Thiomonas sp.在G62中丰富度最高，结合G62根际土壤As的污染指数下降较多的事实，说明这些属和种可能更多地参与桑树根际对As的阻隔吸收或解毒。Sphingopyxissp.在G12中丰富度最高，该品种在体内转移和富集的As和Ni均最低，可能与其更多地参与桑树对As和Ni复合污染的解毒有关。研究结果为筛选出适宜矿区生长的抗复合重金属的桑树品种及可促进桑树在As和Ni复合污染矿山土壤生长的菌株筛选和利用奠定基础。

关键词： 桑树 As Ni 复合污染 富集 生长 根际土壤微生物 品种筛选

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橡胶树HbTRXh5基因在酵母中的表达及抗逆性分析

吴双; 逯锐琳; 冯成天; 袁坤; 王真辉; 刘进平; 刘辉; 《生物技术通报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：【目的】克隆橡胶树硫氧还蛋白基因HbTRXh5，分析其表达特性，探究其在非生物胁迫中的功能，为橡胶树抗逆性遗传改良提供基因资源。【方法】采用RT-PCR方法克隆橡胶树HbTRXh5基因，利用生物信息学方法分析其序列特性和系统进化关系。采用实时荧光定量PCR分析HbTRXh5基因在橡胶树各组织以及非生物胁迫下的表达。构建HbTRXh5基因酵母表达载体并转入酵母，比较转基因酵母和对照酵母在低温、盐和氧化胁迫处理后的存活差异。【结果】HbTRXh5基因编码区长354 bp，编码117个氨基酸。HbTRXh5含有硫氧还蛋白保守结构域和CGPC活性位点，属于h型硫氧还蛋白第I亚组。HbTRXh5在橡胶树各组织中均有表达，以胶乳中的表达量最高。低温、盐以及H₂O₂和甲基紫精诱导的氧化胁迫处理均能诱导HbTRXh5的表达。成功将HbTRXh5基因转入酿酒酵母INVSc1菌株中并诱导表达。同转pYES2空载体对照酵母相比，转HbTRXh5基因酵母在H₂O₂处理后具有更高的存活率。相反，在低温和盐胁迫处理后，转HbTRXh5基因酵母的存活率较对照酵母明显降低。【结论】橡胶树HbTRXh5的表达受低温、盐和氧化胁迫调控，酵母中表达HbTRXh5提高了重组酵母对氧化胁迫的抗性，但降低了对低温和盐胁迫的抗性。

关键词： 橡胶树 硫氧还蛋白 酵母表达系统 非生物胁迫 氧化胁迫 抗寒性

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不同脱叶剂对长江流域夏播短季栽培棉花脱叶催熟效果及产量和品质的影响

谢章书; 谢学方; 李侃; 周仲华; 屠小菊; 刘爱玉; 《南方农业学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：[目的]研究棉花在夏播短季栽培模式下对不同脱叶催熟剂的响应,为筛选适宜长江流域棉花栽培的脱叶催熟剂提供理论依据.[方法]以成品脱叶剂欣噻利(50%噻苯隆·乙烯利)为对照(CK),以乙烯利和助剂为通用组分,分别配以98%噻苯隆、98%噻苯隆+50%敌草隆、98%磷酸二氢钾、10%脱落酸制成4种脱叶剂配方(对应标记为S、D、L和T处理),测定不同脱叶剂处理棉株的脱叶率、吐絮率、产量相关性状及棉花纤维品质指标,并通过相关分析和主成分分析比较不同脱叶剂处理对棉花脱叶催熟效果及产量和品质的影响.[结果]随着脱叶剂喷施后时间的推移,棉花脱叶率和吐絮率均呈上升趋势.其中第10 d以CK的脱叶率最高(96.57%),D处理次之(95.76%),L处理的脱叶率显著低于其他处理(P<0.05,下同);吐絮率也呈相似趋势,以CK最高,D处理次之,L和T处理显著低于其他处理.在棉花产量方面,以D处理最高,S处理、CK和T处理次之,L处理最低;后期(8月30日)开花的棉铃产量性状表现也以D处理最优.纤维品质中,各处理对整齐度指数、马克隆值和伸长率无显著影响(P>0.05);上半部平均长度以CK最优、D处理次之;断裂比强度以D处理最高;后期(8月30日)开花的棉铃也同样以CK和D处理的纤维品质最优.相关分析和主成分分析结果表明,D和S处理及CK的脱叶及催熟效果较好,且均能不同程度提高棉花产量,改善棉花纤维品质.[结论]不同脱叶剂以噻苯隆+敌草隆、噻苯隆和欣噻利效果较优,可在长江流域湖南地区夏播短季栽培模式下棉花生产种植中应用.

