H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白(NP)基因的进化及原核表达

邬成业; 王爱萍; 郝慧芳; 史平玲; 游雷鸣; 李培培; 张改平; 《华北农学报 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：参考GenBank上H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计引物,PCR扩增NP基因,对其进行序列分析并构建分子进化树。将克隆的NP基因插入原核表达载体pET32a,在大肠杆菌中进行诱导表达,对诱导表达的NP重组蛋白进行纯化、Western-Blot鉴定及免疫原性分析。结果表明,克隆的NP基因与GenBank上发表的另外2个河南AIV毒株亲缘关系较近,诱导表达的NP重组蛋白主要以可溶性形式存在,分子量约为70 kDa,并且能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。

关键词： 禽流感病毒 H5亚型 核衣壳蛋白(NP) 原核表达

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一例猪瘟与猪链球菌混合感染的诊治

张立宪; 王克领; 郎利敏; 张青娴; 游一; 《上海畜牧兽医通讯 》 2010

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缓/控释肥的研究应用现状及展望

张德奇; 季书勤; 王汉芳; 李向东; 郭瑞; 吕凤荣; 《耕作与栽培 》 2010

摘要：简要概述了缓/控释肥的发展概况及其必要性,重点分析了缓/控释肥对作物生长、产量、品质以及土壤状况的影响,并就目前缓/控释肥存在的问题进行了探讨,最后对缓/控释肥的研究做了展望。

关键词： 缓/控释肥 前氮后移 肥料利用率

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有关电子俘获检测器污染后的判定、清洗及维修案例分析

李业东; 《现代科学仪器 》 2010

摘要：电子俘获是气相色谱分析中常用的的检测器(ECD)。它最易出现的问题就是受污染,轻则灵敏度降低,重则没有响应。处于对放射源的恐惧,人们往往敬而远之,不知该如何处理。所以,了解污染源、判定污染程度、掌握有效的清洗方法,这对用好仪器有着很大的帮助。通过一个故障实例的分析,更清晰的展示了整个维修过程。包括防止污染的办法、判断污染的步骤、清洗管路的连接、操作中的注意事项和技巧等。

关键词： 电子俘获检测器 63Ni放射源 污染 清洗 基频 分子筛 脱氧管

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西瓜产量与叶面积指数的相关性分析

徐小利; 赵卫星; 常高正; 李晓慧; 杨帆; 张四普; 《河南农业科学 》 2010 北大核心

摘要：对西瓜叶面积与叶长×叶宽,叶面积指数与产量的相关性进行了研究。结果表明:西瓜叶面积与叶长×叶宽存在显著的正相关,相关系数为0.982 5。西瓜的产量与叶面积指数在一定范围内紧密相关,当叶面积指数为2.53时,产量达到最大值。

关键词： 西瓜 叶面积指数 产量

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RothC模型模拟华北潮土区的土壤有机碳动态

王金州; 卢昌艾; 张金涛; 单鹤翔; 张文菊; 黄绍敏; 徐明岗; 《中国土壤与肥料 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：运用RothC(Version 26.3)模型,模拟研究华北地区典型潮土长期定位施肥试验小麦-玉米轮作下土壤有机碳(SOC)含量的变化。本研究选取潮土区较为常见的6个典型施肥处理:不施肥(CK)、单施氮肥(N)、氮磷配施(NP)、氮磷钾配施(NPK)、氮磷钾配施有机肥(NPKM)和氮磷钾配施秸秆(NPKS),对耕层土壤SOC的模拟值与实际测定值进行了比较。除NPKS处理外,其余各处理模型模拟值与实测值之间吻合较好。将NPKS处理植物碳DPM/RPM由1.44调至3.35后,模拟效果明显改善。RothC模型可用来模拟和预测不同施肥措施下潮土SOC变化趋势,但在大量秸秆还田时需调整部分模型参数。

