科研产出
高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)是世界上分布最广的侵染甘蔗的病毒之一,引起甘蔗花叶病,对甘蔗产业危害很大。根据SrMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列合成一对引物,以海南(SrMV-HN)染病植株总RNA为材料,采用RT-PCR方法克隆了长约987 bp的目的片段。将CP基因与质粒pET32a(+)连接,构建了含SrMV CP基因的融合蛋白原核表达载体pET32a-SrMVCP。然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测出一条约36kD的特异融合蛋白表达谱带。融合蛋白主要以可溶性蛋白形式稳定表达。通过优化诱导条件,确立了CP基因表达的最佳条件:IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为4 h,诱导温度为30℃。用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清。通过酶联法(ID-ELISA)测定本试验制备的SrMV CP抗血清工作浓度为1∶1 000,Western blotting检测结果表明,抗血清与SrMV-HN诱导表达的CP蛋白发生特异性反应。对田间25个甘蔗样品进行检测,结果表明该抗血清的效价高、灵敏度高、特异性强,可以应用于田间样品的检测。
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巴西橡胶树HbSIP1基因启动子的克隆和序列分析
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为研究橡胶焦磷酸酶基因的表达特征及其在天然橡胶生物合成中调控机理,根据巴西橡胶树焦磷酸酶基因HbSIP1序列,利用GenomeWalker方法对HbSIP1基因启动子序列进行了分离,对其序列进行了生物信息学分析,并构建了含有该序列的植物表达载体pSIP1-1381Z。结果表明:分离获得了1198bp的HbSIP1基因启动子序列,该序列具有真核生物典型启动子结构特征,并含有众多应答激素和胁迫信号的调控元件。对HbSIP1的启动子区的克隆和分析,为进一步研究HbSIP1的功能和表达调控机制奠定基础。
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巴西橡胶HbERF3启动子的克隆与分析
《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据巴西橡胶HbERF3基因序列,利用GenomeWalking技术对其启动子进行克隆和分析,得到了长度为1 572 bp的HbERF3基因的5’端上游启动子区,且分析结果表明,该序列具有典型的真核生物核心启动子区和转录起始位点,除了含有多个TATA-box、CAAT-box等基本顺式元件外,该序列还包含多种与激素应答、逆境胁迫相关的元件。对HbERF3启动子区的克隆和序列分析,为进一步研究HbERF3的表达调控和功能奠定了基础。
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细菌介导RNAi研究甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因功能
《应用昆虫学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：甘蔗Saccharum officinarum L.是热带和亚热带地区种植的主要作物之一,也是许多国家和地区重要的糖料来源。为了解决甘蔗在农业生产中常常被甘蔗螟虫为害,重点控制甘蔗二点螟Chilo infuscatellus Snellen是一条显著提高甘蔗产量和品质的有效途径。近年来,RNA干扰技术已发展成为控制虫害、提高作物品质的新方法,通过dsRNA诱导的RNA干扰可以用来研究昆虫功能基因。本文以甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因为靶标,建立细菌介导的RNAi方法表达CiHR3基因dsRNA,通过提取靶标基因dsRNA,喂饲甘蔗二点螟3龄和5龄幼虫,结果显示:3龄甘蔗二点螟幼虫在一周内发生形态显著变化、体重明显下降;5龄甘蔗二点螟幼虫在一周内形态也出现显著变化,更明显的是出现畸形蛹,非正常化蛹。本研究结果验证了昆虫蜕皮调节转录因子CiHR3可作为甘蔗二点螟生物防治的靶标基因,为后续植物介导的RNAi表达dsRNA防治甘蔗螟虫打下很好的基础。
关键词： 细菌介导RNAi 甘蔗二点螟 CiHR3 生物活性测定
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高性能吸水膨胀橡胶的制备和性能
《橡胶工业 》 2013 北大核心
