猪血小板源生长因子受体α基因(PDGFRα)cDNA克隆与表达分析

滕菲; 《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：血小板源生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor,PDGFRα)是酪氨酸蛋白激酶受体家族成员之一,在脂代谢中具有潜在的调控作用。本实验旨在克隆猪(Sus scrofa)PDGFRα基因的c DNA全长并分析其组织表达谱。根据Gen Bank上已登录的人(Homo sapiens)、牛(Bos taurus)和小鼠(Mus musculus)等物种的PDGFRα基因保守序列设计引物,利用反转录PCR和RACE技术,克隆得到猪PDGFRα基因的c DNA序列(Gen Bank登录号:KP329568)。测序结果分析表明,猪PDGFRα基因c DNA长度为6 360 bp,其中开放阅读框(open reading frame,ORF)为3 270 bp,3'非翻译区(untranslated regions,UTR)为2 964 bp,5'UTR为126 bp,共编码1 089个氨基酸。该基因在基因组中大约横跨148 Mb,包含23个外显子和22个内含子。序列同源性分析表明,猪PDGFRα基因的核苷酸和氨基酸序列与人、牛、绵羊(Ovis aries)、小鼠的相似性较高。蛋白质结构预测发现,PDGFRα蛋白具有2个跨膜螺旋,10个N-连接糖基化修饰位点,75个磷酸化修饰位点以及1个信号肽结构,且N端存在较强的疏水区域,C端则表现出较强的亲水性。实时荧光定量PCR(quantitative Real-time,q RT-PCR)分析表明,该基因在杜洛克猪的心、肝、脾、肺、肾、小肠和骨骼肌等脏器均有表达,其中在脾脏中表达量最高,肾脏、肺脏次之。该基因在不同部位骨骼肌(比目鱼肌、冈上肌、股二头肌、腰小肌、腓肠肌和眼肌)中表达分析显示,在以比目鱼肌为代表的慢肌中表达量要极显著高于在以眼肌为代表的快肌中的表达量(P<0.01)。比较不同生长阶段PDGFRα基因的表达发现,初生阶段表达量极显著高于断奶和成年阶段(P<0.01)。本研究获得猪PDGFRα基因c DNA全长、组织表达规律以及在不同肌肉组织中的相对表达量,为进一步研究猪PDGFRα基因的功能提供了基础资料。

关键词： 猪 血小板源生长因子受体α基因(PDGFRα) 基因克隆 组织表达

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乐清市杨梅凋萎病调查及其防控对策

方海涛; 梁森苗; 《浙江柑橘 》 2015

摘要：杨梅为我国南方特色水果,浙江最具特色的优势农产品,适宜山地栽培,是集食用、观赏、药用于一身的生态经济型树种,深受生产者和消费者喜爱。但2004年以来,在浙江省瑞安、黄岩、仙居、乐清等杨梅产区首先发现一种突发性枝叶凋萎的新型病害,并有逐年加重之势,发病树体可在2~3年内枯死。2012-2014年组织人员先后对乐清市淡溪、芙蓉岭底、清江、大荆湖雾、雁荡、白石、乐成等镇街道10余

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牛樟芝人工培养及活性成分与药理作用的研究进展

蔡为明; 金群力; 蔡青松; 陈景荣; 《食药用菌 》 2015

摘要：牛樟芝(Antrodia cinnamomea)是一种珍贵的药用菌,野生牛樟芝仅生于台湾特有树种牛樟树干腐朽心材内壁。通过查阅国内外46篇相关文献,择要综述牛樟芝的形态特征与分类命名、人工培养、主要生物活性成分、药理作用等方面的研究现状,并展望未来研究方向与发展前景。

