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SIRT7对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂和乳糖合成关键基因表达的调控

南京农业大学学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:[目的]本试验旨在探讨去乙酰化蛋白7(sirtuin 7,SIRT7)对奶牛乳腺上皮细胞(DCMEC)合成乳蛋白、乳脂和乳糖关键基因表达的影响.[方法]以体外原代培养的中国荷斯坦奶牛DCMEC为试验材料,纯化后转染质粒p CDNA3.1-SIRT7,继续培养48或72 h后收集细胞.采用RT-qPCR和Western blot法检测乳蛋白、乳脂和乳糖合成关键基因mRNA和蛋白的表达;通过特异性试剂盒检测胞内和培养基中甘油三脂(TG)含量.[结果]1)乳蛋白:与对照组相比,过表达SIRT7可显著提高αs1-酪蛋白基因(CSN1S1)、β-酪蛋白基因(CSN2)和ETS转录因子基因(ELF5) mRNA水平,促进CSN2蛋白合成,激活雷帕霉素靶蛋白(m TOR)磷酸化; 2)乳脂:与对照组相比,过表达SIRT7可显著提高乳脂合成关键因子过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1) mRNA和蛋白水平,显著增加细胞内甘油三酯(TG)含量; 3)乳糖:与对照组相比,过表达SIRT7可显著提高乳糖合成关键因子葡萄糖转运蛋白1(GLUT1) mRNA表达.[结论]在体外培养条件下,过表达SIRT7可促进DCMEC中乳蛋白、乳脂和乳糖合成关键基因的表达.

关键词: 奶牛乳腺上皮细胞 去乙酰化蛋白7 乳蛋白 乳脂 乳糖

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不同垫料管理装置对养殖垫料发酵及鸡舍内氨气浓度的影响

畜牧与饲料科学 2019

摘要:为解决中小型养鸡场存在的粪污影响鸡只健康和污染环境问题,考查了经2种不同可移动式发酵床垫料翻耙装置处理后的垫料发酵温度及垫料理化性质的差异,并研究了2种不同装置的应用对鸡舍内氨气浓度的影响。结果显示:在连续20 d的观察期内,经装置DP2016180处理的发酵床温度在每天的6:00、14:00、19:00均极显著(P<0.01)高于经装置DC2016180处理的发酵床温度;经2种不同垫料装置处理后的垫料总氮、总钾、总磷、pH值、C∶N均无显著性差异(P>0.05);应用装置DC2016180和DP2016180进行垫料处理的鸡舍,二者的氨气浓度在第6、8、10、12、16、18、20、22、24 h有极显著差异(P<0.01),在第14 h有显著差异(P<0.05),在第2、4 h无显著性差异(P>0.05)。研究结果可为提高养殖垫料管理装置的科学应用水平提供技术支持。

关键词: 鸡舍 垫料管理装置 发酵温度 理化性质 氨气

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魏晋时期的墅与新时期田园综合体-浅析休闲农业的古今变迁

安徽农业科学 2019

摘要:田园综合体是休闲农业的新型业态之一,是中央在新形势下对农业农村发展提出的重大政策创新,是促进农村发展历史性转变的一项新举措.从历史的角度追根溯源,魏晋时期(尤其是东晋时期)在我国江南地区形成的墅,可被认为是"古代田园综合体"的最早实践.该研究从社会背景、经营范围、管理方式等方面介绍魏晋时期的江南庄园,总结了当代田园综合体与墅在形式和功能上的相似处,并分析了其具有的时代先进性.同时,从生产、生活和生态3方面对墅进行研究,通过借鉴古人营造庄园的智慧,结合当今田园综合体的成功案例,探讨千年之前的庄园如何与时代结合焕发出新的生命力,为新时期休闲农业的发展提供宝贵启示.