关键词： RothC模型 潮土 土壤有机碳 模型模拟

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小麦Mlo基因的克隆及白粉病菌诱导下的表达模式分析

徐红明; 刘红彦; 王俊美; 田保明; 王鹏涛; 《麦类作物学报 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：为了研究Mlo基因在感、抗小麦品种中的表达情况,根据小麦基因芯片的Mlo探针序列,利用电子克隆与RT-PCR方法在感病小麦品种豫麦13和抗病品种红蚰麦中分别克隆到Mlo基因的同源序列。两条核苷酸序列全长均为1 605 bp,都含有一个完整的ORF(Open reading frame)。核苷酸序列分析显示二者的DNA序列只有一个核苷酸的差异,与大麦Mlo的相似性均为90%。编码的氨基酸序列包含有7个跨膜结构域,前18个氨基酸是信号肽序列,第414~435位是编码蛋白的活性中心,第451、459、462、475、483位点上有糖基化位点,细胞定位分析将其定位在膜上。从头建模分析构建的二者三维结构有明显差异。利用定量PCR对该基因在白粉菌诱导早期的表达模式进行分析,结果两基因的表达都受白粉菌的诱导,但在红蚰麦中的表达高峰出现在18 h,豫麦13中的表达高峰出现在72 h,表达时间的差异可能决定了两者对白粉菌的不同抗性反应。

关键词： 小麦 Mlo 电子克隆 表达模式

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规模化猪场传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

徐引弟; 王治方; 朱文豪; 梁跃; 郭成留; 《畜牧与兽医 》 2010 北大核心

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东亚小花蝽对四种害虫的捕食作用

武予清; 赵明茜; 杨淑斐; 段云; 蒋月丽; 《中国生物防治 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：室内饲养的东亚小花蝽Orius sauteri成虫对棉蓟马成虫、烟粉虱4龄若虫、朱砂叶螨雌成螨和甘蓝蚜成虫的捕食作用、种内干扰作用测定结果表明:捕食功能反应均符合HollingⅡ型;东亚小花蝽对棉蓟马的捕食量符合Na=1.0819Nt/(1+0.08485Nt),对朱砂叶螨的捕食量符合Na=2.704Nt/(1+0.1423Nt),对烟粉虱的捕食量符合Na=1.9641Nt/(1+0.2455Nt),对甘蓝蚜的捕食量符合Na=1.5912Nt/(1+0.1808Nt)。东亚小花蝽的捕食作用有较强的种内干扰反应,捕食率与个体间相互干扰的关系符合Hassell模型。东亚小花蝽的捕食量与害虫密度正相关,寻找效应与害虫密度负相关。在这4种害虫中,小花蝽对朱砂叶螨的瞬间攻击率和最大捕食量均最大、处置时间最短,对棉蓟马的瞬间攻击率最小,对烟粉虱的最大捕食量最小、处置时间最长。

关键词： 东亚小花蝽 棉蓟马 烟粉虱 朱砂叶螨 甘蓝蚜 捕食功能 干扰作用

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抗庆大霉素单克隆抗体的制备及其初步应用

职爱民; 李青梅; 刘庆堂; 刘宣兵; 杨继飞; 杨苏珍; 柴书军; 杨艳艳; 邓瑞广; 张改平; 《中国农业科学 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：【目的】制备抗庆大霉素(gentamicin,GM)的高亲和力特异性单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性,为进一步研究GM快速检测试剂盒和试纸条打下基础。【方法】用EDC法将BSA和OVA分别和GM偶联作为免疫原或包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。用合成的BSA-GM免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌GM单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备GM mAb,对GM mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定,;应用阻断ELISA试验原理组装GM-Kit,并对鲜奶中添加的GM标准样品进行测定。【结果】SDS-PAGE电泳鉴定表明BSA-GM人工抗原偶联成功;免疫的3只小鼠血清抗体效价均达到10-3;其中2号小鼠血清GM抑制效价较高且IC50最低,达17.28 ng.mL-1,融合后筛选出5E2-D7、1A3-A9、5E2-A12和2A6-B5共6株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1﹕1600、1﹕800、1﹕800和1﹕800,腹水效价分别为1﹕2.05×107、1﹕5.12×106、1﹕2.56×106和1﹕2.56×106,5E2-D7株对GM的IC50为0.30 ng.mL-1,与链霉素、卡那霉素等其他氨基糖苷类抗生素无交叉反应性;检测鲜牛奶样的平均添加回收率分别为96.0%,平均变异系数均低于15%。【结论】本试验获得了高效价、敏感、特异的抗GM mAb,为GM残留检测奠定了坚实的基础。

关键词： 庆大霉素 单克隆抗体 杂交瘤 初步应用

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