关键词： 牛樟芝 人工培养 活性成分 功效

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香根草提取物对二化螟生长发育及体内保护酶活力的影响

高广春; 李军; 郑许松; 徐红星; 杨亚军; 田俊策; 吕仲贤; 《科技通报 》 2015 北大核心

摘要：将香根草地上部分不同极性溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水)的提取物加入到人工饲料中喂食二化螟幼虫,进行了提取物对二化螟初孵幼虫的毒杀作用、三龄幼虫的生长发育抑制作用及其体内保护酶(POD,SOD和CAT)活性影响的测定分析。结果表明,不同溶剂的提取物(0.01 g/m L)对二化螟幼虫均有毒杀作用,其作用大小排序为石油醚>乙酸乙酯>正丁醇>水,其中石油醚提取物处理3 d后二化螟初孵幼虫存活率为15.8%,5 d后存活率为0.8%。三龄幼虫取食添加了不同提取物(0.05 g/ml)的人工饲料7 d后,生长发育均得到明显抑制,以石油醚和乙酸乙酯提取物作用最强,生长发育抑制率分别达111.11%和109.50%;同时,三龄幼虫体内的SOD活力明显高于对照,CAT和POD活力明显低于对照,其中石油醚和乙酸乙酯提取物和对照差异均达显著水平。研究表明香根草中含对二化螟幼虫有毒杀和生长发育抑制作用的活性物质,以石油醚和乙酸乙酯提取物中最为丰富。香根草提取物扰乱了二化螟幼虫体内保护酶SOD、CAT和POD的动态平衡,使虫体内自由基的清除遇到障碍,从而对其产生毒害作用。

关键词： 香根草 提取物 二化螟 生长发育 保护酶

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班氏跳小蜂对毒死蜱和吡虫啉的敏感性及解毒酶活性的变化

杜亮; 黄芳; 王飞飞; 吕要斌; 《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：采用喷雾法和浸叶法测定毒死蜱、吡虫啉对班氏跳小蜂(Aenasius bambawalei Hayat)成蜂的毒力,并用喷雾法测定毒死蜱、吡虫啉对扶桑绵粉蚧体内班氏跳小蜂的发育、寄生率和相关解毒酶的活性。结果表明,毒死蜱喷药和浸叶处理的LC50分别为2.595和0.112μg·L-1,吡虫啉喷药和浸叶处理的LC50分别为0.115和0.234 mg·L-1,毒死蜱对班氏跳小蜂的杀伤力较吡虫啉强;2种药剂处理下,班氏跳小蜂的雄、雌蜂的后足胫节长度与对照组差异不显著,对扶桑绵粉蚧的寄生率与对照组差异显著;毒死蜱对班氏跳小蜂体内乙酰胆碱酯酶的抑制率为76.4%,吡虫啉对班氏跳小蜂体内羧酸酯酶、多功能氧化酶的抑制率分别为85.3%和32.2%。

关键词： 班氏跳小蜂 毒死蜱 吡虫啉 敏感性 解毒酶活性

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省力化栽培葡萄品种新雅及其规范化栽培技术研究

吴江; 程建徽; 魏灵珠; 简小楠; 童洪升; 《河北林业科技 》 2015

摘要：通过对引进的新雅、新郁、SP577、SP528、早黑宝、早康宝、夏至红、京蜜等8个葡萄品种的物候期、生长结果习性、果实经济性状、抗性等观察比较,引选出了较适宜浙江省力化栽培的葡萄新品种"新雅",并总结了该品种的配套栽培技术。

关键词： 葡萄 省力化 引选 筛选 栽培技术

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生物炭替代泥炭栽培基质对铁皮石斛生长的影响

陈庆飞; 石岩; 刘玉学; 吕豪豪; 张俊林; 王耀锋; 杨生茂; 《中国农学通报 》 2015 CSCD

摘要：为提高农林废弃物的再利用率,缓解泥炭资源消耗问题,以竹条炭化制备的生物炭部分替代泥炭为栽培基质,进行基质泥炭替代试验。采用完全随机区组设计,以松树皮+泥炭基质作为对照组,以分别添加3%、6%和10%的竹炭(即部分替代泥炭)作为试验组,研究不同栽培基质配比对铁皮石斛生长的影响。结果表明:3%与6%的生物炭替代量没有显著影响铁皮石斛产量、株高、茎粗、节间距、叶长、叶宽、根数和根长。然而,10%的生物炭替代量在铁皮石斛株高、节间距、节数、叶数方面显著降低。另外,6%的生物炭替代量在萌芽数较对照组提高24.13%,但其移栽成活率最低。从短期来看,3%的生物炭替代泥炭可作为铁皮石斛的新基质,可为生物炭在作物栽培方面的合理利用提供参考,而长期的效果需要进一步研究。

