科研产出
表达猪源流感病毒HA基因重组伪狂犬病毒的构建
《中国人兽共患病学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的Vero细胞,使其在Vero细胞内与PRV基因组发生同源重组。运用RT-PCR、间接免疫荧光等方法检测外源基因重组情况及其在Vero细胞内的表达,并通过Western-blot对表达产物进行免疫原性鉴定。结果实验结果显示,外源基因HA已重组入PRV基因组,并在Vero细胞中有效表达,且所表达蛋白具有免疫原性。结论HA基因重组PRV的构建成功为SIVHA基因重组PRV活载体疫苗的研究奠定了初步基础。
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2008年度广东省花生产业发展现状分析
《广东农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：花生是广东省第二大栽培作物和最主要的油料作物。据广东省年鉴数据显示:2007年全省花生播种面积为30.25万hm2,约占全省农作物播种面积的13%;总产量76.66万t。目前大面积推广的品种有适于水旱轮作、高产抗病品种汕油523、粤油223、汕油71、粤油256和粤油116;适于旱地,高抗青枯病的品种有粤油92和粤油200等。相对其他花生主产区,广东省花生产业在油用和食品加工方面组织化程度都较低,亟需加强。广东花生产业的科技水平进一步提高,花生新品种选育和推广工作得到有效落实,全省花生产业朝向科技化方面发展。
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恶臭假单胞菌XP12对拟除虫菊酯类农药的酶促降解特性及其应用研究
《广东农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：试验选用使用量较大、毒性较强、不易自然降解的高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和高效氯氟氰菊酯作为参试农药,对一株能高效降解拟除虫菊酯类农药的恶臭假单胞菌XP12进行深入的研究,以期了解该菌株在拟除虫菊酯类农药的生物降解体系中酶的分布特征、酶促降解的动力学特征。结果表明:对拟除虫菊酯类农药起催化作用的酶属于组成型胞内酶,反应pH值为6.5～8.0时,降解酶对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的降解率都在70%左右,最适反应pH值为7.5;反应温度在25～40℃时,降解率在70%以上,最适反应温度为30℃。在最适反应pH和温度条件下,降解酶粗酶液对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的Km分别为42.78、50.64和77.90 nmol/mL,Vmax分别为12.05、10.31和16.39 nmol/min。粗酶液在叶类蔬菜上拟除虫菊酯类农药的降解也有明显效果,对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的降解率分别为93.3%、85.2%、83.5%。
关键词： 恶臭假单胞菌XP12 拟除虫菊酯类农药 降解酶 酶促降解
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普通野生稻(Oryza rufipogon)内生固氮菌多样性及高固氮酶活性
《科学通报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：从广东博罗、惠来和海南陵水县普通野生稻中分离到37株内生固氮菌,并测定其固氮酶活性.经固氮酶基因(nifH)的PCR扩增检测,37株内生固氮菌均能扩增出固氮酶基因(nifH)片段.在80%相似性水平上,IS-PCR指纹图谱聚类分析得到8个类群(Ⅰ～Ⅷ).SDS-PAGE全细胞蛋白电泳聚类分析与IS-PCR的聚类结果相似.对各类群相应代表菌株(Ls13,Ls8,BL1,BL12,HL6,Ls4)进行脂肪酸含量和成分比较,结果表明,这些菌株的脂肪酸成分和含量具有较大的差异.16SrDNA序列分析表明,类群Ⅰ～Ⅶ的菌株均属于肠杆菌科(γ-变形菌纲),其中类群Ⅰ和Ⅱ的菌株属于克雷伯氏菌属不同种群;类群Ⅲ菌株Ls8与成团泛菌(Pantoea agglomerans)的相似性为96%,可能代表该属内的一个新种或一个新属;类群Ⅳ和类群Ⅴ的菌株代表肠杆菌属的不同种群;类群Ⅵ菌株Ls4和Ls9与无丙二酸柠檬酸杆菌(Citrobacter amalonaticus)有98%的相似性;类群Ⅶ菌株Ls15与成团泛菌关系最近,有97%相似性,属于泛菌属;类群Ⅷ属于Ideonella属(β-变形菌纲).这些表明普通野生稻内生固氮菌具有较大的多样性,且部分菌株具高固氮酶活性,达42.52μmol C2H4·mL-1·h-1.水稻接种实验表明内生固氮菌能明显促进水稻生长.