关键词： 棉花 夏播短季栽培 脱叶剂 催熟脱叶 产量 品质 湖南

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木薯MePCS1基因的克隆、表达分析及功能验证

梁宝娟; 葛玉建; 侯静怡; 张慧敏; 任治欣; 耿梦婷; 王亚杰; 郭建春; 姚远; 《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：植物络合素合酶（PCS）是催化植物络合素（PC）合成的关键酶，PC可通过络合作用减轻重金属对植物的毒害。土壤重金属污染增加木薯食用安全风险，对木薯络合素合酶基因MePCS1进行功能分析，对木薯重金属减控研究具有重要意义。本研究通过PCR技术克隆了SC8木薯品种的MePCS1基因的编码区，全长为1512bp，共编码503个氨基酸。蛋白序列分析表明：MePCS1蛋白为亲水性蛋白，含有41个磷酸化位点和2个糖基化位点，不含有信号肽。构建系统进化树发现，木薯MePCS1蛋白与橡胶树的PCS蛋白亲缘关系最近。利用qPCR技术分析表明，MePCS1基因在茎中表达量最高；在木薯块根发育过程中，MePCS1基因在块根膨大期的表达量最高；铅（Pb）胁迫诱导MePCS1基因表达。MePCS1基因能提高BY4741酵母对Pb的耐受能力。本研究结果为进一步解析MePCS1基因功能特性及其对木薯的Pb减控机制提供新的信息。

关键词： 植物络合素合酶 重金属Pb胁迫 酵母表达

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中国畜禽产业发展态势及竞争力研究

赵军明; 张慧坚; 胡盛红; 王成丽; 金琰; 荣光; 《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：随着全球区域贸易协定的不断深化,畜禽产品的国际竞争加剧.深刻认识中国畜牧业面临的新形势、新挑战,采取有效的对应措施,对于提高中国畜禽产品的竞争力、促进农业农村经济发展,具有重要意义.本文通过研究中国畜禽产业发展态势和区际竞争力,找出影响中国畜禽产品竞争力的影响因素,提出提升中国畜禽产品国际竞争力的对策建议,以便更好地应对《区域全面经济伙伴关系》(RCEP)、《全面与进步跨太平洋伙伴关系协定》(CPTPP)等新的国际经贸规则对中国畜禽产业发展带来的影响.

关键词： 畜禽产品 发展态势 竞争力 对策建议

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不同耐裂性小型西瓜果实力学特性与果皮结构研究

王现丽; 党选民; 贺滉; 詹园凤; 《种子 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为揭示小型西瓜果实力学特性及果皮组织结构与耐裂性的关系,以耐裂性不同的8份西瓜种质和1份由易裂亲本201609019与耐裂亲本S1-1111配制的杂交F1代为材料,采用质构仪分析其果实硬度、果实裂应力及果皮韧性,利用石蜡切片法观察其果皮组织结构.结果表明,易裂与耐裂西瓜果实力学特性和果皮组织结构差异显著,耐裂果的西瓜果实硬度、裂应力及果皮韧性更大,果皮细胞排列更加紧密,表皮细胞长厚比值小,外果皮厚,并具有条带状石细胞层.相关性分析表明,果实力学特性与石细胞厚度呈极显著正相关,与外果皮厚度呈显著正相关,与表皮细胞长厚比呈显著负相关.201609019×S1-1111遗传耐裂亲本具有石细胞结构,果实硬度与耐裂亲本差异不显著,裂应力和韧性介于两亲本之间,外果皮厚度变大.201609019和049-2虽果实硬度相近,但果实裂应力、果皮韧性及果皮结构差异明显,耐裂性也不同.评价西瓜果实耐裂性应综合考虑果实硬度、果实裂应力及皮韧性,果实的耐裂性差异是果皮的各层结构综合作用的结果,在西瓜品种选育中可以通过杂交的方式将耐裂性状渗入来改善品种的耐裂性.

关键词： 小型西瓜 果实力学特性 果皮结构 耐裂性

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