关键词： 铁皮石斛 生物炭 基质 替代 泥炭

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利用HPLC法检测活性肽HMG-CoA还原酶抑制剂活性

王伟; 李官平; 张玉; 杨玉英; 张一帆; 邬应龙; 《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：通过检测反应体系中NADPH的浓度变化,建立了一套测定HMG-Co A还原酶抑制剂活性的HPLC法。以SymmetryC18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm)进行分离,流动相为:V(K2HPO4-KH2PO4)∶V(甲醇)=85∶15,p H 7.2,流速1 m L·min-1;检测波长337 nm,进样量20μL,柱温25℃。在此条件下,NADPH的线性范围为0.6~600μmol·L-1,加标回收率为94.48%~101.81%,相对标准偏差(n=5)小于4.49%,最低检出限为0.01μmol·L-1。用此方法对蚕蛹蛋白肽的HMG-Co A还原酶抑制剂活性进行了测定,在酶解肽浓度为0.5mg·m L-1时,其抑制率为28.70%。

关键词： 降血脂肽 HMG-Co A还原酶 NADPH 液相色谱

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酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)和刺鼠信号蛋白(ASIP)基因对白绒乌骨鸡黑色素沉积的遗传效应

郑嫩珠; 李丽; 辛清武; 缪中纬; 朱志明; 陈黎; 刘凤辉; 吴剑飞; 黄勤楼; 《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：为研究白绒乌骨鸡(Gallus gallus domesticus Brisson)黑色素沉积分子机制,本研究采用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)的2-ΔΔCt检测酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein,ASIP)和小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因在乌骨鸡皮肤、肌肉、肝脏、肾脏和肌胃的表达情况,采用紫外分光光度法测定不同组织黑色素含量,探索3个基因在不同组织中m RNA表达量与黑色素沉积之间的关系。结果表明,TYR、MITF和ASIP在所有组织中均有表达,且各基因m RNA相对表达量在各组织间差异极显著(P<0.01),其中MITF和TYR m RNA表达量依次为皮肤>肾脏>肌胃>肝脏>肌肉,与乌骨鸡各组织黑色素沉积规律基本一致;ASIP基因表达量则与其相反,表现为肌肉>肝脏>肌胃>肾脏>皮肤。相关性分析表明,TYR和MITF基因在各个组织中的表达量与其黑色素含量呈显著正相关(P<0.05),ASIP基因表达量与其呈显著负相关(P<0.05)。由此提示,TYR、MITF和ASIP与白绒乌骨鸡黑色素沉积均具有一定的相关性,其中TYR和MITF基因的高表达可能促进乌骨鸡黑色素沉积,ASIP则相反。本研究为进一步阐明黑色素沉积的遗传调控机制提供了理论基础。

关键词： 白绒乌骨鸡 黑色素沉积 实时荧光定量PCR(q RT-PCR) 酪氨酸酶(TYR) 刺鼠信号蛋白(ASIP) 小眼畸形相关转录因子(MITF)

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红掌两个bZIPs基因片段的克隆与低温响应特性分析

彭英; 杜凤凤; 田丹青; 潘晓韵; 刘晓静; 《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：本研究以红掌‘Alabama’幼苗为材料,克隆了2个b ZIP转录因子基因Aab ZIP1和Aab ZIP2。Aab ZIP1片段长度462 bp,Aab ZIP2片段长度为369 bp,两基因核苷酸序列的相似度为46.97%,推定的氨基酸序列相似性为31.17%。Blastx发现两个基因均具有亮氨酸拉链的保守结构域,具备b ZIP转录因子家族的基本特征。RT-PCR分析检测表明,低温处理后,Aab ZIP1基因为组成型表达,不响应低温胁迫;Aab ZIP2基因表达受低温诱导,其表达强度随着低温处理时间的延长而增强,Aab ZIP2可能在红掌的低温胁迫响应过程中起重要作用。

关键词： 红掌 bZIP 亮氨酸拉链 低温 克隆

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