关键词： 普通野生稻 内生固氮菌 多样性 固氮酶活性 聚类分析
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广东主要叶菜类蔬菜安全生产技术规程
《广东农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为达到叶菜类蔬菜安全生产相关标准的要求,满足消费者需要,保证叶菜类蔬菜产品安全和促进农业的可持续发展,对广东主要叶菜类蔬菜生产的环境清洁、肥水管理、病虫害防治、产地质量安全检测体系进行了要求和规范,为叶菜类蔬菜安全生产提供理论依据。
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猪链球菌扁桃体分离株的毒力因子分布特征与致病性
《中国预防兽医学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：本研究设计并合成7对引物,用PCR方法对猪链球菌7种主要毒力因子,包括谷氨酸脱氢酶(gdh)、溶血素(sly)、胞外蛋白因子(ef)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fpbs)、三磷酸甘油醛脱氢酶(gadph)和毒力相关序列orf2进行检测,分析了29株猪链球菌扁桃体分离株的毒力因子分布特征。在被检的25株2型菌株中,共检测出7个基因型。其中10株(40%)的基因型为cps2/gdh+/sly+/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,7株(28%)表现为cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,4株(16%)表现为cps2/gdh+/sly-/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,基因型表现为cps2/gdh+/sly+/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2-、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp+/fbps+/gadph+/orf2-、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp*/fbps+/gadph+/orf2+、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp-/fbps-/gadph+/orf2-各1株;1株猪链球菌7型(SS7)分离株,基因型表现为cps7/gdh+/sly+/ef-/mrp-/fbps+/gadph+/orf2+;3株猪链球菌9型(SS9)扁桃体分离株,均表现为cps9/gdh+/sly-/ef-/mrp-/fbps+/gadph+/orf2+。可见我国SS分离株的毒力基因分布较为复杂,而且SS2的优势流行菌株是同时具有多种毒力因子的高致病菌株。通过对不同毒力基因型毒株对西藏小型猪的感染试验发现:毒力基因型为cps2/gdh+/sly-/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+的健康扁桃体分离株SH06-21D对西藏小型猪有较强的致病性,仅次于标准株HA9801,而基因型为sly-/ef-/mrp-/fbps-/gadph+/orf2-的健康扁桃体分离株GZ06-122B对西藏小型猪不表现明显的致病性。
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西花蓟马的危害及生物防治研究进展
《广东农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：综述了西花蓟马的危害状况及其生物防治研究进展,概括了国内外对西花蓟马起主要控制作用的天敌种类,论述了西花蓟马的捕食性天敌、虫生真菌和病原线虫等的研究和利用,并讨论了今后西花蓟马可持续控制中生物防治的发展趋势,为西花蓟马的有效、可持续防控提供重要的参考。
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茶树黄酮合成酶Ⅱ基因全长cDNA序列的克隆和实时荧光定量PCR检测
《茶叶科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：利用RT-PCR和RACE技术,克隆得到茶叶中合成黄酮类化合物的关键酶基因—黄酮合成酶Ⅱ,该基因属于细胞色素P450家族,在GenBank登录号为FJ169499。黄酮合成酶ⅡcDNA全长序列1824bp,其中1605bp为编码区,编码534个氨基酸,分子量为60.4kD。通过SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测,发现黄酮合成酶Ⅱ在茶树一芽二叶春梢、当季成熟叶、花瓣、花蕊、种子中都有表达,成熟叶的表达量显著高于其他四种组织。
关键词： 茶树 黄酮合成酶Ⅱ 实时荧光PCR 细胞色素P450家族
新型无机铜基杀菌剂王铜的研制与开发
《华南农业大学学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：以氯化铜和硫酸铜为主要原料,通过化学方法合成王铜.利用X射线衍射仪对有效成分进行了确证.根据试样悬浮性和稳定性优化了助剂配方,制备了300 g/L王铜悬浮剂,提出了制备方法,生产工艺及质量控制指标.对300 g/L王铜悬浮剂有效成分含量、悬浮率、pH、筛析及贮存稳定性等性能指标及毒性、残留、对环境安全性评价与药效试验等进行了试验分析,结果表明,该配方产品悬浮率达95%以上,pH5.5~6.8,冷、热贮稳定,各项指标符合悬浮剂的要求.产品低毒、低残留,对非靶标生物安全,对柑橘溃疡病有较好的防治效果.该杀菌剂不诱发红蜘蛛大猖獗,病菌不易产生抗药性,使用方便,是传统杀菌剂"波尔多液"的理想替代品.
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丁草胺和毒死蜱复合污染对稻田土壤细菌群落多样性的影响
《农业环境科学学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：采用PCR-RFLP法研究了丁草胺和毒死蜱复合污染对土壤细菌多样性的影响。应用试剂盒提取土壤样品总DNA,以细菌的16SrDNA通用引物27F/1492R扩增16SrDNA片段,将扩增产物与T-载体酶连,转化大肠杆菌,建立16SrDNA克隆文库。阳性克隆子用限制性内切酶HhaI-RsaI消化,获得酶切指纹图。结果表明,通过双酶切分型,对照产生带型最多,有70种类型,其余处理OTU种类均比对照有所减少,分别减少了10、30和41种。在不同处理中其多样性存在差异。对照土壤环境中细菌种类最丰富,多样性最高,且基因型中无明显的优势类群,说明农药的外源喷施会引起土壤细菌多样性降低。处理Ⅲ的Shannon-Wiener指数、Simpson指数和丰富度都低于单一农药的处理,而均匀度非常高,说明这2种农药的复合施用对一些细菌的丧失会起协同作用,造成某些土壤细菌的富集。
关键词： 丁草胺 毒死蜱 复合污染 细菌多样性 16SrDNA RFLP
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