关键词: 休闲农业 田园综合体 魏晋 庄园

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犬干扰素α2与犬白蛋白融合基因在昆虫细胞中的表达与活性分析

畜牧兽医学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:本研究旨在利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达具有生物活性的犬白蛋白-犬干扰素α2(albumin-CaIFN-α2).将蜂素信号肽(HBM)、犬血清白蛋白(Alb)与犬干扰素α2的融合基因经密码子优化后,连接至转移载体pFastBac1中,获得了重组pFastBac1-HBM-Alb-CaIFN-α2,将重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,经过三次蓝白斑筛选纯化,得到的重组穿梭质粒rBac-HBM-Alb-CaIFN-α2转染Sf9细胞,72 h后可观察到明显的细胞病变.用第三代重组杆状病毒rBac-HBM-Alb-CaIFN-α2感染Sf9昆虫细胞,感染3 d后,收获昆虫细胞和细胞培养物,间接免疫荧光(IFA)结果显示,重组杆状病毒感染的细胞呈现绿色荧光;Western blot检测结果显示,在约90 ku左右可观察到特异性条带,证实重组Alb-CaIFN-α2能够在昆虫细胞中表达.利用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组Alb-CaIFN-α2的抗病毒活性,结果显示重组Alb-CaIFN-α2的活性为1.70*106 U·mL-1,为进一步研究新型犬用干扰素制品奠定了试验基础.

关键词: 犬干扰素α2 犬血清白蛋白 昆虫细胞表达 抗病毒活性

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甲基磺酸乙酯诱变筛选强耐盐旱柳愈伤组织变异体研究

江苏农业科学 2019 北大核心

摘要:为获得强耐盐旱柳愈伤组织突变体,采用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理旱柳愈伤组织,对得到的旱柳愈伤组织变异体进行耐盐性检验.结果 表明,0.4% EMS处理3h为旱柳愈伤组织的半致死处理方式;愈伤组织存活率和生长率会随盐浓度的升高而降低,NaCl为0.4%时,愈伤组织的死亡率为93.6%;对筛选出的愈伤组织突变体进行盐胁迫形态与生理指标检验,诱变组SOD活性、POD活性、积累可溶性蛋白的能力比对照组高,而MDA含量始终低于对照组.旱柳愈伤组织突变体在0.4% NaCl胁迫下可正常生长,而原亲本只能耐受0.2%盐浓度,诱变体比原亲本耐盐性提高了100%.

关键词: 甲基磺酸乙酯(EMS) 旱柳 强耐盐性 愈伤组织 变异体

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两步超滤法纯化抗黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的研究

粮食与食品工业 2019

摘要:以提高溶液中抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体纯度为目的,采用来自小鼠腹水、经辛酸-饱和硫酸铵法提取的粗品单抗溶液为原料,通过单因次和响应面优化试验,建立了两步超滤法的纯化工艺。第一次超滤采用200 kD截留分子量的超滤膜。第二次超滤采用50 kD截留分子量的超滤膜,超滤温度25℃、超滤压力0.12 MPa、浓缩倍数6倍。取两步超滤的中间截留液,单抗纯度可达80.5%,而提取率仅下降8.7%。纯化工艺对单抗效价没有影响,基本脱除了溶液中的硫酸铵。该工艺可用于大规模制备高质量的抗AFB1单克隆抗体。

关键词: 黄曲霉毒素 单克隆抗体 超滤 纯化

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施氮对设施栽培金针菜产量、品质和钾吸收利用的影响

植物营养与肥料学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:[目的]明确施氮对设施栽培金针菜产量、品质和钾吸收利用的影响,为设施栽培金针菜的养分管理提供理论依据。[方法]以金针菜'大乌嘴'为试验材料,于2015—2017年在江苏省宿迁市丁嘴镇江苏省农业科学院金针菜试验基地进行了田间试验。设5个施氮量处理(N0、50、100、150和200 kg/hm~2,以N0、N50、N100、N150、N200表示)。在返青期、抽薹期和现蕾期采样分析了金针菜产量、品质和钾的吸收利用。[结果]增施氮肥提高了金针菜不同生育阶段的钾吸收量,以抽薹到现蕾期钾吸收量增量最大。与N0相比,N50、N100、N150和N200处理下的钾吸收量分别增加21.0%、67.6%、86.0%和103.8%,处理间差异达到显著水平。施氮改变了不同生育时段的钾吸收比例,使返青到抽薹期的钾吸收比例降低,抽薹到现蕾期的钾吸收比例升高,其中N200处理下效果最显著。增施氮肥降低了现蕾期生育后期钾浓度的下降速率,其中,N0、N50、N100、N150和N200处理下表示钾浓度降低趋势的b值分别为0.0051、0.0048、0.0045、0.0044和0.0042。随施氮量增加,钾吸收的边际效应呈先升高后降低趋势,而钾的生产效率呈直线降低趋势。N100、N150处理的金针菜积累的干物质和钾量在花蕾中的分配比例较高,钾浓度和钾累积量动态特征参数比较协调,利于产量形成,且Vc、氨基酸、可溶性糖、黄酮和多酚含量相对较高;N200kg/hm~2处理导致金针菜产量增幅下降,氮素钾吸收边际效应和钾的生产效率降低,但秋水仙碱含量最高;低于N 100 kg/hm~2时,干物质和钾的总吸收量及经济系数较低,不利于高产形成。[结论]供试条件下,施用氮肥N 100~150 kg/hm~2可减缓金针菜生育期后期钾吸收的下降,提高钾吸收边际效应、钾的生产效率和金针菜的品质。

