文献类型： 中文期刊

作者： 胡骁飞 ¹ ; 魏凤仙 ² ; 邢广旭 ¹ ; 职爱民 ¹ ; 柴书军 ¹ ; 孙亚宁 ¹ ; 王磊 ¹ ; 邓瑞广 ¹ ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.农业部动物免疫学开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南省农业科学院

2.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 植酸酶;Balb/C小鼠;ELISA;多克隆抗血清

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2011 年 44 卷 03 期

页码： 613-619

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】制备灵敏性高、特异性强的植酸酶多克隆抗体。【方法】将初步纯化的麸皮植酸酶蛋白经凝胶电泳鉴定纯度后,按50μg蛋白/只.次免疫Balb/C小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后一次免疫60 d后,摘眼球取血,制备抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定敏感性和特异性。【结果】凝胶电泳的麸皮植酸酶只有一个条带;血清植酸酶抗体效价达1×104;半数抑制浓度达148.87 ng.mL-1。此抗血清对市售的普通微生物植酸酶、市售包被微生物植酸酶及浓缩的微生物植酸酶的半数抑制浓度分别达到165.59、163.80和166.51 ng.mL-1,交叉反应率分别为89.85%、90.88%和89.41%。100℃煮沸5 min后的麸皮、市售普通微生物植酸酶、市售包被微生物植酸酶及浓缩酶半数抑制浓度分别为2 871.34、5 208.85、7 914.12和5 804.24 ng.mL-1,交叉反应率分别为5.18%、2.86%、1.88%及2.56%。【结论】制备出了具有高效价、高灵敏度和特异性的鼠源植酸酶多克隆抗体,为植酸酶单克隆抗体制备及植酸酶ELISA检测试剂盒研制奠定了基础。