摘要：介绍一种高性能吸水膨胀橡胶的制备新方法:在丙烯酸钠接枝天然胶乳制备吸水膨胀橡胶过程中,加入纳米晶纤维素(NCC)和纳米硅溶胶(NSS)以同时提高吸水膨胀橡胶的吸水性能和物理性能。结果表明,当丙烯酸钠单体用量为60份、NCC用量为0.75份、NSS用量为3份时,吸水膨胀橡胶的综合性能最好,吸水率达10.013,吸水平衡时间为11h,二次吸水比率为97.3%,拉伸强度为12.25MPa。
关键词： 吸水膨胀橡胶 丙烯酸钠接枝天然胶乳 吸水性能 物理性能
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辛硫磷与阿维菌素对桉树枝瘿姬小蜂的混配增效作用
《农药 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究不同作用机制的杀虫剂混配对桉树枝瘿姬小蜂增效作用。[方法]采用玻管药膜法测定辛硫磷与阿维菌素混用对桉树枝瘿姬小蜂成虫的生物活性,研究2种药剂的联合增效作用。[结果]辛硫磷与阿维菌素对桉树枝瘿姬小蜂具有一定的生物活性,并以有效成分7∶1混配,表现增效作用,共毒系数为220.38,对幼虫、蛹和成虫的校正死亡率分别为76.47%、66.67%和64.00%,优于单剂单独使用。[结论]辛硫磷与阿维菌素混用对桉树枝瘿姬小蜂有增效作用,其中以有效成分7∶1混配增效作用最好。
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感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价
《植物研究 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&PlateTM"Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。
关键词： 香蕉束顶病毒 香蕉叶片 酵母双杂交cDNA文库
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不同培养基成分对铁皮石斛组织培养的影响
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体,讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。结果表明:最适合铁皮石斛原球茎诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.5mg/L,原球茎诱导率为95%;最适合原球茎增殖的培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA1mg/L;最适合原球茎分化的培养基为MS+6-BA5mg/L+NAA1mg/L,其分化率达80%;最适合铁皮石斛根诱导的培养基为MS+IBA1.5mg/L+香蕉泥100g/L,其生根率为100%。
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螺旋粉虱感染蜡蚧轮枝菌对其保护酶和解毒酶活性的影响
《植物保护 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：测定了螺旋粉虱3龄若虫在感染蜡蚧轮枝菌后几种保护酶和解毒酶的活性变化情况。结果表明,螺旋粉虱在感染蜡蚧轮枝菌后不同时间其体内保护酶和解毒酶的活性会产生一定程度的变化。螺旋粉虱的SOD、GST和EST比活力在感染36h后达到最大值,显著高于同期对照组的比活力,分别为对照组的1.21、1.27倍和1.47倍;感染后36h和48h,CAT的比活力显著高于对照组的比活力;而感染后不同时间的POD及MFO比活力差异不显著,与对照组的比活力也无显著性差异。初步判断,螺旋粉虱感染蜡蚧轮枝菌后,其体内的防御机制与SOD、CAT、GST及EST活性有一定的相关性,与POD和MFO活性关联不大。
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西瓜砧木种传尖孢镰刀菌粗毒素研究
《中国植保导刊 》 2013 北大核心
摘要：采用乙酸乙酯和乙醚萃取法提取2株西瓜砧木种传镰刀菌粗毒素中的镰刀菌酸,并用高效液相色谱(HPLC)进行了定量分析;测定了镰刀菌酸粗毒素对西瓜砧木幼苗的致萎蔫作用。结果表明,2株种传尖孢镰刀菌粗毒素中都可检测到镰刀菌酸,质量浓度分别为69.9μg/mL和842.3μg/mL。用2株种传尖孢镰刀菌粗毒素处理西瓜砧木幼苗根部能引起幼苗枯萎,且西瓜砧木幼苗的萎蔫程度随着粗毒素中镰刀菌酸浓度的升高和处理时间的延长而加重。关于西瓜砧木种传尖孢镰刀菌粗毒素中镰刀菌酸含量的检测及其引起幼苗萎蔫为国内首次报道。
关键词： 西瓜砧木 尖孢镰刀菌 粗毒素 镰刀菌酸 高效液相色谱
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