关键词: 金针菜 施氮量 产量 品质 钾吸收利用

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正交试验法优化加杨树皮中白杨素的纯化工艺

中国野生植物资源 2019 CSCD

摘要:以白杨素纯度为指标,采用L_(9 )(3~4)正交试验法,考察聚酰胺柱层析的洗脱溶剂、上样浓度、上样量及流速对杨树皮中白杨素纯度的影响,优化聚酰胺纯化工艺。最佳工艺条件为:以60-80目的聚酰胺装柱,以60%乙醇为流动相,上样浓度为稀释3倍的经石油醚冷浸脱脂后的杨树皮总酚酸流浸膏,上样量与聚酰胺柱的体积比为1∶2,吸附流速20 ml/min,洗脱流速为80 ml/min。收集60%乙醇溶液洗脱部位,经重结晶可得白杨素粗品。该纯化工艺简单、合理,是杨树皮中白杨素的最佳纯化工艺。

关键词: 加拿大杨 白杨素 聚酰胺柱层析 正交试验法 高效液相色谱法

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颈静脉灌注精氨酸对奶牛血液生化指标及必需氨基酸含量的影响

中国畜牧杂志 2019 北大核心

摘要:试验旨在研究颈静脉灌注精氨酸(Arg)对奶牛血常规指标、血清生化指标及必需氨基酸含量的影响.选用6头体重、胎次、泌乳期、泌乳量和体况等基本一致的荷斯坦奶牛,采用3×3复拉丁方设计,随机分为3组,即对照组(灌注酪蛋白模式的氨基酸混合物)、Arg灌注组(灌注37.66 g/d)和等氮丙氨酸组(灌注77.24 g/d),进行7d灌注期+15 d间隔期的颈静脉灌注试验.结果 表明:与对照组和等氮丙氨酸组相比,Arg灌注组可降低白细胞计数(P<0.01),而对其他血常规指标无显著影响;等氮丙氨酸组高密度脂蛋白水平高于对照组(P<0.05);低密度脂蛋白以Arg灌注组最高,但3组间差异不显著;与对照组和等氮丙氨酸组相比,Arg灌注组血浆中Arg含量提高(P<0.05),但其他8种必需氨基酸和总必需氨基酸含量未见显著差异.由此可见,颈静脉灌注Arg对泌乳奶牛脂质代谢有一定的调控作用,对血常规指标和必需氨基酸含量的影响不大.

关键词: 颈静脉灌注 精氨酸 血液生化 必需氨基酸 奶牛

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苏州市"互联网+"现代农业发展现状与建议

中国农业信息 2019

摘要:[目的]梳理苏州市"互联网+"现代农业的发展特征,旨在为区域"互联网+"现代农业发展提供理论支撑,并为我国农业现代化发展提供借鉴.[方法]文章阐述了"互联网+"现代农业提出的背景,详细分析了苏州市"互联网+"现代农业的发展现状、优势,剖析了存在的问题,并有针对性地提出了相关发展建议.[结果 /结论]苏州市积极推进互联网与现代农业深度融合,在基地建设、物联网应用、人才培养等方面取得较大进展,是我国经济发达地区互联网与现代农业相结合的典型,但仍需在现有水平上强化建设,在农业信息化基础建设、区域同步发展、推进示范推广、物联网示范基地升级、补齐人才短板等方面下功夫,逐步形成农业产业发展新驱动的关键路径.

关键词: 互联网+ 农业现代化 物联网 电子商务 破解路径

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